YALEPIC® siRNA转染试剂-LFSR
基于阳离子聚合物技术平台的siRNA专用转染试剂,能高效稳定递送siRNA至各类真核细胞,保护siRNA免受核酸酶降解。广泛适用于原代细胞、贴壁细胞及转化细胞株,常见细胞系靶基因沉默效率可达90%以上。
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- FAQ
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产品简介
YALEPIC® siRNA 转染试剂-LFSR是一款专为siRNA基因沉默实验研发的高效转染试剂,基于先进的阳离子聚合物技术平台,能够将小干扰RNA(siRNA)高效、稳定地递送至各类真核细胞内部,同时有效保护siRNA免受核酸酶降解,确保RNA干扰(RNAi)实验的成功率与可重复性。本品广泛适用于原代细胞、贴壁细胞及转化细胞株的siRNA转染,在多种常见细胞系中均表现出优异的转染效率与基因沉默效果。试剂性能稳定,不受培养基中血清成分的影响,转染前无需更换无血清培养基,转染后也无需换液,极大简化了实验操作流程。相比同类进口试剂,YALEPIC® siRNA转染试剂-LFSR在维持高转染效率的同时展现出更低的细胞毒性,特别适合对细胞状态要求较高的原代细胞及敏感细胞系的RNA干扰研究。
产品优势
| 优势项 | 详细说明 |
|---|---|
| 范围广 —— 普适性强 | 适用于多种真核细胞类型(原代细胞、贴壁细胞、悬浮细胞、干细胞等)和siRNA、miRNA等多种小RNA分子的高效导入,转染试剂普适性优秀。 |
| 高效性 —— 沉默效率高 | 高效将siRNA转染到真核细胞中而不被核酸酶降解,配合优化的siRNA序列可实现90%以上的靶基因沉默效率。 |
| 低毒性 —— 细胞友好 | 毒性极低,不会对细胞造成显著损伤或死亡,尤其适合对细胞活力要求较高的原代细胞和敏感细胞系的转染实验。 |
| 稳定性 —— 品质可靠 | 试剂稳定性极佳,2-8℃保存条件下性能长期保持,不易受环境温度等因素影响。 |
| 操作便捷 —— 流程简化 | 可用无血清培养基或完全培养基直接稀释,转染过程中无需换液,不受血清和抗生素影响,大幅降低操作污染风险。 |
| 可重复性 —— 数据可靠 | 转染效果稳定一致,平行实验重复性好,确保RNA干扰实验数据的科学严谨性。 |
| 性价比高 —— 经济实惠 | 在保证优异转染性能的前提下,提供极具竞争力的市场价格,是进口高端品牌试剂的理想国产替代选择。 |
实验案例

适用范围
适用细胞类型:
-
原代培养细胞(原代神经元、原代肝细胞、原代成纤维细胞等)
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常规贴壁细胞株(HeLa、HEK293、A549、MCF-7、HepG2等)
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难转染细胞系(悬浮细胞Jurkat、K562,以及部分干细胞系)
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转化细胞株
适用研究领域:
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基因功能研究(基因敲低与功能验证)
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RNA干扰(RNAi)机制研究
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药物靶点筛选与验证
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siRNA文库筛选
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miRNA功能研究
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信号通路调控机制解析
保存及运输条件
常温运输,2 ~ 8℃ 保存,不可冷冻。
FAQ
Q1:YALEPIC siRNA转染试剂-LFSR适用于哪些细胞类型?转染效率如何?
A:本品适用于多种真核细胞的siRNA转染,包括原代细胞(如原代神经元、原代肝细胞)、常规贴壁细胞株(HeLa、HEK293、A549、MCF-7、HepG2等),以及部分难转染细胞系。在大多数常规细胞系中,siRNA转染效率可达85%以上,靶基因沉默效率通常在70%-90%之间(具体效率与siRNA序列设计和细胞类型相关)。对于难转染的悬浮细胞,建议适当增加试剂用量并进行预实验优化。
Q2:转染过程中是否需要更换培养基?血清对抗生素有影响吗?
A:本品最大的操作优势在于转染全程无需更换培养基。试剂性能稳定,不受培养基中血清成分的影响,可直接在含血清的完全培养基中进行转染操作。同时,抗生素的存在对转染效果无明显干扰,无需特意使用无抗生素培养基。这一特点使得本产品尤其适合高通量筛选和常规实验操作,大幅降低污染风险和操作复杂度。
Q3:如何优化LFSR转染试剂与siRNA的用量比例?
