YALEPIC^® 唾液DNA提取试剂盒（不含RNase A）

YALEPIC^® 唾液DNA提取试剂盒（不含RNase A）专为科研实验室唾液样本基因组 DNA 提取设计，可高效处理新鲜唾液样本及唾液与保存液混合样本。

• DNA 品质优异：提取基因组 DNA 片段完整无断裂，纯度高、批次质量稳定，重复性强
• 多重杂质去除：专业缓冲体系最大限度剥离 RNA、杂蛋白、脂类及各类扩增抑制物
• 安全环保无毒：全程无需苯酚、氯仿等有毒有机溶剂，实验操作更安全合规
• 高效省时便捷：简化实验步骤，手动操作时间不超过 20min，新手也可快速上手
• 储运条件宽松：支持常温运输，10-30℃室温即可保存，无需低温冷链，降低使用成本

• 生物科研新鲜唾液样本基因组 DNA 提取
• 口腔唾液 + DNA 保存液混合液样本纯化
• 院校实验室、医学检测、基因科研等通用分子实验样本前处理

常温运输；10 ~ 30℃ 室温保存。

Q1：唾液样本采集时有哪些注意事项？

A： 采集唾液样本时，建议注意以下几点：

1. 采集前30分钟内避免进食、饮水、吸烟或咀嚼口香糖，以免影响DNA质量；

2. 采集前可用清水轻轻漱口，去除口腔中的食物残渣；

3. 建议采集200~500 μL新鲜唾液作为起始样本量（可根据实验需求适当调整）；

4. 采集后如无法立即提取，可将唾液与唾液保存液按推荐比例混合（通常为1:1），室温保存可达数周至数月而不影响DNA质量；

5. 避免唾液中混入过多气泡，气泡可能导致样本体积计量不准。

Q2：本试剂盒可提取的最小唾液样本量是多少？

A： 本试剂盒优化的缓冲体系可处理200~500 μL唾液样本，推荐标准用量为400 μL。如需处理微量样本（如低于200 μL），建议使用唾液保存液或PBS补齐至标准体积后进行提取，或在说明书指导下按比例缩小各试剂的用量。对于极微量样本（如＜50 μL），建议选择专门为微量样本设计的DNA提取试剂盒。如需进一步指导，请联系雅礼生物技术支持。

Q3：提取的DNA纯度和浓度是否满足二代测序要求？

A： 可以满足。本试剂盒提取的唾液基因组DNA经严格的洗涤步骤充分去除了蛋白质、多糖、脂质及其他PCR抑制剂，A260/A280比值通常在1.7~2.0之间，A260/A230比值＞1.8，DNA片段大小＞15 kb，完全符合二代测序文库构建的质量要求（如Illumina、MGI等平台）。已有用户使用本产品提取的唾液gDNA成功完成了全外显子测序文库构建和上机测序。若需要用于NGS，建议在文库构建前进行DNA浓度精确定量（推荐Qubit荧光定量法）。

Q4：试剂盒是否可用于提取口腔拭子样本中的DNA？

A： 本试剂盒专为唾液样本设计，但也适用于口腔拭子样本的DNA提取。对于拭子样本，建议将拭子头剪下放入离心管中，加入裂解液和蛋白酶K后充分振荡以释放细胞，后续操作与唾液样本完全一致。如需专门用于拭子样本的高通量提取，可参考雅礼生物其他核酸提取产品线。

Q5：试剂盒为什么不含RNase A？如果我想获取总RNA怎么办？

A： 本试剂盒默认不含RNase A，原因如下：

1. 部分下游应用（如同时分析DNA和RNA、RNA干扰研究等）需要在提取过程中保留RNA组分；

2. 不含RNase A的试剂盒可为用户提供更大的实验灵活性，用户可根据实际需求选择是否添加RNase A。

如需获取总RNA： 用户可在裂解步骤后向样本中加入适量RNase A溶液（试剂盒未提供，需自备或另购），37℃孵育15~20分钟后继续后续操作。如需在提取DNA的同时保留RNA用于后续检测，建议使用专门为DNA/RNA共提取设计的试剂盒。

