YALEPIC^® dsDNA高灵敏检测试剂盒

• YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit是雅礼生物推出的一款高灵敏度双链DNA（dsDNA）荧光定量检测试剂盒，专为基因组DNA定量、NGS文库定量、基因文库构建等分子生物学实验场景设计。
• 本试剂盒包含荧光检测试剂、dsDNA标准品及专用缓冲液三大核心组分，对双链DNA具有高度选择性，RNA干扰极小，可在 0.1 ~ 100 ng 区间保持优异线性关系，实现对浓度为 100 pg/µl ~ 100 ng/µl 的dsDNA样品的精确荧光定量。
• 产品具备出色的抗干扰能力，可有效耐受盐离子、游离核苷酸、蛋白质、有机溶剂、去污剂等常见实验杂质的干扰，确保检测结果准确可靠。
• 操作流程简便：使用前将荧光检测试剂用缓冲液稀释为工作液，加入待测dsDNA样品后，即可通过 Qubit荧光仪或酶标仪 快速完成检测，全程可在室温下操作，无需特殊设备。

• 超高灵敏度、dsDNA 特异性强：最低检出限 100pg/μL 微量双链 DNA，仅靶向结合双链 DNA，RNA、ssDNA 几乎无荧光干扰，适配 cfDNA、低拷贝珍贵样本定量；
• 杂质耐受性优异，线性范围宽泛：耐受高浓度盐、蛋白、去垢剂、萃取溶剂，0.1~100ng 全区间稳定线性，兼顾微量与中高浓度 dsDNA 样品检测；
• 实验操作简便，室温免孵育优化：无需加热变性，试剂稀释即配即用，10 分钟完成全流程加样，新手也可快速上手高通量批量检测；
• 仪器兼容性拉满，一机两用：全兼容 Qubit1/2/3/4 全系荧光仪、各类荧光酶标仪，单试剂盒满足单样本检测、96 孔高通量筛查两种实验需求。

• 浓度适用：仅限100 pg/µl ~ 100 ng/µl 双链 DNA（dsDNA）样本定量，超出区间建议选用雅礼宽量程 dsDNA BR 试剂盒；
• 科研场景：NGS 二代测序文库 DNA 质控、PCR 扩增产物浓度标定、质粒 / 基因组 DNA 提取后定量、单细胞微量 DNA 检测；
• 工业质检：生物疫苗、重组蛋白药物中宿主细胞残留双链 DNA 检测、原料核酸纯度质控，替代进口 PicoGreen 检测试剂。

2 ~ 8℃ 运输保存，其中组分YALEPIC^® dsDNA HS Reagent & Buffer需 2 ~ 8℃ 避光运输保存。

Q1：YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit与传统的紫外分光光度法（A260）相比有什么优势？

A：YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit采用荧光染料结合法，具有以下核心优势：①高灵敏度——检测下限可达100 pg/µl，远低于紫外法的检测限（约2-5 ng/µl）；②高特异性——只结合双链DNA，不受RNA、游离核苷酸、蛋白质等的干扰，在RNA污染严重或DNA降解严重的样本中定量更准确；③耐受污染物——可耐受盐类、去污剂、蛋白质等多种常规污染物，适用于复杂样本的直接定量。

Q2：该试剂盒可以用于NGS文库的定量吗？是否可以替代Qubit？

A：是的。YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit专为高灵敏度dsDNA定量设计，与Qubit dsDNA HS Assay Kit原理相同、性能相当，完全兼容Qubit荧光仪（包括Qubit 3.0、Qubit 4.0、Qubit Flex），可有效替代进口品牌用于NGS文库构建过程中的文库定量。同时兼容荧光酶标仪，适用于高通量样品检测场景。本产品已应用于国内多家NGS检测机构的日常生产中。

