病原微生物 DNA/RNA 提取试剂盒能覆盖哪些病原体?化学+机械双裂解方案
YALEPIC® MagEVO 核酸提取系列 · 病原微生物篇
病原微生物DNA/RNA提取试剂盒:一份样本,只够提一次
面对未知病原,临床往往既要做 DNA 又要做 RNA——病毒可能是 DNA 病毒也可能是 RNA 病毒,还可能是细菌、真菌混合感染。按规范,DNA 与 RNA 分别测序意味着采样量翻倍,而脑脊液、骨髓、婴幼儿全血偏偏最”抠门”。YALEPIC® YG28001 磁珠法病原微生物 DNA/RNA 提取试剂盒采用化学 + 机械双裂解,一管同步提取病毒、细菌、真菌的 DNA 与 RNA,去除血红蛋白、黏蛋白与无机盐等抑制物,适配 mNGS 与自动化工作站。
⏱ 60 秒速览:它解决的是什么问题
✅ 一管双提:同一份样本中同步提取并纯化病毒、细菌、真菌的 DNA 与 RNA,专为共提取场景优化;
✅ 化学裂解 + 机械研磨双裂解体系,针对细胞壁较厚的真菌(酵母、念珠菌)与革兰氏阳性菌等难破壁微生物做了优化;
✅ 广谱兼容:革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、DNA 病毒与 RNA 病毒,一管应对混合感染筛查;
✅ 抑制剂去得干净:去除血红蛋白、黏液蛋白、无机盐等 PCR 抑制杂质,适用于痰液、肺泡灌洗液等复杂体液;
✅ 产物 A260/A280 稳定在 1.8~2.0,无蛋白与核酸酶残留,无需二次纯化即可进入扩增与测序;
✅ 全程不含苯酚 / 氯仿,采用纳米磁珠纯化技术,更安全也更适配自动化;
✅ 通量与稳定性:兼容磁棒法与移液法自动化核酸提取仪,可达 96 样本 / 批次,批间 CV < 5%;
✅ 常温运输、10~30℃ 室温保存,有效期 12 个月,无冷链负担。
💉 第一个现实问题:样本,往往不够分两管
病原检测的难点从来不只是”能不能检出”,而是在样本量极其有限的前提下,把可能性一次覆盖全。按国内专家共识的要求,当怀疑病毒感染、或临床表现复杂无特定方向时,需要同时对样本中的 DNA 与 RNA 进行测序;而若分别送检,采样量要求明显上升:
| 样本类型 | 单独测 DNA 或 RNA | DNA + RNA 同时测 |
|---|---|---|
| 血液 | 采 1 管 | 应同时采 2 管 |
| 脑脊液 / 关节液 / 胆汁 | 1 ml | 2 ml |
| 骨髓 | 0.5 ml | 至少 1 ml |
* 上表为公开专家共识中关于送检量的一般性要求,具体以送检机构与检测项目为准。
🧩 共提取为什么是更优解
对脑脊液、骨髓、婴幼儿全血这类”采一次少一次”的样本,把样本分成两份分别提 DNA 与 RNA,等于把本就稀薄的病原信号再稀释一半。共提取则让同一份裂解产物同时进入 DNA 与 RNA 两条检测路径:既省样本、又省时间,还避免了”分样不均”带来的假阴性——尤其在低载量、混合感染与新发未知病原的场景下,这个差别可能直接决定检出与否。
🔨 第二道关:病原体的”外壳”硬度差了几个数量级
不同病原体的结构差异极大,核酸释放效率天然不同。共识中特别提到:真菌、分枝杆菌等的核酸提取需要特定的破壁处理,否则容易漏检。可以把难度理解成一条阶梯:
🦠
第 1 级
无包膜 / 有包膜病毒
结构最简单
🔵
第 2 级
革兰氏阴性菌
有外膜但壁较薄
🟣
第 3 级
革兰氏阳性菌
厚肽聚糖层
🍄
第 4 级
真菌孢子 / 酵母
顽固细胞壁
⚗ 化学裂解:溶解与变性
通过优化裂解缓冲液破坏膜结构与蛋白,对病毒、多数细菌释放核酸效率高,操作温和、片段完整性好。
💥 机械研磨:物理破壁
通过研磨介质的剪切与撞击打散厚壁结构,显著提高真菌、分枝杆菌、革兰氏阳性菌的核酸释放率与检出率。
YG28001 采用化学 + 机械相结合的裂解体系,正是为了同时覆盖阶梯的两端:既不让易破壁的病毒被过度处理,也不让难破壁的真菌与阳性菌”白提一场”。需要注意的是,机械裂解强度需要标准化——过度会造成核酸片段化、影响长读长测序,这也是自动化统一程序比手工更稳的原因之一。