Q6：试剂盒的常温保存稳定性如何？开封后可以保存多久？

A： 本试剂盒在未开封情况下可在10℃~30℃室温条件下稳定保存12个月。开封后，各组分在正确储存条件下（裂解液、洗涤液、洗脱液室温保存；蛋白酶K建议-20℃保存）仍可使用至标示的有效期。建议每次使用后立即盖紧瓶盖，避免污染和试剂挥发。洗涤液2浓缩液开封后请立即加入指定体积的无水乙醇，标记加醇日期，加醇后室温保存，并在6个月内使用完毕。具体有效期以产品外包装标签为准。

Q7：提取的DNA中是否含有PCR抑制剂？如何判断？

A： 本试剂盒包含优化的洗涤体系，经过两步洗涤步骤可有效去除蛋白质、多糖及其他酶促反应抑制剂。提取的DNA可直接用于PCR、qPCR等酶促反应，无需额外纯化。如需验证是否存在PCR抑制剂，可采用以下方法：

1. 内参扩增对照法： 将已知浓度的标准DNA模板与等量提取的DNA混合后进行PCR扩增，比较扩增效率；

2. A260/A230比值法： A260/A230比值＜1.8提示可能存在胍盐、多糖或其他抑制物残留；

3. 浓度梯度稀释法： 将提取的DNA进行梯度稀释后进行PCR，观察扩增曲线是否呈线性关系。

Q8：产品是否支持自动化提取或高通量操作？

A： 本试剂盒基于离心柱法手动操作设计，适合中小通量样本处理（50T规格）。如您需要高通量自动化提取解决方案,雅礼生物可提供磁珠法唾液基因组DNA提取试剂盒产品 YALEPIC^® 磁珠法唾液DNA提取试剂盒 CAT#YM26010,请访问雅礼生物官网或联系销售获取详细信息。

Q9：提取的DNA能否长期保存？保存条件是什么？

A： 提取纯化后的唾液基因组DNA可在以下几种条件下长期保存：

• -20℃保存： 溶解于洗脱液或无核酸酶水中，可保存6~12个月，适合中短期存储；

• -80℃保存： 可长期保存（数年以上），建议分装为小管以避免反复冻融导致的DNA降解；

• 4℃短期保存： 提取后3~5天内使用的DNA可暂存于4℃。

Q10：如何提高低丰度唾液样本的DNA得率？

A： 对于低丰度DNA的唾液样本（如老年人、干燥综合征患者、长期服药人群等），可尝试以下优化措施提高得率：

1. 增加样本起始量： 在不超出离心柱载量（通常≤30 μg DNA）的前提下，适当增加唾液样本体积至600~800 μL；

2. 优化裂解时间： 将裂解步骤延长至15~20分钟，必要时提高裂解温度至65℃；

3. 减少洗脱体积： 采用50 μL（而非100 μL）洗脱液洗脱，提高DNA浓度；

4. 两次洗脱合并： 用30~40 μL洗脱液洗脱两次，合并收集管中的DNA溶液；

5. 洗脱液预热： 将洗脱液预热至65~70℃后再加入吸附柱，可提升洗脱效率；

6. 延长洗脱孵育时间： 加入洗脱液后室温放置2~5分钟再离心，确保DNA充分溶解。

Q11：试剂盒是否适用于含保存液的唾液样本？

A： 适用。本试剂盒明确标注适用于“唾液/保存液混合液”样本的基因组DNA提取。商业化唾液保存液,通常包含稳定细胞膜、抑制核酸酶活性的成分，与试剂盒的裂解缓冲体系兼容。建议在使用前咨询保存液供应商确认其成分与本试剂盒的兼容性。对于未经测试的保存液品牌，建议先取少量样本进行预实验验证。