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 本试剂盒每管反应体系的终体积为200 µL，其中工作液体积为180~199 µL，待测样本体积为1~20 µL。建议样本用量为1~10 µL，可根据样本预估浓度灵活调整。使用前请校准移液器，确保取样准确。检测完成后，请根据以下公式计算样本原始浓度：（仪器读数浓度）×（工作液体积+样本体积）/ 样本体积。

 YALEPIC^® 1×dsDNA HS Assay Kit在核心性能指标上与Thermo Fisher Qubit dsDNA HS Kit具有高度可比性：在0.1~100 ng dsDNA范围内均保持良好的线性关系（R² > 0.99）；对RNA的选择性高，RNA干扰极小；对盐、蛋白质、去污剂等常见污染物的耐受性相当。本试剂盒提供500次检测规格，单次检测成本更具优势，是Qubit dsDNA HS Kit的高性价比替代方案。

 荧光染料存在天然的淬灭现象，荧光强度会随孵育时间延长而缓慢衰减。为获得稳定可靠的结果，建议：（1）标准品与待测样品加入后统一避光孵育2分钟，然后在30分钟内完成所有检测；（2）尽量避免样品和标准品之间温度差异过大；（3）检测过程中不要长时间暴露在强光下。严格按照上述条件操作，批间和批内的检测结果具有良好的稳定性和可重复性。

 本试剂盒适用于各类来源的双链DNA样本的定量检测，包括但不限于：（1）NGS文库——高通量测序的input DNA文库定量；（2）PCR/qPCR产物——扩增产物的dsDNA定量；（3）基因组DNA——提取自细胞、组织、血液等样本的gDNA；（4）质粒DNA——质粒提取产物及酶切产物；（5）cDNA——反转录获得的cDNA产物；（6）DNA标准品——各类型dsDNA标准品。试剂盒对样本的来源物种（人、动物、植物、微生物、病毒等）无选择性，均可适用。

 出现标准品错误或负荧光值通常有以下原因及解决方法：（1）标准品准备不充分——使用前未充分混匀，请上下颠倒后瞬时离心；（2）温度影响——检测对温度敏感，请确保标准品和样品在室温下平衡后再进行检测；（3）移液误差——请使用已校准的移液器操作；（4）气泡干扰——混匀后请瞬时离心去除气泡；（5）标准品变质——检查标准品是否在有效期内，是否有反复冻融或污染。如果问题持续，请检查标准品的原始荧光值（RFU），确认待测样品的荧光值落在标准品的荧光值之间。

雅礼生物YALEPIC 100bp Plus DNA Marker的条带覆盖范围更广（100-2000bp共10条带），优于普通100bp Marker的100-1000bp覆盖范围。其中500bp条带设计为增强亮带（100ng/5μl），便于实验中的快速定位和半定量分析。此外，本产品已预混1×Loading Buffer，即开即用，操作更为便捷。

电泳条带出现拖尾或模糊，通常由以下原因引起，可按对应方案处理：

电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低、pH值上升，会导致缓冲能力下降，从而出现条带模糊或不规则迁移现象，建议每次实验都使用新鲜缓冲液–。

 正常。本产品特别设计了500bp增强亮带（100ng/5μl），该条带浓度是其他普通条带（约50-40ng/5μl）的2倍左右，因此电泳后500bp条带明显更亮。这一设计目的是为实验人员提供清晰的参考条带，便于快速定位和准确定量目的DNA片段。其余条带亮度略弱但清晰可辨，不影响使用。这是同类产品中广泛采用的设计方案。

 不建议。本产品专为琼脂糖凝胶电泳设计优化，不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。如需PAGE分析，建议选用适配的非变性PAGE专用DNA Marker。此外，本产品也不能用于变性胶中的RNA分析，因为双链DNA在变性条件下会解开为单链，无法准确指示RNA分子量。

雅礼生物YALEPIC 100bp Plus DNA Marker支持两种保存方式：2~8℃冷藏可保存2年，-20℃冷冻可保存3年。实际使用建议如下：

• 短期频繁使用（如每周使用）：置于2~8℃冷藏，取用方便，无需反复冻融
• 长期储备（如备用库存）：置于-20℃冷冻保存，可最大限度延长有效期
• 使用前务必充分溶解并混匀，避免浓度不均
• 避免反复冻融，分装保存可进一步保证稳定性

