贴壁 / 悬浮 / 原代细胞通用,转染稳定、无需换液,科研实验首选
| 产品货号 | 产品规格 | 目录价 |
|---|---|---|
| YJ52003-01 | 1ml | 1250.00 |
| YJ52003-02 | 5ml | 5900.00 |
YALEPIC® mRNA Transfection Reagent-LFMR是mRNA 专属递送转染试剂,专为细胞 mRNA 转染实验研发,可直接将 mRNA 送入细胞质完成蛋白表达,规避细胞核穿透限制与转录调控影响,是短期蛋白表达研究的核心实验耗材。本款 LFMR 转染试剂兼容性极强,可应用于各类贴壁细胞、悬浮细胞转染;试剂不受血清干扰、细胞毒性极低、理化稳定性优异,实验操作简单,平行实验重复性佳,大幅降低细胞转染实验操作门槛,广泛服务于生物实验室、生物医药研发、细胞生物学等科研场景。
常温运输,2 ~ 8℃ 保存,不可冷冻。
Q1:YALEPIC mRNA转染试剂-LFMR与普通DNA转染试剂有何不同?
A:YALEPIC mRNA转染试剂-LFMR是专为mRNA递送设计的专用转染试剂。与传统DNA转染试剂不同,mRNA无需进入细胞核即可在细胞质中直接表达蛋白,避免了转录调控的限制,表达速度更快。此外,本产品不受血清影响,可在含血清培养基中直接使用,而多数DNA转染试剂需在无血清条件下操作。
Q2:该试剂可以用于哪些细胞类型的转染?
A:本产品适用于多种贴壁细胞(如293T、HeLa、CHO、MCF-7、A549等)和悬浮细胞(如Jurkat、K562等)的mRNA转染。尤其对原代细胞、巨噬细胞、干细胞以及神经细胞等难转细胞均具有较高的转染效率–。
Q3:转染过程中是否需要去除血清?转染后是否需要换液?
A:不需要。YALEPIC mRNA转染试剂-LFMR的最大优势之一就是不受血清影响,转染复合物形成后可直接加入完全培养基中进行转染,全程无需去除血清,也无需在转染后更换新鲜培养基,极大简化了操作流程。
Q4:转染效率低可能是什么原因?如何优化?
A:转染效率低通常与以下几个因素有关:(1)LFMR与mRNA比例不合适,建议在2:1至5:1(μl:μg)之间调整优化;(2)细胞密度不当,建议细胞融合度达到60%-70%时进行转染;(3)转染体系中含有抑制因素(如硫酸葡聚糖、肝素等多聚阴离子聚合物),应避免;(4)细胞状态差,应使用适度传代、状态良好的细胞系。
Q5:该试剂的细胞毒性如何?
A:本产品毒性极低,不会对细胞造成显著损伤或死亡。如出现细胞毒性,可能是由于细胞状态不佳或转染效率过高导致的毒性反应,可通过适当减少转染试剂用量来降低细胞毒性。
Q6:如何保存该转染试剂?运输过程中需要注意什么?
A:本产品支持常温运输,收到后应置于2-8℃条件下保存,严禁冷冻。开封后请及时盖紧瓶盖避免污染,建议分装保存以减少反复冻融。按推荐条件保存,有效期为12个月。
Q7:该试剂是否兼容CRISPR/Cas9基因编辑应用?
A:是的。本产品可高效递送Cas9 mRNA和sgRNA进行共转染,用于CRISPR基因编辑实验。在体外实验中配合优化后的转染条件,可达到较高的基因编辑效率,适用于基因敲除、点突变等基因编辑研究。
Q8:转染效果不稳定怎么办?
A:转染效果稳定性取决于转染试剂的稳定性和mRNA的稳定性。请确保转染试剂按说明书建议的保存条件(2-8℃)存放。mRNA如短时间内连续使用可放置于4℃保存;若超过10天不使用,建议置于-20℃或-80℃长期储存以降低核酸降解速度。
Q9:YALEPIC® mRNA转染试剂-LFMR与同类竞品(如Lipofectamine MessengerMAX)相比有何优势?
A:YALEPIC mRNA转染试剂-LFMR在保持高效转染性能的同时,提供更具竞争力的价格。产品覆盖所有主流mRNA转染应用场景,与进口品牌在技术参数上对标,尤其适合预算有限但需要稳定转染表现的高校实验室及企业研发部门。支持常温运输,仓储要求更低,更具灵活性。
Q10:是否提供技术支持与试用装?
A:雅礼生物提供全面的售前技术咨询与售后服务支持,包括转染条件优化建议、操作指南答疑等。欢迎联系获取更多产品信息:电话0512-66256010,邮箱info@yalibiotech.com。关于试用装或批量采购优惠,请与销售团队直接沟通。
LFMR(μl):mRNA(μg) 剂量可以在2:1和5:1μl 之间进行调整。
细胞密度过低导致细胞生长缓慢,对外来刺激变得较为敏感,使得转染毒性增高。细胞密度过高,会导致细胞发生接触抑制,加快细胞凋亡。细胞融合度达到60% – 70%时,转染可以取得较高的转染效率。可预实验优化细胞转染密度。
当转染体系中存在多聚阴离子聚合物时(例如:硫酸葡聚糖、肝素等),转染将无法正常进行,因此应避免上述物质存在于细胞转染体系中。
应尽量使用适度传代接种的细胞系,并尽量在平行实验时保持细胞传代次数的一致性,同时需避免细胞培养时间过长。
可能是如下两个原因造成的:1)细胞状态不好,参看第4条进行优化。2)转染效率太高,毒性由高转染效率带来。可通过调整试剂和基因的比例来降低细胞毒性,适量减少转染试剂的用量,可以降低复合物颗粒表面过量的正电荷从而降低细胞毒性。转染效率高导致的细胞毒性大并不影响蛋白的生产,可以继续对蛋白产量进行监控。
转染效果稳定性取决于转染试剂的稳定性和基因的稳定性。转染试剂应按照说明书建议的保存温度及条件进行保存。基因如短时间内连续使用,可放置于4℃保存。若超过10天不使用,建议置于-20℃或-80℃长期储存以降低核酸的降解速度。