血液游离DNA保存管能常温保存多久？ctDNA稀释与降解控制方案
YALEPIC® 样本采集与稳定化系列 · 血液游离 DNA 篇
血液cfDNA保存管：别让ctDNA被稀释掉
液体活检最隐蔽的失败不是”没测到”，而是分母变大了：血液离体后，白细胞会持续凋亡裂解，把大量野生型基因组 DNA 释放进血浆，把本来可检出的突变频率稀释到阈值以下。YALEPIC® 血液 cfDNA 保存管由 EDTA 抗凝剂与专用核酸保护剂复配，采血即刻抑制核酸酶活性、阻断有核血细胞 gDNA 释放，4~37℃ 稳定保存血浆 cfDNA 长达 14 天，溶血率与基因组 DNA 污染率均低于 3%。
⏱ 60 秒速览：它解决的是什么问题
✅ 超长窗口期：4~37℃ 条件下可稳定保存血浆 cfDNA 7~ 14 天，分析前处理窗口从数小时延长到两周；
✅ 专用核酸保护剂复配，采血后即刻抑制血浆核酸酶活性、阻断有核血细胞基因组 DNA 释放；
✅ 溶血率与基因组 DNA 污染率均低于 3%，真空度稳定性超过 99.9%，降低样本不合格率与重复采血成本；
✅ 宽温域稳定：4℃（冷藏）、25℃（常温）、37℃（夏季高温）三种运输条件下均可保持稳定；
✅ 材质可选：硼硅玻璃（气密性、生物惰性，适合长期储存）与 PET 塑料（轻、抗摔，适合运输与航空快递）；
✅ 双规格：YS21001-B（10 ml/支）、YS20501-B（5 ml/支），均 50 支/盒；
✅ 分离后的血浆可适配市面上大多数商业化游离 DNA 提取试剂盒，无需额外步骤；
✅ 适用 NIPT 无创产前筛查、肿瘤液体活检、器官移植排斥监测、感染性疾病病原 cfDNA 检测等方向。
🧮 一个隐蔽的失败：不是没测到，是分母变大了
液体活检看的是突变频率（VAF），它的定义很简单，却常被忽略：
VAF ＝ 突变分子数 ÷ 总游离 DNA 分子数
分子来自肿瘤，分母则包含了全部背景 cfDNA。只要分母变大，VAF 就会被拉低——哪怕肿瘤释放的分子数一点没变。
而分母恰恰是最容易”失控”的那一半。血液离体后，白细胞会随时间逐渐凋亡、裂解，把大量野生型基因组 DNA倾泻进血浆。这个过程的量化结果相当惊人：
📈
24 小时：约 3 倍
研究显示，EDTA 管全血放置 24 小时后，检出的 cfDNA 总量即出现近 3 倍增长——新增部分主要是细胞裂解产物，而非肿瘤来源。
🚨
96 小时：超 60 倍
放置至 96 小时，cfDNA 总量可增加超过 60 倍。文献明确指出，这会”降低临床样本中 ctDNA 比例的检出能力”。
🛡
专用保存管：基本不涨
同一研究对比显示，使用含细胞保护剂的保存管，96 小时与 4 小时的 cfDNA 得量无显著差异，等于把分母锁在了采血那一刻。
* 上述倍数为文献报道的实验结果，随样本与检测方式而异，用于说明趋势与量级。
🔗 这直接决定了”能不能检出”
假设某患者真实的肿瘤分数是 0.5%，检测下限是 0.1%。若血浆背景因白细胞裂解膨胀了 5 倍，同样的突变分子数对应的 VAF 会被稀释到 0.1% 附近——结果可能是”定量偏低”，也可能直接掉到阈值以下变成阴性。这正是为什么采血管不是普通耗材，而是液体活检里最关键的分析前变量之一。
血浆中的游离 DNA（cfDNA）来自凋亡、坏死细胞释放到血浆的高度片段化 DNA，长度多在 166 bp 左右（对应核小体单位）；而在液体活检中真正有诊断价值的循环肿瘤 DNA（ctDNA）占比往往不足 0.1%——分母本就庞大、目标极为稀少，这正是背景每升高一点都可能改变结论的原因。
