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病毒核酸提取如何提高低拷贝检出率?20 分钟双核酸共提取方案

发布时间:2026-07-21

YALEPIC® 磁珠法病毒核酸提取 · YG28002

一份样本,一次裂解
病毒 DNA 与 RNA 同时拿到

最快 20 分钟完成单批次提取|常规上样 100–200 μL|血浆、拭子、痰液、粪便等样本入口|基础款 96T 与 A/B/C 三款预装可选

低拷贝样本检出率上不去,很多人下意识会归因于「试剂灵敏度不够」。但把提取环节拆开看,更常见的失分点在这里:同一份拭子或血浆,病毒 DNA 提一遍、RNA 再提一遍——两次裂解、两套管、两次过柱或磁分离,样本被消耗两轮。低载量样本到了第二轮,往往已经不足以支撑一次干净的扩增。YG28002 要解决的就是这件事:一次裂解,同管把病毒 DNA 与 RNA 一起拿下来,让样本只被消耗一次。

01 低拷贝为什么常卡在提取这一步

样本量本来就不够分

拭子洗液、脑脊液、支气管灌洗液这类样本,总量常在几毫升以内。分两次提取,等于把有限的核酸原料摊薄两次。

两次裂解的损耗是叠加的

裂解、结合、洗涤、洗脱四步里每一步都有物理损失。走两遍流程,损失就叠两遍,低拷贝样本对这点损耗特别敏感。

抑制物被带进扩增体系

血红素、粘液、无机盐没清干净,会直接压低 qPCR 扩增效率。表现为 Ct 值偏高、复孔离散,看起来像”载量低”,其实是抑制。

两次结果对不上,没法互相校核

DNA 与 RNA 分两管提,投入量、损耗、抑制程度都不同。同一样本的两组数据缺乏共同基准,复核时很难判断偏差出在哪一步。

02 共提取解决的是”样本只够提一次”

呼吸道混合感染、不明原因发热排查、畜禽疫病鉴别,共同点是事先不知道目标是谁——可能 DNA 病毒,可能 RNA 病毒,也可能两者同时在。这类场景如果按”先提 DNA、再提 RNA”的老流程走,等于替一个还不确定的问题先付两遍成本。

YG28002 的做法是:优化后的缓冲裂解体系把病毒衣壳打开后,DNA 与 RNA 在同一份裂解液里同时被磁珠捕获,后续洗涤、洗脱共用一条通路。单份样本、一次操作,同时拿到两类核酸——对珍贵样本是”少损耗”,对批量筛查是”流程减半”。

这里只讲”为什么这个产品能给两样”。共提取在什么条件下成立、磁珠与缓冲体系各自承担什么、和分开提相比定量结果怎么校核——这一层方法论另有一篇单独展开,见页尾延伸阅读。

03 样本谱与前处理:三个动作决定成败

YG28002 覆盖病原检测的绝大多数入口。液体类:全血、血浆、血清、无细胞体液、淋巴液、尿液、细胞培养上清、各类病毒保存液;固体与分泌物类:口腔/鼻咽拭子、痰液、组织匀浆液、粪便。常规推荐上样体积 100–200 μL,血浆与血清可直接加样。

三个前处理动作值得直接写进 SOP,比换试剂更立竿见影:

样本类型 动作 为什么
全血 先分离血浆,取血浆上样 减少血红素类杂质进入体系,抑制物负荷显著下降
痰液 先用生理盐水稀释再上样 降低粘稠度,磁珠分散更充分,结合效率更稳
粪便 取上清提取,不带沉渣 避开大量颗粒与腐殖类杂质,得率与纯度同时受益

04 磁珠法四步,20 分钟级跑完

① 裂解

缓冲体系释放病毒核酸

② 结合

DNA/RNA 同步吸附磁珠

③ 洗涤

磁分离去蛋白、盐与抑制物

④ 洗脱

即用型产物,免二次纯化

全流程不依赖酚氯仿等有机试剂,也不需要离心柱:裂解—结合—洗涤—洗脱四步走完,最快 20 分钟拿到产物。洗脱下来的病毒核酸已去除蛋白、盐类与 PCR 抑制物,可直接进入下游。

05 参数速查(YG28002 系列)