🩸 第三道关:宿主核酸与抑制物的双重夹击
病原检测是典型的”大海捞针”:样本里绝大多数核酸来自人,而不是病原。这一背景直接决定了灵敏度上限:
📉
宿主核酸压倒性占比
文献报道,呼吸道样本中约 95% 的原始测序读数来自人类 DNA;在唾液、皮肤、鼻腔拭子等多种样本中,微生物来源核酸常不足总读数的 5%。人源比例越高,病原信号被稀释得越严重。
🫧
样本基质带来的抑制物
血液中的血红蛋白、痰液与灌洗液中的黏蛋白、各类无机盐,都会抑制聚合酶与逆转录酶,表现为 Ct 后移甚至假阴性。A260/A280 偏低往往提示蛋白残留。
🧲 YG28001 的应对路径
① 高效裂解
充分释放病原核酸
② 磁珠捕获
高亲和力硅基磁珠
③ 强效洗涤
去除蛋白、盐类与抑制物
④ 高纯洗脱
直接进扩增与建库
通过高效洗涤体系,试剂盒可去除血红蛋白、黏液蛋白与无机盐等杂质,并尽可能降低宿主核酸干扰与背景污染。需要客观说明的是:提取环节能做到的是”减少干扰”,而非”完全去除宿主核酸”;若项目对微生物 reads 比例要求极高,仍需在建库前采用专门的去宿主方案(如差异裂解或探针杂交去除),并注意这类处理可能带来一定偏倚与低载量下的灵敏度损失。
🧫 第四道关:别让”背景”抢了病原的戏
低生物量样本(血浆、脑脊液、肺泡灌洗液)最容易受污染干扰。学界把提取试剂与耗材本身携带的外源核酸称为 kitome——它们会在低载量样本中产生足以混淆判读的信号,有报道称污染读段在某些样本中可占到相当高的比例。
✅ 四条可直接落地的质控要求
① 必设阴性对照(NTC):用无核酸水或提取缓冲液走完整流程,用于判断试剂背景;
② 使用 NGS 级别水与无核酸酶耗材,采样容器同样应无核酸;
③ 孔间防交叉:96 孔板操作中注意相邻孔的信号残留,尤其在低载量样本旁设置高载量样本时;
④ 判读时扣除背景:有做法以”样本 RPM 与阴性对照 RPM 的比值”作为过滤阈值,避免把试剂背景菌当作病原报告。
📋 样本类型与建议用量
| 样本类型 | 建议用量 | 典型用途 |
|---|---|---|
| 抗凝全血 | ≤ 400 μl(新鲜 / 冻存) | 血培养致病菌、血液病毒核酸 |
| 肺泡灌洗液 / 脑脊液 / 胸腹水 / 痰液 | 2~3 ml(总细胞 ≤ 5×10⁶) | 呼吸科、感染科病原筛查 |
| 鼻 / 咽 / 口腔拭子 | 2 ml 保存液(≤ 5×10⁶ 细胞) | 流感、腺病毒等呼吸道病原 |
| 微生物培养物 | 细菌 / 真菌均 ≤ 1×10⁹ 个 | 菌种鉴定、菌株基因组 |
| 粪便 | 固体 100 mg 或保存液 200 μl | 肠道致病菌、肠道菌群测序 |
📦 四档规格怎么选
| 货号 | 规格 | 形态 | 推荐场景 | 目录价 |
|---|---|---|---|---|
| YG28001-A | 32T(预装 A 型) | 预装 | 小体量试用、方法验证 | 770 元 |
| YG28001-B | 48T(预装 B 型) | 预装 | 常规实验室日常使用 | 1120 元 |
| YG28001 | 96T | 标准版 | 通用手动 / 常规批量 | 1925 元 |
| YG28001-C | 96T(预装 C 型) | 预装 | 全自动高通量批量处理 | 2170 元 |
🔬 下游适配哪些实验
📈
RT-qPCR / qPCR
快速靶向检测与定量
🌐
mNGS 宏基因组
无偏倚未知病原筛查
🧬
全基因组测序 WGS
菌株溯源与耐药分析
🔍
16S rDNA 分析
细菌群落与菌种鉴定
🧫
菌种鉴定
培养物核酸提取
🫁
呼吸道病原筛查
拭子、痰液、灌洗液
❓ 关于 YG28001 的高频问题(FAQ)
Q1:MagEVO 病原微生物 DNA/RNA 提取试剂盒可以用于哪些样本类型?