⏳ EDTA 管的时间窗口有多窄
关于 EDTA 采血管的允许放置时间，不同指南与研究给出的数字略有差异，但方向高度一致——越短越好，通常以小时计：
| 维度 | 普通 EDTA 采血管 | 含细胞保护剂的 cfDNA 保存管 |
|---|---|---|
| 作用机制 | 仅抗凝（螯合钙离子），不阻止细胞裂解 | 稳定有核细胞 + 抑制核酸酶，阻断 gDNA 释放 |
| 室温允许放置 | 通常数小时（部分指南建议不超过 3 小时） | 可达 14 天（以说明书与实际验证为准） |
| 放置后背景变化 | 野生型 DNA 显著升高，稀释突变信号 | 背景基本稳定，维持 VAF 真实性 |
| 适用场景 | 院内即刻处理、短链路流程 | 跨地区转运、多中心试验、集中检测、样本库 |
传统流程往往要求采血后 2 小时内离心分离血浆并 -80℃ 冷冻，这对基层医疗机构、多中心临床试验与跨地域样本运输都是巨大负担。一项涉及多中心的肿瘤早筛研究指出：样本分析前处理窗口期的不一致，是导致不同中心数据无法合并分析的主要技术因素之一——把窗口延长到 14 天的意义不只是”来得及”，更是让不同中心的样本落在同一条分析前时间基线上。
🛡 保存管的三重作用
🩸
① 抗凝
EDTA 螯合钙离子，防止血液凝固，保证后续可分离出足量血浆；配方同时维持红细胞稳定，防止溶血造成的血红蛋白释放干扰下游提取与 PCR 扩增
🧊
② 稳定有核细胞
细胞保护剂稳定白细胞膜结构，抑制凋亡与裂解，从源头阻断野生型 gDNA 释放；该保护剂由雅礼生物自主配方，采用离体细胞保存与活性维持技术
✂️
③ 抑制核酸酶
抑制血浆核酸酶活性，保护 cfDNA 不被降解，维持片段分布与浓度稳定
🧪 材质怎么选
硼硅玻璃：气密性、化学惰性与生物相容性优异，适合长期储存与要求较高的场景；缺点是重量大、有破损风险。PET 塑料：轻、抗摔，适合冷链运输与航空快递，可降低破损率，并可满足自动化提取需求。PET 款对应货号 YS21002-P（10 ml/支）与 YS20502-P（5 ml/支），均为 50 支/盒；硼硅玻璃款未开封状态下保质期为 18 个月。
📦 规格与包装
YS21001-B：10 ml/支，50 支/盒；YS20501-B：5 ml/支，50 支/盒。采用高精度负压灌装，真空度稳定性超过 99.9%。
📋 产品规格与货号一览
| 货号 | 材质 | 规格 | 包装 |
|---|---|---|---|
| YS21001-B | 硼硅玻璃 | 10 ml/支 | 50 支/盒 |
| YS20501-B | 硼硅玻璃 | 5 ml/支 | 50 支/盒 |
| YS21002-P | PET | 10 ml/支 | 50 支/盒 |
| YS20502-P | PET | 5 ml/支 | 50 支/盒 |
产品页与说明书：YALEPIC® 血液 cfDNA 样本保存管（硼硅玻璃） · YALEPIC® 血液 cfDNA 样本保存管（PET）
经严格温度挑战测试验证：样本在 4℃（冷藏）、25℃（常温）、37℃（夏季高温） 三种典型运输条件下存放 7~14 天，cfDNA 浓度均未发生显著变化。在常温稳定性能方面，与 S 公司 Cell-Free DNA BCT CE（14 天常温保存）等国际主流品牌相当。
| 存放条件 | 可保存时长 | 说明 |
|---|---|---|
