YALEPIC^® NT型粪便/土壤基因组DNA提取试剂盒（含RNase A）

YALEPIC^® NT型粪便/土壤基因组DNA提取试剂盒（含RNase A）由雅礼生物自主研发，专为粪便和土壤复杂环境样本基因组 DNA 提取设计，可一次性提取样本中微生物、细菌、寄生虫、病毒全品类总 DNA。

• 安全无毒：无苯酚氯仿萃取，绿色实验操作，实验室合规可用
• 快速高效：全程 1 小时完成提取，单样本最高得率可达 20μg
• 高纯度去杂：强效去除腐殖酸、胆盐、蛋白、脂类及 RNA 干扰，无抑制剂残留
• 广谱适配：兼容固态 / 液态粪便、农田土山林土淤泥等全类型样本
• 下游通用：适配二代测序、qPCR、文库构建、印迹杂交等全场景实验
• 储运便捷：常温运输，组分分区保存，稳定性强、有效期长

• 粪便样本：人、小鼠、大鼠、犬、猫、猪、鸡、牛等新鲜或冻存粪便，含商业保存液样本同样适用。

• 土壤及沉积物：农田土、森林土、草原土、湿地底泥、河湖沉积物、堆肥、活性污泥、根际黏土。

• 环境拭子与腐殖质：如肠道造口排泄物拭子、蚯蚓粪、泥炭、腐叶土等极高腐殖酸样本。

• 拓展适用：适用于瘤胃内容物、肠道食糜等消化半固态样本（需预研磨）。

常温运输；RSL Buffer 2～8℃ 保存，其他组分 10 ~ 30℃ 室温保存。

Q1：这款试剂盒能提取土壤中的哪些微生物DNA，包括真菌吗？
A：可以，提取的基因组DNA涵盖土壤中细菌（含芽孢杆菌、放线菌）、古菌和真菌的完整基因组。裂解过程采用物理和化学双重方法，配备高密度研磨珠，能够有效破壁霉菌丝体和厚垣孢子，保证真菌DNA得率。常用于细菌16S rDNA、真菌ITS及18S rDNA扩增与测序。

Q2：粪便样本在提取前需要特殊的预处理或保存条件吗？
A：推荐采集后立即冻存于-80℃或使用商业粪便保存液稳定核酸。若新鲜样本直接提取，取200 mg即可；冻存样本避免反复冻融，称取后直接加入裂解管。液态或半液态粪便（如腹泻便）可用无菌棉拭子蘸取后直接浸入裂解液起始提取，无需冷冻干燥，操作友好。

Q3：提取的DNA电泳条带弥散或得率低是怎么回事？样本裂解不充分如何解决？
A：弥散常见于腐殖酸残留或过度机械剪切。本试剂盒优化了涡旋时间（水平涡旋适配器最高速5分钟），如出现弥散，可将涡旋转速调整为中等强度，避免过度打断。得率低多见于土壤样本过少或高沙质土，建议增加样本量，延长裂解时间。

Q4：获得的DNA溶液中出现褐色或黄色，会影响下游实验吗？
A：轻微着色往往源于残留腐殖酸或粪胆素，少量色素对常规PCR和qPCR无影响。若颜色深且比值低，建议将洗脱液升温至65℃洗脱，或在结合步骤前增加一次等体积氯仿抽提的替代步骤（但NT型本身已整合高效沉淀，多数样本无需此步）。

Q5：提取的DNA是否含有抑制剂？下游qPCR出现Ct延迟怎么办？
A：本试剂盒核心设计就是去除抑制剂。采用专有沉淀液使腐殖酸、胆汁盐和多糖形成不溶性复合物离心除去。若仍出现Ct延迟，可能为裂解不彻底致DNA得率低或极少量抑制剂残留。建议首先增加2 μl洗脱DNA为模板复检，若Ct提前则表明模板量不足；若仍延迟，可将DNA用洗脱缓冲液做1:2稀释后重新扩增，稀释可消除微量抑制剂干扰。正常操作下，本试剂盒提取的粪便与土壤DNA在qPCR中Ct值与理论值偏差不超过±0.5。