适用于多种临床及环境样本:新鲜或冻存抗凝全血(≤400 μl)、鼻咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、脑脊液、胸腹水等体液样本(2~3 ml,≤5×10⁶ 个细胞),细菌与真菌等微生物培养物(均 ≤1×10⁹ 个细胞),同时也支持粪便样本(100 mg 固态或 200 μl 保存液)的 DNA/RNA 提取。
Q2:该试剂盒能否同时提取 DNA 和 RNA?
可以。试剂盒专门针对病原微生物的 DNA 和 RNA 共提取场景进行了优化设计,能够在同一份样本中同时提取并纯化病毒、细菌和真菌的 DNA 和 RNA。这一特性尤其适用于需同时进行 DNA 病毒和 RNA 病毒检测的宏基因组测序及病原体共检测应用。
Q3:对于难破壁的真菌或革兰氏阳性细菌,提取效果如何?
本试剂盒采用化学裂解与机械研磨相结合的裂解体系,针对细胞壁较厚的真菌(如酵母菌、念珠菌)和革兰氏阳性菌等难破壁微生物进行了裂解优化,能够高效释放核酸,显著提高此类微生物的检出率,适用于临床样本中的低丰度病原体检测。
Q4:提取后的核酸产物可以用于哪些下游实验?
纯化得到的 DNA/RNA 产物纯度高、完整性好,无蛋白及核酸酶残留,适用于常规 PCR 和实时荧光定量 PCR(qPCR)、宏基因组文库构建(mNGS)、全基因组测序(WGS)、基于 16S rDNA 的微生物组分析以及鸟枪法宏基因组测序分析等。
Q5:试剂盒支持自动化提取吗?
支持。本试剂盒采用磁珠法技术路线,既可配合磁力架进行手动提取,也完全兼容各类磁棒法和移液法自动化核酸提取仪进行高通量提取,适用于临床检验中心、疾控中心和科研实验室的大规模样本处理需求。
Q6:试剂盒是否含有苯酚 / 氯仿等有毒试剂?
不含。本试剂盒采用纳米磁珠纯化技术,全程无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂,提取过程中不涉及有机试剂抽提步骤,不仅对实验人员更加安全,也符合绿色环保的实验室操作规范。
Q7:试剂盒的保存及运输条件是什么?有效期是多久?
本试剂盒支持常温运输,全程无需冷链;所有组分在 10~30℃ 室温条件下保存即可,有效期 12 个月。这一保存条件极大地降低了产品在运输和存储过程中的冷链成本,便于实验室备货和日常使用。
Q8:试剂盒的提取产率如何?纯度能达到什么水平?
MagEVO 试剂盒经优化设计,提取产物得率高、重复性好,纯化后的 DNA/RNA 产物 A260/A280 比值一般在 1.8~2.0 之间,蛋白残留低。纯化产物不含 PCR 抑制剂和核酸酶,可直接用于下游扩增和测序反应,无需额外纯化。具体性能以产品随附 COA 与实际验证数据为准。
Q9:能否用于痰液等富含黏蛋白和抑制物的样本?
可以。本试剂盒针对痰液、肺泡灌洗液等富含黏蛋白和多种 PCR 抑制物的复杂体液样本进行了缓冲体系的专门优化,配合高效洗涤步骤,能够有效去除样本中的抑制物,确保提取核酸的纯度满足下游检测要求。
Q10:宏基因组测序(mNGS)实验对核酸提取有什么特殊要求?
mNGS 对核酸提取的纯度、完整性和背景菌污染控制要求较高。本试剂盒采用高效洗涤体系,能够最大限度地去除宿主核酸干扰和背景菌污染,纯化产物适用于 mNGS 文库构建。建议在 mNGS 实验中使用 NGS 级别的水和无核酸酶耗材,并在提取过程中设置阴性对照以监控背景污染。
🧾 数据声明
文中样本用量、纯度区间、规格与保存条件引自官网产品说明与官方 FAQ;宿主核酸占比、背景污染与送检量等为公开文献与专家共识的报道范围,随样本类型与检测策略而异。实际性能请以产品随附 COA、说明书及第三方检测报告为准,目录价以实时报价为准。
⚠ 使用边界与生物安全
本产品为科研用核酸提取试剂,不用于疾病的诊断或治疗;用于临床检测须遵守所在国家与地区关于体外诊断试剂的法规与注册要求。涉及潜在感染性样本的操作与转运,须严格执行生物安全规范与相关传染病防治规定。
一份样本,把 DNA 与 RNA 的可能性一次覆盖
YALEPIC® MagEVO 磁珠法病原微生物 DNA/RNA 提取试剂盒 · 货号 YG28001 系列
96T / 预装 A 型 32T / 预装 B 型 48T / 预装 C 型 96T,兼容手工与自动化工作站
雅礼(江苏)生物科技有限公司 · 国家高新技术企业 · YALEPIC®
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