项目 参数
产品名称 YALEPIC® 磁珠法病毒 DNA/RNA 提取试剂盒
货号 / 规格 YG28002(96T);YG28002-A(预装A型 32T);YG28002-B(预装B型 48T);YG28002-C(预装C型 96T 孔板)
方法学 磁珠法(自研优化缓冲裂解体系)
目标产物 病毒 DNA 与病毒 RNA 共提取,单份样本同步获得
上样体积 常规推荐 100–200 μL;全血建议先分离血浆
提取时长 最快 20 分钟完成单批次提取
杂质去除 蛋白、无机盐、PCR 抑制物(血红素、粘液等)
下游兼容 qPCR / RT-PCR / 全基因组 NGS / 病原筛查研究,无需二次纯化
自动化 YALEPIC Pure 32 及主流国产/进口磁珠法核酸提取仪
保存运输 常温运输;10~30℃ 避光保存;开封后 1 个月内用完

06 四款规格怎么选:按通量与上机方式定

系列共四个货号,选型不需要看别的,只看两件事——一天做多少份,以及手工还是上机。

货号 规格 适配场景
YG28002 96T,试剂自行分装 手工单管提取、方法学摸索、预算敏感的常规检测
YG28002-A 预装A型 32T 小通量,零星拭子样本,小型实验室
YG28002-B 预装B型 48T 中小型常规检测,日常批次稳定输出
YG28002-C 预装C型 96T 孔板 整板预装,适配全自动核酸提取仪高通量上机

三款预装型号出厂前已把磁珠、裂解液、洗涤液、洗脱液分装到位,上机前放样本即可开跑——省掉自分装的移液误差与工时。对日均几十到几百份的第三方检验与批量筛查,预装款真正移除的是人的变量:同一批结果不会因为谁值班而不同。

07 常温储运:让试剂跟着样本走

试剂盒常温运输,10~30℃ 避光保存,配方经高温稳定性验证,夏季室温无需冷藏;开封后原包装避光存放、1 个月内用完。磁珠溶液分装后注意密封,避免环境 RNase 污染——这一条在南方潮湿季节尤其值得写在墙上。

免冷链的实际意义不在实验室里,而在实验室外:试剂能铺到养殖场、基层采样点、多中心现场,不必等冷链车。传统流程是”样本等试剂到”,常温方案把它翻过来——试剂跟着样本走。

08 下游与延伸阅读

qPCR / RT-PCR 产物已去抑制剂,可直接配体系,Ct 值与复孔离散度更稳
全基因组 NGS 无需二次纯化即可建库,适用于病毒基因组测序与变异监测研究
病原筛查研究 呼吸道混合感染、疫病鉴别、环境与动物样本监测等场景

延伸阅读:病毒 DNA 与 RNA 共提取:磁珠法流程与场景——共提取在什么条件下成立、磁珠与缓冲各自承担什么,那一篇讲得更细;产品完整规格见 YALEPIC® MagEVO 磁珠法病毒 DNA/RNA 提取试剂盒产品页。

常见问题

Q1:真的能一次同时提取病毒 DNA 和 RNA 吗?

可以。共提缓冲配方让单份样本一次提取同步获得两类核酸,不需要分两次裂解,呼吸道混合病原样本尤其合适。

Q2:提取到底要多久?

最快 20 分钟完成单批次提取。实际耗时与样本类型、上机方式、批次大小相关,以随货说明书操作为准。

Q3:A/B/C 三款预装型号怎么选?

A 型 32T 适合小通量零星样本;B 型 48T 适配中小型常规检测;C 型 96T 整板预装,配全自动提取仪做高通量。三款均已预分装,免手动分装。

Q4:痰液、粪便这类杂质多的样本能提吗?

可以。优化裂解体系可破除粘液与粪便杂质干扰;建议浓痰先用生理盐水稀释、粪便取上清提取,得率与纯度会更稳。

Q5:常温保存,夏天会不会失效?

配方经高温稳定性验证,10~30℃ 常温避光存放即可,夏季室温不超过 30℃ 无需冷藏;避免阳光直晒。

Q6:提完的核酸能直接上 qPCR 和 NGS 吗?

能。产物已去除蛋白、盐类与 PCR 抑制物,可直接用于 qPCR、RT-PCR 与全基因组测序建库,无需二次纯化。

本文用于产品与技术信息说明,不构成诊断或临床性能声明。具体规格与货期请以官方渠道实时信息为准。产品性能以说明书与随附 COA 为准。更多产品信息见 www.yalibiotech.com。

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