YALEPIC^® DNA/RNA通用型转染试剂-LFDR3

YALEPIC^® DNA/RNA通用型转染试剂-LFDR3是雅礼生物自主研发的DNA/RNA通用型转染试剂。可高效完成DNA、siRNA、mRNA三类核酸转染，对常规贴壁细胞和难转染细胞系均具备优异效果。转染复合物可直接加入完全培养基，无需换液。细胞毒性显著低于传统脂质体试剂，转染效率高、稳定性优异、储运友好。适用于基因过表达、RNA干扰、mRNA蛋白表达、基因编辑筛选等多类细胞和分子实验。雅礼生物YALEPIC品牌，国家高新技术企业。

• 通用性强：兼容 DNA、siRNA、mRNA 多种核酸，一试剂满足多种转染实验需求；
• 转染效率高：针对常规细胞、难转染细胞系均有出色转染表现，复合物结合与释放能力优异；
• 细胞毒性低：生物相容性好，保护细胞活性，适配原代细胞、敏感细胞等特殊样本；
• 操作便捷：转染复合物可直接加入完全培养基，省去换液、无血清培养等繁琐步骤；
• 稳定性优异：试剂性质稳定，实验重复性高，批次间误差小；
• 储运友好：支持常温运输，实验室常规冷藏即可保存，使用门槛低。

已验证的适用细胞类型：

• 常规贴壁细胞：HEK293/HEK293T、HeLa、CHO、COS-7、Vero、BHK-21
• 肿瘤细胞系：A549（肺癌）、HepG2（肝癌）、MCF-7（乳腺癌）、PC-3（前列腺癌）
• 难转染细胞：Jurkat（T细胞白血病）、K562（白血病）、原代神经元、原代成纤维细胞
• 干细胞：间充质干细胞（MSC）、胚胎干细胞（ESC）

适用的核酸类型：

• 质粒DNA（过表达载体、报告基因质粒、CRISPR/Cas9质粒）
• siRNA（基因沉默/敲低实验）
• mRNA（mRNA疫苗/治疗研究、蛋白表达）
• miRNA模拟物/抑制剂

典型应用场景：

• 基因过表达与功能研究
• RNA干扰与基因沉默
• CRISPR/Cas9基因编辑
• 病毒包装（慢病毒、腺病毒）
• 蛋白表达与小规模生产

常温运输；2 ~ 8℃ 保存，不可冷冻。

Q1：LFDR3转染试剂可以同时转染DNA和RNA吗？

A：可以。LFDR3是一款真正的DNA/RNA通用型转染试剂，同一配方即可高效转染质粒DNA、siRNA、mRNA以及miRNA模拟物等多种核酸。无需为不同类型的核酸单独采购专用试剂，特别适合需要同时开展基因过表达和基因沉默研究的实验室，可显著降低试剂采购成本和管理复杂度。

Q2：LFDR3能否进行DNA和siRNA的共转染实验？

A：可以。LFDR3设计之初即考虑了共转染场景的需求。通过优化转染复合物的形成条件，用户可以将质粒DNA与siRNA按比例混合后与LFDR3试剂共同孵育，形成包含两种核酸的共转染复合物，实现对同一细胞的同时过表达和基因沉默。建议初次使用时按1:1的DNA:siRNA质量比进行摸索优化。

Q3：LFDR3的细胞毒性相比传统转染试剂如何？

A：LFDR3的细胞毒性显著低于传统脂质体类转染试剂。传统阳离子脂质体转染试剂在高浓度下易引发细胞膜损伤和内质网应激，导致细胞死亡。LFDR3采用创新的低毒性高分子材料配方，转染后24-48小时的细胞存活率可维持在90%以上（具体因细胞类型而异）。这对于敏感细胞系（如原代神经元、免疫细胞、干细胞）的实验结果可靠性尤其重要。

Q4：LFDR3适用于哪些难转染细胞？

A：除常规贴壁细胞外，LFDR3在多种难转染细胞中均表现良好，包括悬浮细胞（Jurkat、K562）、原代细胞（原代神经元、原代成纤维细胞）、干细胞（间充质干细胞MSC、胚胎干细胞ESC）以及部分对化学试剂敏感的肿瘤细胞系。不同细胞系的转染效率存在差异，建议首次使用前进行预实验优化转染条件。

Q5：LFDR3是否适用于悬浮细胞转染？

A：适用。LFDR3可有效转染悬浮细胞系如Jurkat（人T细胞白血病细胞）、K562（人慢性髓系白血病细胞）等。悬浮细胞转染建议：选择对数生长期的细胞，调整细胞密度至约5×10⁵-1×10⁶ cells/mL，转染复合物形成后直接加入细胞悬液中，孵育4-6小时后可根据实验需求选择是否更换新鲜培养基。

Q6：LFDR3转染时是否需要无血清条件？

A：不需要。LFDR3的最大操作优势之一就是具有优异的血清兼容性。转染复合物形成后可直接加入含10%胎牛血清（FBS）的完全培养基中进行转染，无需在转染前用无血清培养基清洗细胞，也无需在转染过程中更换培养基。这一特性大幅简化了操作流程，降低了操作误差和污染风险，特别适合高通量转染筛选实验。

Q7：LFDR3的推荐DNA:试剂比例是多少？

A：对于大多数细胞系，推荐的DNA用量与LFDR3试剂体积比例为1:2至1:3（即1μg DNA对应2-3μL LFDR3试剂）。初次使用建议按1:2、1:2.5、1:3设置梯度比例进行预实验优化。对于敏感细胞或难转染细胞，可能需要适当降低试剂用量以减少细胞毒性。具体的优化方案可参考产品说明书或联系雅礼生物技术支持。

Q8：LFDR3的转染步骤耗时多长？

A：LFDR3的转染流程非常简捷，全程约30分钟即可完成复合物配制和添加操作：①稀释DNA/RNA（约5分钟）；②加入LFDR3试剂（约5分钟）；③室温孵育复合物（10-15分钟）；④直接将复合物加入细胞培养板中（约5分钟）。转染后无需更换培养基，4-6小时后即可根据实验需求进行下游操作。相比需要更换培养基的转染试剂，单次实验可节省30-60分钟。

Q9：LFDR3应该如何保存？开封后能保存多久？

A：LFDR3应在2-8℃避光保存，严禁冷冻（冷冻会导致试剂结构破坏，严重影响转染性能）。产品未开封时有效期为24个月。开封后建议继续2-8℃保存，旋紧瓶盖防止挥发和污染，在有效期内使用完毕。如实验用量较大，可考虑分装保存以减少反复开盖次数，每次使用前充分混匀，避免剧烈震荡。

Q10：转染效率低或细胞死亡过多，应该如何排查？

A：转染效果不理想通常与以下因素有关：①细胞状态——细胞密度应在70-90%融合度，处于对数生长期；②核酸质量——确保DNA/RNA纯度高、无内毒素、浓度准确；③比例优化——DNA:试剂比例可能需要根据细胞类型调整；④保存条件——确认试剂未反复冻融或长期暴露于室温。建议从问题中提到的方向依次排查。如有更具体的问题，可联系雅礼生物技术支持团队获取个性化实验建议。