Q3：试剂盒能检测的最低DNA浓度是多少？可以检测多少体积的样品？

A：该试剂盒对dsDNA样品的最低检测浓度为100 pg/µl。实际可检测的最低DNA总量取决于加入样品的体积：标准操作中推荐加入1-20 µl样品至200 µl检测体系中，因此理论上最低可检测约0.1 ng的dsDNA总量。如果样品浓度低于检测下限，建议通过真空浓缩或乙醇沉淀等方法对样品进行浓缩后再行检测。

Q4：试剂盒能否耐受去污剂、盐类等污染物？哪些污染物可能对检测产生干扰？

A：YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit具有良好的污染物耐受性：可耐受高达100 mM NaCl、100 µg/ml BSA、0.1% Triton X-100、5% DMSO及10 µM游离核苷酸。然而，高浓度的去污剂（如超过0.5%的SDS）或有机溶剂可能轻微抑制荧光信号。如需处理高污染物样本，建议将样品稀释至污染物耐受浓度以内再进行定量，或先使用DNA纯化柱进行纯化。

Q5：该试剂盒的标准曲线如何建立？是否必须每次实验都做标准曲线？

A：试剂盒提供两个预稀释的dsDNA标准品（Standard #1和Standard #2），在Qubit荧光仪上可通过内置程序自动建立两点标准曲线。建议每次实验都重新建立标准曲线，因为荧光信号可能因工作液的配制精度、环境温度等因素产生波动。使用酶标仪时，需自行配制梯度稀释的标准品并拟合标准曲线（四参数或线性回归方程）。

Q6：出现“标准品错误”或荧光值异常偏低该如何排查？

A：建议按以下步骤排查：①确认工作液是否正确配制，荧光检测试剂用量是否准确；②检查标准品的原始荧光值（RFU），确认样品荧光值是否落在标准品的荧光值区间内；③该检测对温度敏感，高温环境下荧光信号可能下降，确保样品和标准品在室温平衡后再检测；④避免使用已多次反复冻融的工作液；⑤确认所用仪器型号的检测参数设置无误。

Q7：该试剂盒能否用于ssDNA或RNA的定量？对其他核酸的特异性如何？

A：该试剂盒对双链DNA具有高度选择性，荧光染料特异性结合dsDNA。在RNA存在条件下的交叉反应信号小于1%，在ssDNA存在条件下的交叉反应信号小于2%。因此，本产品专用于dsDNA的精确定量，不适用于ssDNA或RNA的定量。如需进行总核酸定量或RNA定量，建议选用雅礼生物其他对应品类的检测试剂盒。

Q8：试剂盒的有效期是多久？如何正确储存？

A：试剂盒在2-8℃避光保存条件下有效期为12个月（自生产日期起算）。其中YALEPIC^® dsDNA HS Reagent组分对光照敏感，务必避光保存。严禁将试剂盒或任何组分冷冻保存。工作液在稀释后建议在4小时内使用完毕，如需短期储存（不超过1周），可2-8℃避光保存，但荧光信号可能存在衰减。

Q9：该试剂盒可以用于FFPE样本提取的DNA定量吗？

A：可以。FFPE样本提取的DNA通常存在不同程度的降解，且常含有PCR抑制剂残留。YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit对降解DNA片段仍具有良好的荧光响应，并能耐受FFPE样本中可能残留的抑制剂（如二甲苯、乙醇等）。对于高度降解的FFPE-DNA，建议将标准品稀释至与样品相近的片段大小范围，以获得更准确的定量结果。

Q10：该试剂盒适用于哪些荧光检测仪器？请列出具体型号。

A：YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit兼容以下荧光检测仪器：①Qubit系列荧光仪：Qubit 3.0、Qubit 4.0、Qubit Flex、Qubit 2.0；②荧光酶标仪：BioTek Synergy系列、Molecular Devices SpectraMax系列、Tecan Infinite系列、BMG CLARIOstar系列及其他配备荧光检测模块（激发波长约480-500 nm，发射波长约520-540 nm）的酶标仪。使用前请确认仪器荧光通道设置是否匹配。