| 4~37℃（冷藏 / 常温 / 夏季高温） | cfDNA 稳定 14 天 | 采血后即刻起算，无需冷链 |
| 长期留存 | 按实验室既定流程冻存 | 已采血的保存管不可冷冻；需先分离血浆再按其存档流程冻存 |
| 未开封保存管 | 保质期 18 个月 | 4~30℃ 干燥避光，避免冷冻与过热 |
YALEPIC® 血液 cfDNA 保存管已取得 CE-IVD 认证，并具备国内 NMPA 注册证；用于临床检测须遵守所在国家与地区关于体外诊断产品的法规要求。
🖐 采血规范：六步决定样本成败
再好的保存管，也扛不住错误的采血动作。以下六步是官方说明中反复强调、也最常出错的环节：
1️⃣
检查真空
取出后确认真空存在、在有效期内
2️⃣
抽至刻度线
5 ml 规格取 5 ml、10 ml 规格取 10 ml，不可多不可少
3️⃣
颠倒 8~10 次
手腕 180 度旋转，手心向内转为手背向内
4️⃣
动作平稳
避免剧烈摇晃，防止溶血与血细胞损伤
5️⃣
规范标记
标注采血日期、样本编号等必要信息
6️⃣
常温运输
4~37℃ 环境运输或保存，切勿冷冻
🌀 从全血到血浆：两步离心不可省
保存管解决的是”运输途中别变质”，而进实验室后的第一步同样有讲究。行业通用的做法是两步离心：先低速去除血细胞，再高速清除残余细胞与碎片。
① 低速离心
约 1,200~2,000 × g、10 分钟，建议室温或 4℃、平稳刹车或不刹车，避免扰动白膜层；转移上清时保留少量血浆，不要触到细胞层。
② 高速离心
上清再以 ≥3,000 × g（常用 14,000~16,000 × g）离心约 10 分钟，彻底清除残余细胞碎片，所得血浆方可进入提取或冻存。
分离后的血浆可直接用于 Q 公司 QIAamp、T 公司 MagMAX、YALEPIC 等主流商品化 cfDNA 提取试剂盒与自动化平台，无需额外步骤。完成采血与混匀后无需立即离心，样本可在常温下等待集中运输、批量检测；到达实验室后按常规流程离心分离血浆即可，整个过程省去了现场冷冻与冷链转运，也保证了多中心样本处理标准的一致性。
🎯 适用场景
🤰
NIPT 无创产前
胎儿游离 DNA 筛查
🎗
肿瘤液体活检
早筛、用药指导、复发监测
🫀
器官移植监测
供体来源 cfDNA 评估排斥
🦠
感染性疾病
病原 cfDNA 检测
💊
药物基因组学
代谢相关基因多态性
🏥
多中心临床
跨地区入组与集中检测
🚚
偏远地区采血
无需冷链的长距离转运
🗄
生物样本库
标准化留样与回溯研究
该产品广泛应用于第三方医学检验所、医院检验科、生物样本库及药物临床试验机构，是液体活检产业「样本入口」环节的关键耗材。
❓ 关于血液 cfDNA 保存管的高频问题（FAQ）
Q1：cfDNA 保存管与普通 EDTA 采血管有何区别？
普通 EDTA 采血管仅能短期保存血液样本（通常为数小时），且无法有效抑制有核细胞凋亡。随时间推移，凋亡细胞会释放大量基因组 DNA 到血浆中，稀释真实的 cfDNA 信号并影响下游检测灵敏度。cfDNA 保存管特别添加了细胞保护剂，能够稳定有核细胞、防止凋亡和基因组 DNA 释放，从而确保 cfDNA 浓度在保存期内保持稳定。
Q2：采血后是否需要立即处理？最长可以存放多久？
cfDNA 保存管专为延长样本分析前处理窗口期而设计。采血后在 4℃ 至 37℃ 温度范围内，cfDNA 可稳定保存长达 14 天，无需采血后立即处理样本，为跨地区样本运输、多中心临床试验和样本集中处理提供了便利。具体以产品说明书与实际验证为准。
