YALEPIC^® 磁珠法尿液游离DNA大量提取试剂盒

YALEPIC^® MagEVO Urine cfDNA Maxi Extraction Kit采用具有独特分离作用的纳米磁珠和特制的缓冲液系统，从 1 ~ 20 ml 尿液中纯化回收高质量的游离DNA。本试剂盒操作简化便捷，对低分子量核酸定向优化，具有提取效率高、核酸纯度高、重复性强等优点。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，下游应用范围广泛，可进行定量PCR、NGS、文库构建等实验，适用于大体积高通量工作站的自动化提取。（可提供医疗器械备案版）

• 样本类型：人体及模式生物尿液样本游离 DNA 提取纯化
• 实验应用：荧光定量 PCR、普通 PCR、二代测序 NGS、文库构建、DNA 甲基化分析
• 应用场景：科研基础研究、液体活检、肿瘤标志物筛查、无创检测、高通量自动化样本处理
• 适配设备：各类磁珠法核酸提取自动化工作站、手动常规实验室操作

• 运输条件：全程常温运输，无需冷链冷藏
• 保存条件：10℃~30℃阴凉室温保存，避光防潮
• 有效期：常规密封保存有效期稳定，详见试剂盒外包装及说明书标注

Q1：尿液样本应该如何采集和保存以保证cfDNA质量？

A： 尿液中的游离DNA（cfDNA）在采集后容易降解，因此建议：

1. 立即处理：采集后应尽快进行核酸提取，最好在4小时内完成。
2. 使用稳定剂：若无法及时处理，建议使用商业化的尿液稳定剂（如YALEPIC 尿液cfDNA保存等），可在常温下稳定cfDNA长达7-14天，有效防止DNase降解和细胞基因组DNA污染。
3. 离心去细胞：提取前建议以1,600 × g离心10分钟去除细胞和碎片。
4. 避免反复冻融：样本应避免反复冻融，以免导致DNA降解。

Q2：本试剂盒最低可以检测到多少cfDNA？回收率如何？

A： 本试剂盒采用高效的纳米磁珠富集技术，针对低丰度cfDNA进行了深度优化，模拟样本回收率可达≥80%，纯化产物无PCR抑制剂残留。健康人尿液cfDNA产量因个体差异较大，本试剂盒的磁珠富集技术可有效回收这些低丰度核酸片段。

Q3：提取的cfDNA纯度和片段大小是多少？

A： 本试剂盒提取的cfDNA产物A260/A280比值在1.7-2.0之间，纯度较高。尿液cfDNA通常以短片段形式存在，主要分布在50-300 bp之间（核心片段约150-200 bp），本试剂盒对低分子量核酸进行了定向优化，可高效回收这些短片段cfDNA。

Q4：该试剂盒是否适配自动化核酸提取仪？

A： 可以。本试剂盒专为自动化提取场景优化，可适配市面主流的磁棒式自动化核酸提取仪，支持1-20ml大体积尿液样本的高通量自动化处理，尤其适合需要同时处理多个样本的实验室场景。

Q5：该试剂盒与同类产品（如QIAGEN、Zymo等）相比有何优势？

A： 本试剂盒具有以下突出优势：

• 大体积投入：最大支持20ml尿液样本，而许多竞品仅支持0.5-10ml；
• 自动化兼容：优化的磁珠法流程完美适配自动化工作站，节省人工操作时间；
• 高纯度：纳米磁珠+特制缓冲液系统有效去除尿液中的尿素、结晶体等抑制剂；
• 成本效益：在保证高质量提取效果的同时，提供更具竞争力的价格；
• 可提供备案版：支持医疗器械备案版本，满足临床转化需求。

Q6：试剂盒可以同时提取基因组DNA（gDNA）和游离DNA（cfDNA）吗？

A： 本试剂盒专为游离DNA（cfDNA）提取设计，直接从尿液上清中纯化cfDNA。如需从同一尿液样本中同时提取gDNA和cfDNA，建议将样本离心分离后分别处理：细胞沉淀用于gDNA提取，上清用于cfDNA提取，可选择搭配专门的尿液基因组DNA提取试剂盒使用。

Q7：试剂盒应该如何储存？有效期多长？

A： 本试剂盒在10-30℃室温条件下保存即可，有效期12个月。蛋白酶K组分建议在-20℃长期保存，溶解后可短期室温储存。所有组分避免阳光直射和潮湿环境。常温储存和运输的设计大幅降低了冷链成本，方便实验室日常使用。

Q8：试剂盒可以分多次使用吗？

A： 可以。试剂盒按48次规格提供，组分可多次取用。使用时请保持操作环境的洁净，避免交叉污染。开启后的试剂瓶应及时盖紧，按照说明书推荐的储存条件存放。磁珠悬浮液在每次取用前需充分混匀以确保磁珠分布均匀。

Q9：提取的cfDNA可以用于哪些下游实验？

A： 本试剂盒提取的cfDNA产物纯度高、无抑制剂残留，可直接用于多种下游分子生物学实验，包括但不限于：qPCR、dPCR（数字PCR）、NGS文库构建、全基因组测序、靶向测序、甲基化检测、基因芯片分析等。

Q10：cfDNA提取产物中会有基因组DNA（gDNA）污染吗？

A： 本试剂盒针对cfDNA进行了定向富集设计，有效减少基因组DNA的共纯化。但为了最大程度避免gDNA污染，建议在cfDNA提取前对尿液样本进行充分离心（1,600 × g离心10分钟），以去除细胞和细胞碎片。

Q11：提取的cfDNA产量很低，可能是什么原因？应如何解决？

A： 产量偏低可能由以下原因引起：

Q12：如何评估提取的cfDNA质量？

A： 建议通过以下方法评估提取的cfDNA质量：

1. 紫外分光光度法：检测A260/A280比值，应在1.7-2.0之间；
2. 琼脂糖凝胶电泳：尿液cfDNA通常以弥散条带形式出现在50-300 bp区域；
3. qPCR检测：使用内参基因（如GAPDH、RNase P）进行扩增，通过Ct值评估产量和纯度；
4. 片段分析仪：使用Agilent Bioanalyzer或类似设备精确分析cfDNA的片段大小分布。
5. 对于极低丰度的cfDNA样本，传统的紫外分光光度法可能因灵敏度不足而无法准确检测，建议优先使用荧光定量法（如Qubit）或qPCR法进行定量评估。

Q13：该试剂盒是否有医疗器械备案？

A： 是的，本产品可提供医疗器械备案版本。备案版试剂盒在组分和生产工艺上与科研版保持一致，但额外满足医疗器械相关的质量体系要求，适用于IVD试剂盒研发、临床检测方法开发等需要合规资质的应用场景。如有医疗器械备案版需求，请联系雅礼生物销售团队。

Q14：尿液作为液体活检样本相比血液有哪些优势？

A： 尿液作为cfDNA来源具有以下显著优势：

• 完全无创：样本采集无痛、无风险，患者接受度高；
• 可重复采样：方便进行纵向研究和疾病动态监测；
• 样本量大：尿液可获取大体积样本，弥补cfDNA丰度低的不足；
• 背景干净：尿液蛋白浓度仅为血液的约1/1000，提取更容易，PCR抑制剂干扰较少；
• 感染风险低：尿液对HIV等病原体的传染性远低于血液。

Q16：该试剂盒可以提取尿液中的病毒DNA吗？

A： 可以。本试剂盒的磁珠富集技术对多种来源的游离DNA具有广泛的捕获能力，包括尿液中的病毒DNA（如HPV、EBV、巨细胞病毒等），适用于尿液病原体核酸检测等应用。