YALEPIC® 通用型基因组DNA提取试剂盒（不含RNase A）

产品货号	产品规格	目录价
YC22016	50T	300.00

产品简介

YALEPIC^® Universal Genomic DNA Isolation Kit（No RNase A）适用于从新鲜/冷冻的动物组织、细胞、血液、细菌等多种样品中提取高质量DNA。本试剂盒采用优化的裂解液及独特的缓冲体系使DNA高效特异的结合到硅基质离心吸附柱上，纯化DNA片段分子量最大可至 50 kb，提取过程中无需使用苯酚/氯仿等有毒溶剂，无需乙醇沉淀。可最大限度地限度地去除RNA、杂蛋白、脂类及其他抑制性杂质，提取的DNA可用于酶切、PCR、Real-Time PCR、印迹杂交、文库构建等多种下游实验。

产品优势

提取的基因组DNA产量高，完整性好，纯度高；

简单快速，最快15~20min内即可获得数个样品的基因组DNA；

完全去除污染物和抑制剂，可适用于各类下游实验。

适用范围

≤ 200 μl 无核新鲜或冻存的抗凝全血；5 ~ 20 μl 有核新鲜或冻存的抗凝全血；

≤ 5 × 10⁶个培养细胞；≤ 25 mg 动物组织；≤ 3 × 10⁹个细菌；≤ 5 × 10⁷个酵母菌。

实验案例

保存及运输条件

常温运输；10 ~ 30℃ 室温保存。

一、提取的DNA存在降解: 原因1：样本采集与保存降解。
解决方案：
1）应尽可能选择新鲜的样本；
2）样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准；
3）样品保存时要尽可能的避免反复冻融；
原因2：样本前处理不当。
解决方案：
1）选择合适的处理方式并进行充分的样本前处理；
2）前处理结束后在样本解冻前添加裂解液；
原因3：样本裂解。
解决方案：
1）需对样本进行充分裂解；
2）正确添加所需试剂种类及使用量，样本量增加时裂解液也需成倍增加；
原因4：样品保存：
解决方案：对得到的DNA产物进行分装保存，避免反复冻融且保存时间不易太久。

二、提取的DNA产量低: 原因1：样本采集与保存：
1）事先了解提取样本中DNA含量水平；
2）样本保存时要尽可能的避免反复冻融，保存时间不宜太久；
3）样本投入量适量，不宜过多或过少；
原因2：样本前处理和裂解：
1）细胞/组织样本：延长消化时间让样品充分消化，或玻璃匀浆器对样品进行匀浆；
2）细菌样本：
3）革兰氏阳性菌破壁不完全，可适量增加Lysozyme 的用量或延长酶消化时间；
4）菌液培养的时间，一般12-16h即可，时间过长会导致细菌死亡，菌体破裂，内容物析出DNA溶于水中，在收集菌体时随着上清被丢弃，故导致产量低；
5）Proteinase K 保存不当导致其活性降低或失活；
原因3：提取纯化：
1）有沉淀析出时，用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量；
2）GB buffer中无水乙醇添加量不准确，按照说明书正确添加无水乙醇；
3) 干燥吸附柱时间：开盖时间不宜超过5min，否则易造成DNA洗脱困难；
4) 洗脱液：请使用YGE buffer洗脱；若用ddH₂O或其他洗脱液时，确认其PH值在7.0-8.5之间；
5）洗脱不充分：预热洗脱液并滴加在膜中央位置，尽可能的覆盖整个吸附膜，增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。

提取的DNA纯度低: 1.样本投入量不要太多；
2.样本应进行充分裂解：
3. 使用RNase对RNA进行处理，处理时间不宜太短，富含RNA 样品如肝脏、肾脏，培养细胞富含RNA，可延长RNase 消化时间至60 min；
4. 蛋白及盐离子残留：使用蛋白变性剂或蛋白酶K；GA Buffer /GB Buffer 漂洗充分；
5. 乙醇残留：吸附柱在洗脱前，未空管离心去除乙醇。请按照说明书空管离心后打开吸附柱管盖，室温放置2-5 min让乙醇彻底挥发。