YALEPIC^® 血液基因组DNA小量提取试剂盒（不含RNase A）

YALEPIC^® 血液基因组 DNA 小量提取试剂盒（不含 RNase A）基于硅胶膜纯化技术研发，专为 0.1~1ml 新鲜或冷冻抗凝全血、血浆、血清、无细胞体液、淋巴细胞等样本设计，同时兼容禽类、鸟类、两栖类有核红细胞DNA 提取。

• 样本适配范围广：兼容 EDTA、肝素抗凝全血、白膜层、血凝块，同时支持禽类、两栖类有核红细胞特殊样本提取。
• 提取品质优异：DNA 产量高、纯度佳、片段完整性好，无蛋白及脂类杂质污染，满足高精度分子实验需求。
• 安全省时高效：摒弃苯酚 / 氯仿有机抽提，无毒无害；实验全程 1h 内完成，手动操作＜20 分钟，新手易上手。
• 纯化技术成熟：专用硅胶膜吸附技术，核酸吸附力强、洗脱回收率高，批次稳定性强。
• 储存运输便捷：支持常温运输，10~30℃室温即可保存，无需低温冷链，实验室备货方便。

• 常规样本：0.1 ~ 1 ml 新鲜 / 冻存无核抗凝全血、1×10⁷个白细胞、血浆、血清、血沉棕黄层、无细胞体液。
• 特殊样本：5 ~ 20 μl 禽类、鸟类、两栖类等有核新鲜 / 冻存抗凝全血。
• 下游实验适配：PCR、荧光定量 PCR、限制性酶切、Southern 杂交、基因文库构建、病毒核酸检测等。

常温运输；10 ~ 30℃ 室温保存。

Q1：全血DNA提取试剂盒一次可以处理多少血液样本？
A：本试剂盒推荐每离心柱处理200 µL抗凝全血（EDTA、枸橼酸钠等），亦可用于血沉棕黄层或骨髓样本。若血液白细胞计数极低（如严重白细胞减少症患者），可适当增加上样量至300 µL，并通过重复结合步骤保证回收率。

Q2：血液基因组DNA提取步骤需要多长时间？
A：整个血液基因组DNA提取流程通常在30-40分钟内完成。具体步骤包括：样本裂解（10分钟）、结合（2分钟）、洗涤两次（各1分钟离心）、干燥膜（1分钟）和洗脱（1分钟）。若需最大化产率，可将洗脱液在60℃预温并孵育5分钟后再离心收集，这样整个流程约延长至45分钟，但得率可提升10%-15%。

Q3：使用血液DNA提取试剂盒提纯的DNA能直接用于qPCR或测序吗？
A：完全可以。提取的基因组DNA纯度OD260/280通常在1.7-1.9之间，无血红素和蛋白残留，且不含有机溶剂，可直接作为模板用于常规PCR、qPCR、多重PCR、二代测序文库构建、甲基化分析等下游应用。对于要求极高的数字PCR，建议洗脱后用适量TE缓冲液稀释后再行加样，以避免洗脱液中微量盐离子对微滴生成的影响。

Q4：全血基因组DNA小提试剂盒提取的DNA浓度低怎么办？
A：DNA得率低常见原因及对策：①血液白细胞数量少（如免疫缺陷患者样本），可增加采血量或在裂解前离心富集白细胞层；②冻存血未充分混匀，取出后应置冰上缓慢解冻并颠倒混匀；③蛋白酶K裂解不充分，确认裂解液未过期，裂解温度保持56℃并适当延长至20分钟；④洗脱液未击中膜中心，洗脱时需将缓冲液垂直滴于膜中央，并室温孵育2-5分钟后离心。若仍无改善，建议用荧光定量法检测微量DNA，排除单链DNA降解问题。

Q5：该试剂盒能提取肝素抗凝血的基因组DNA吗？
A：可以使用肝素抗凝全血，但肝素对PCR有潜在抑制作用。我们建议在裂解步骤将肝素血用PBS洗涤细胞1-2次，或适当增加洗涤步骤（加一次Buffer AW2洗涤）以去除残余肝素。提取后的DNA应进行OD260/230比值检测，确保比值>1.8。对于后续直接进行PCR扩增的实验，若仍出现扩增抑制，可将DNA用3M醋酸钠/乙醇沉淀重溶，或选用对肝素耐受性更好的聚合酶。

Q6：血液DNA提取试剂盒与磁珠法试剂盒相比有什么优势？
A：柱式法血液DNA提取试剂盒在成本、操作简便性和DNA纯度稳定性方面优势明显。与磁珠法相比，柱式法无需磁力架，只需普通台式离心机，单次处理样本量灵活，且洗脱体积小（可低至50 µL），获得的DNA浓度更高，更适用于样本量有限的实验。对于大部分科研和临床常规检测，柱式法已完全满足需求，只有全自动大批量提取时磁珠法才更有通量优势。

Q7：提取的基因组DNA如何保存？反复冻融会影响质量吗？
A：纯化后的基因组DNA建议分装后保存在-20℃，可稳定保存2年以上。如需长期保存，可置于-80℃。避免反复冻融，因多次冻融会造成大片段DNA机械剪切断裂，导致平均长度降低。每管DNA溶液冻融次数应控制在3次以内。