兼容。雅礼生物YALEPIC 100bp Plus DNA Marker适用于常用的核酸荧光染料，包括GelRed、SYBR Green、GoldView等。电泳完成后可在凝胶成像系统中使用对应的激发光源进行观察。建议在加样前将DNA Marker与染料混合，或电泳后对凝胶进行染色，两种方式均可获得清晰的条带图像。

 本产品为即用型，已预混1×Loading Buffer，用户无需额外添加。该Loading Buffer配方经过优化，在电泳过程中可保证DNA样品顺利沉入加样孔，同时在电泳过程中形成清晰的指示前沿，便于监控电泳进程。

 条带分离效果不理想，常见原因及解决方法：

1. 琼脂糖浓度不合适：100~2000bp片段建议使用1%~1.5%琼脂糖凝胶，浓度过低会导致小片段分辨率不足，浓度过高则会拖慢电泳速度
2. 凝胶制备不均匀：制胶时确保琼脂糖完全溶解并充分混匀后再倒胶
3. 电泳电压过高：过高电压会导致凝胶发热，影响条带分辨率，建议电压控制在5-8V/cm
4. 上样量不当：严格按照5μl上样量使用，过多会导致条带拖尾

建议使用新鲜制备的凝胶，并定期更换电泳缓冲液，以获得最佳的条带分离效果

不建议用于RNA电泳的分子量判断。DNA Marker中的双链DNA在普通琼脂糖凝胶电泳中保持双链结构，而RNA的迁移率与相同分子量的DNA不同，直接使用会导致分子量估算不准确。若仅需粗略观察RNA条带分布，可临时使用，但不推荐用于精确定量。对于变性胶电泳，DNA双链会解开，绝对不推荐使用DNA Marker指示RNA大小。

条带模糊通常由以下原因导致：①电泳缓冲液陈旧：多次使用后离子强度降低、pH上升，缓冲能力下降，建议每次更换新鲜缓冲液；②核酸酶污染：使用时请使用灭菌枪头，用后及时拧紧管盖；③凝胶质量问题：建议使用高质量琼脂糖并确保凝胶凝固均匀；④电压过高：建议电泳电压4-10V/cm，电压过高会产生过多热量导致条带扩散。

本产品为即用型产品，已含有1×Loading Buffer，无需额外添加或加热处理。常规电泳条件下：加样孔孔宽小于6mm时，每次取5µl直接上样即可；如加样孔较宽，可适当增加至8-10µl–。建议凝胶浓度为1%-2%琼脂糖凝胶，电压4-10V/cm，电泳时间25-60分钟–。

①条带数量更多：11条带覆盖100bp~15kb，优于多数竞品的7-8条带，分辨率更高；②双重指示带设计：500bp亮带+1500bp次亮带，便于快速定位和浓度估算；③预混即用型：无需自行配制Loading Buffer，开盖即用；④浓度梯度设计：不同位置条带浓度差异化设置，便于半定量分析。

2~8℃保存有效期为2年，-20℃保存有效期为3年。建议日常使用频率高时暂存于2~8℃，长期不用则-20℃保存。为避免反复冻融导致的条带降解，建议首次使用时分装成小规格单次使用量保存。

YALEPIC® 15K DNA Marker覆盖100bp~15kb，适合中大型DNA片段检测场景（如质粒酶切分析、大片段PCR产物鉴定）。如实验片段范围在100bp~2kb以内，建议选择YALEPIC^® 2K DNA Marker以获得更高的分辨率；若检测片段在15kb以上，推荐选择YALEPIC^® 10K或更高规格产品。请根据目的DNA片段大小选择最匹配的产品以获取最佳分辨率。

本产品设计的500bp条带浓度为100ng/5µl（亮带），1500bp条带75ng/5µl（次亮带），其他条带40-50ng/5µl。这一差异化浓度设计用于方便快速定位和半定量估算。如出现预期之外的不均匀现象，请检查：上样量是否准确（推荐5µl）、凝胶浓度是否合适（推荐1%琼脂糖凝胶）、缓冲液是否新鲜。