Q3：采血管中应采集多少血量？采血量不准会有什么影响？
请严格按管体标注刻度线采集准确血量——5 ml 规格采集 5 ml，10 ml 规格采集 10 ml。采血量过多或过少会导致血液与管内保护剂比例失衡：血量不足时保护剂浓度过高可能产生过度渗透压影响；血量过多时保护剂相对不足，可能无法完全抑制核酸酶活性与细胞凋亡。
Q4：采血后需要混匀吗？如何正确混匀？
需要。采血完成后应立即轻轻颠倒混匀 8~10 次，确保血液与保护剂充分接触。正确方式：手腕完全 180 度旋转，手心向内转为手背向内，动作连贯平稳，避免剧烈摇晃以防溶血和血细胞损伤。混匀不及时或不充分会导致局部保护剂浓度不均，影响保存效果。
Q5：这款保存管可以用于 cfRNA 保存吗？
该产品主要针对 cfDNA 的稳定保存而设计。若项目以 cfRNA 或胞外 RNA 为主要目标，建议选用 YALEPIC® 血液 DNA/RNA 保存管（PQ），并参见血液 RNA 保存管选购与应用全指南。
Q6：保存管中的血液样本可以使用哪些提取试剂盒？
保存管中的全血样本按常规流程分离血浆后，分离出的血浆可适用于市面上大多数商业化游离 DNA 提取试剂盒，无需额外步骤，便于整合进现有实验流程。提取所得 cfDNA 可直接用于 PCR、qPCR、数字 PCR 与 NGS 等高灵敏度检测。
Q7：玻璃材质和 PET 材质如何选择？
玻璃材质气密性、化学惰性与生物相容性优异，适合长期储存及对保存条件要求较高的场景，但重量较大、存在破损风险。PET 塑料材质质量轻、抗摔性能优异，特别适合冷链运输与航空快递，可有效降低运输破损率。可按样本运输距离、储存期限与物流方式灵活选择。
Q8：未使用的保存管应如何保存？
未使用的保存管应在 4℃~30℃ 干燥避光环境下存放，避免冷冻和过热。请在包装标注的有效期内使用，过期后真空度与添加剂活性可能下降。极端温度条件下运输未使用的保存管时，应采取适当的保温或防护措施。
Q9：产品是否具有医疗器械注册证或 CE 认证？
YALEPIC® 血液 cfDNA 保存管已取得 CE-IVD 认证，并具备国内 NMPA 注册证；用于临床检测须遵守所在国家与地区关于体外诊断产品的法规要求。
Q10：为什么血液放置久了，突变频率反而会变低？
突变频率（VAF）等于突变分子数除以总游离 DNA 分子数。EDTA 管中的血液放置时间延长后，白细胞会逐渐凋亡裂解并向血浆释放大量野生型基因组 DNA，使分母显著增大，从而把原本可检出的突变频率稀释到检测阈值以下——表现为定量偏低甚至假阴性。使用含细胞保护剂的专用保存管抑制这一过程，是维持 VAF 真实性的关键。
Q11：产品未使用时的保质期是多久？
硼硅玻璃款在未开封状态下保质期为 18 个月。未使用的保存管应于 4~30℃ 干燥避光存放，避免冷冻与过热；超过保质期后真空度与添加剂活性可能下降，请勿继续使用。
🧾 数据声明
文中保存期、溶血率与污染率、规格与保存条件引自官网产品说明与官方 FAQ；EDTA 管放置后的 cfDNA 增幅为文献报道结果，随样本与检测方式而异，用于说明趋势。实际性能请以产品随附 COA、说明书及第三方检测报告为准。
⚠ 使用边界
本产品为样本采集与保存耗材，不用于疾病的诊断或治疗；用于临床检测须遵守所在国家与地区关于体外诊断产品的法规要求。静脉采血须由具备资质的医护人员按规范操作，医疗废物按相关规定处置。
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