A:推荐LFSR(μl)与siRNA(pmol)的用量比例在0.04:1至0.12:1之间进行调整。建议首次使用时以0.08:1为起点,根据细胞类型和转染效果进行梯度优化。对于较难转染的细胞(如悬浮细胞或原代细胞),可适当提高比例至0.10:1-0.12:1。对于siRNA用量,一般每孔(24孔板)siRNA终浓度建议控制在10-50 nM之间,根据细胞敏感性和基因靶点进行调整。
Q4:转染时细胞密度应该控制在什么范围?
A:细胞融合度达到60%-70%时进行转染可获得较高的转染效率。细胞密度过低(<40%)会导致细胞生长缓慢,对外源刺激敏感,转染毒性升高;细胞密度过高(>85%)则可能导致细胞接触抑制,加快凋亡进程。不同细胞类型的最适转染密度可能存在差异,建议针对具体细胞进行预实验优化。
Q5:试剂如何保存?有效期是多久?
A:本品于2-8℃冷藏保存,不可冷冻。在推荐的保存条件下,有效期为12个月。每次使用后应立即将试剂放回2-8℃冰箱,避免长时间室温放置。如预期超过10天不使用,建议将试剂存放于4℃稳定环境中,无需转移至-20℃保存。应避免反复的温度波动,以免影响试剂性能。
Q6:转染后细胞出现毒性反应,可能是什么原因?如何解决?
A:导致转染细胞毒性升高的常见原因包括:(1)siRNA用量过大;(2)LFSR转染试剂用量过大;(3)转染时细胞状态较差(如细胞代数过高或培养时间过长);(4)培养基中存在多聚阴离子聚合物(如硫酸葡聚糖、肝素等)。解决方案:严格按照说明书推荐比例进行试剂与siRNA配比,使用适度传代且状态良好的细胞(建议使用10-20代以内的细胞),检查并排除培养基中可能存在的抑制性成分。
Q7:转染效率很高,mRNA水平明显降低,但蛋白水平没有降低,这是为什么?
A:这是RNA干扰实验中较为常见的现象,可能与以下两个因素有关:(1)使用的siRNA序列本身导致蛋白表达量偏低——siRNA的沉默效果在mRNA和蛋白水平上可能存在时程差异,建议在转染后48-72小时检测蛋白水平,某些蛋白半衰期较长需要更长的观察时间;(2)细胞类型的影响——部分难转染细胞或特殊细胞系中,即使siRNA被高效内吞,但基因在细胞内的表达效率可能受限,导致蛋白水平变化不明显。
Q8:转染效果不稳定,批次间差异大,是什么原因?
A:转染效果的稳定性取决于转染试剂本身的稳定性和siRNA的稳定性两个核心因素。建议:(1)严格按照推荐保存条件(2-8℃)存放LFSR试剂,避免温度剧烈波动;(2)siRNA如短期内连续使用,可存放于4℃保存;如超过10天不使用,建议分装后置于-20℃或-80℃长期储存,以降低核酸降解速度;(3)保持细胞传代次数的一致性,避免使用代数过高(>30代)的细胞;(4)尽量在平行实验中采用同一批次配制的转染复合物,减少操作误差。
Q9:该试剂能否用于miRNA或siRNA文库的高通量筛选?
A:可以。YALEPIC® siRNA转染试剂-LFSR操作流程简便(无需换液、不受血清影响),非常适合96孔板或384孔板形式的高通量siRNA文库筛选实验。建议在正式筛选前,针对目标细胞类型进行小规模的转染条件优化(包括细胞密度、试剂/siRNA比例等),以确定最佳转染参数。试剂操作的一致性和可重复性可确保高通量筛选数据的可靠性与稳定性。
Q10:本产品与进口品牌Lipofectamine RNAiMAX相比有哪些优势?
A:YALEPIC® siRNA转染试剂-LFSR具有以下核心优势:(1)性价比突出——在保证同等甚至更优转染效率的前提下,价格更具竞争力,是进口试剂的经济高效替代方案;(2)细胞毒性更低——尤其适合对细胞活力要求较高的原代细胞和敏感细胞系;(3)操作更便捷——转染全程无需更换培养基,不受血清和抗生素影响;(4)供货稳定——国产品牌,物流周期短,无进口清关等待时间。在常规细胞系的siRNA转染中,LFSR的沉默效率与RNAiMAX相当或更优。