YALEPIC^® 1Kb DNA 分子量标准

• YALEPIC^®1Kb DNA Marker 是雅礼生物推出的即用型DNA分子量标准品（DNA Ladder），专为琼脂糖凝胶电泳中大片段DNA分析设计。产品由8条线状双链DNA条带组成，分子量范围覆盖 1000 bp、2000 bp、3000 bp、4000 bp、5000 bp、6000 bp、8000 bp、10000 bp（10 Kb），全面满足大片段PCR产物、限制性酶切片段、基因组DNA片段及克隆载体的分子量判定需求。
• 本品采用酶切质粒DNA工艺制备，分子量精准、条带清晰、背景干净，在1%琼脂糖凝胶浓度下电泳分离效果尤为出色。其中 4000 bp条带浓度为100 ng/5 μl（高亮亮带），6000 bp条带浓度为40 ng/5 μl（略弱条带），其余各条带均为50 ng/5 μl。亮带与弱带的差异化浓度设计，便于实验者快速定位目标分子量区间，并通过亮度对比粗略估算目的产物DNA的含量。
• 产品为即用型配方，已预混1×Loading Buffer，无需额外添加上样缓冲液，直接取5 μl上样电泳即可，操作简便，电泳图像清晰稳定。本品不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），仅适用于琼脂糖凝胶体系。

1000 bp，2000 bp，3000 bp，4000 bp，5000 bp，6000 bp，8000 bp，10000 bp。

• 大片段PCR产物（1Kb-10Kb）分子量验证
• 限制性酶切DNA片段分析
• 基因组DNA完整性检测
• BAC/YAC/Cosmid等大片段克隆载体鉴定
• Southern Blot分子量参照
• 不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），因PAGE对分子量标准品的分辨率要求与琼脂糖体系不同。

2 ~ 8℃ 保存两年，-20℃ 保存三年。

Q1：YALEPIC 1Kb DNA Marker适用于哪些类型的电泳？上样量是多少？
A：本产品专为琼脂糖凝胶电泳设计，不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。作为即用型产品，已预混1×Loading Buffer，每次电泳直接取5 μl上样即可。如遇加样孔较宽的情况，可适当增加上样量至10 μl以保证条带亮度。

Q2：YALEPIC 1Kb DNA Marker的条带组成和浓度分别是多少？
A：本Marker由8条双链DNA片段组成，分子量分别为1000 bp、2000 bp、3000 bp、4000 bp、5000 bp、6000 bp、8000 bp、10000 bp。各条带浓度设计为：4000 bp条带100 ng/5 μl（亮带指示），6000 bp条带40 ng/5 μl（略弱），其余6条条带均为50 ng/5 μl。该浓度配置便于同时进行片段大小定位和半定量分析。

Q3：我应该选择多少浓度的琼脂糖凝胶来跑1kb DNA Marker？
A：推荐使用1%琼脂糖凝胶进行电泳，可实现1000 bp至10000 bp范围内各条带的有效分离。如需在低分子量区域获得更高的分辨率，可将凝胶浓度上调至1.5%~2%。凝胶浓度过大会导致大片段条带的迁移受阻，浓度过低则会导致小片段条带分离不充分。

Q4：电泳后发现DNA Marker的条带出现弥散或模糊不清，可能是什么原因？
A：可能原因包括：①电泳缓冲液使用次数过多，离子强度下降导致缓冲能力减弱，建议每次电泳使用新鲜TAE或TBE缓冲液；②电泳电压过高（超过20 V/cm）导致条带扩散和弥散；③上样量不足或过量；④琼脂糖凝胶浓度与目的片段不匹配。请按照说明书推荐的5 μl上样量和1%凝胶浓度操作，并控制电泳电压在适宜范围内。

Q5：电泳时Marker的部分条带（特别是小片段条带）变弱或丢失，如何解决？
A：小片段条带变弱是电泳过程中的常见现象，主要原因是小片段DNA在电泳中迁移速度更快，当DNA条带迁移至凝胶前沿与核酸染料区域时，染料与DNA的结合可能发生解离，导致荧光信号减弱–。建议措施：①使用新鲜配制的电泳缓冲液并保持合适的离子强度；②适当缩短电泳时间或降低电压；③在凝胶中加入终浓度为0.5 μg/ml的EB或等效核酸染料；④选择分辨率更高的凝胶成像系统进行观察。

Q6：YALEPIC 1Kb DNA Marker可以在聚丙烯酰胺凝胶中使用吗？
A：不建议。本产品的条带分子量范围覆盖1000 bp至10000 bp，在琼脂糖凝胶中可获得理想的分离效果，但在非变性聚丙烯酰胺凝胶中，该分子量范围内的DNA片段迁移行为与琼脂糖凝胶存在显著差异，条带分离效果无法保证。如需在PAGE胶中使用DNA分子量标准，建议选择针对PAGE体系优化的专用Marker。

Q7：该Marker应该如何保存？有效期是多久？反复冻融会影响使用效果吗？
A：本产品在2~8℃条件下避光保存可稳定两年；在-20℃冷冻保存有效期可延长至三年。建议按日常用量进行小量分装后冷冻保存，避免整管反复冻融。反复冻融可能造成DNA链断裂或降解，进而影响条带清晰度和浓度准确性。日常使用的工作液可保存于2~8℃，建议在4周内用完。

Q8：YALEPIC 1Kb DNA Marker与其他品牌的1kb DNA Ladder相比有什么优势？
A：本产品以酶切质粒DNA工艺制备，相比传统的PCR产物混合型Marker，条带分子量定位更准确，背景更干净，无非特异性杂带干扰。产品已预混1×Loading Buffer，开盖即用，无需额外稀释或配制，节省实验时间。同时，4000 bp条带以100 ng/5 μl设计为超亮指示带，在电泳图像中辨识度极高，便于快速定位参照位置。在价格方面，雅礼生物以极具竞争力的市场定价，为科研用户提供高性价比的选择。

Q9：该Marker是否含有核酸酶？会不会降解我后续实验中的DNA样品？
A：YALEPIC 1Kb DNA Marker在制备过程中经过严格的核酸酶失活处理，不含残留核酸酶活性。该产品仅作为电泳时的分子量参照，不会对同批次上样的样品DNA造成降解。但为避免交叉污染，建议电泳时使用专用的加样枪头和上样缓冲液，并遵循标准的电泳操作规范。

Q10：如果电泳后发现条带出现拖尾或微笑效应，该如何调整？
A：条带拖尾或微笑效应通常与以下因素有关：①凝胶配制不均匀或未完全凝固即上样；②电泳槽内缓冲液液面未完全淹没凝胶面；③电泳过程中电压不稳定或电流过大；④上样量过载。建议：确保凝胶完全凝固后再移除梳子；电泳缓冲液需完全覆盖凝胶表面1~2 mm；控制恒压电泳在80~120 V范围内；按说明书推荐的上样量（5 μl）上样，避免过载。