酶切质粒工艺,11条带精准覆盖,即用型含Loading Buffer,电泳条带清晰
| 产品货号 | 产品规格 | 目录价 |
|---|---|---|
| YD19161 | 2×500µl | 220.00 |
| 优势点 | 详细说明 |
|---|---|
| 即用型配方 | 预混1×Loading Buffer,无需额外配制,5µl直接上样 |
| 条带数量多 | 11条线状双链DNA片段,覆盖范围100bp~15kb,分辨率优于多数市售8条带产品– |
| 指示带清晰 | 500bp(100ng/5µl)亮带+1500bp(75ng/5µl)次亮带双重指示 |
| 背景干净 | 酶切质粒DNA工艺,无多余酶切产物干扰 |
| 稳定性高 | 建议1%琼脂糖凝胶电泳,带型稳定 |
| 多温区兼容 | 支持2~8℃和-20℃两种保存方案 |
100bp,250bp,500bp,750bp,1000bp,1500bp,2000bp,3000bp,5000bp,8000bp,15000bp。
2 ~ 8℃ 保存两年,-20℃ 保存三年。
Q1:YALEPIC® 15K DNA Marker可以用于RNA电泳吗?
A:不建议用于RNA电泳的分子量判断。DNA Marker中的双链DNA在普通琼脂糖凝胶电泳中保持双链结构,而RNA的迁移率与相同分子量的DNA不同,直接使用会导致分子量估算不准确。若仅需粗略观察RNA条带分布,可临时使用,但不推荐用于精确定量。对于变性胶电泳,DNA双链会解开,绝对不推荐使用DNA Marker指示RNA大小。
Q2:为什么我的DNA Marker电泳条带模糊、弥散或拖尾?
A:条带模糊通常由以下原因导致:①电泳缓冲液陈旧:多次使用后离子强度降低、pH上升,缓冲能力下降,建议每次更换新鲜缓冲液;②核酸酶污染:使用时请使用灭菌枪头,用后及时拧紧管盖;③凝胶质量问题:建议使用高质量琼脂糖并确保凝胶凝固均匀;④电压过高:建议电泳电压4-10V/cm,电压过高会产生过多热量导致条带扩散。
Q3:YALEPIC® 15K DNA Marker应该如何上样?上样量是多少?
A:本产品为即用型产品,已含有1×Loading Buffer,无需额外添加或加热处理。常规电泳条件下:加样孔孔宽小于6mm时,每次取5µl直接上样即可;如加样孔较宽,可适当增加至8-10µl–。建议凝胶浓度为1%-2%琼脂糖凝胶,电压4-10V/cm,电泳时间25-60分钟–。
Q4:YALEPIC® 15K DNA Marker与其他品牌15kb DNA Marker相比有何优势?
A:①条带数量更多:11条带覆盖100bp~15kb,优于多数竞品的7-8条带,分辨率更高;②双重指示带设计:500bp亮带+1500bp次亮带,便于快速定位和浓度估算;③预混即用型:无需自行配制Loading Buffer,开盖即用;④浓度梯度设计:不同位置条带浓度差异化设置,便于半定量分析。
Q5:产品的保存条件和有效期是多久?是否需要分装?
A:2~8℃保存有效期为2年,-20℃保存有效期为3年。建议日常使用频率高时暂存于2~8℃,长期不用则-20℃保存。为避免反复冻融导致的条带降解,建议首次使用时分装成小规格单次使用量保存。
Q6:YALEPIC® 15K DNA Marker与YALEPIC®系列其他DNA Marker如何选择?
A:YALEPIC® 15K DNA Marker覆盖100bp~15kb,适合中大型DNA片段检测场景(如质粒酶切分析、大片段PCR产物鉴定)。如实验片段范围在100bp~2kb以内,建议选择YALEPIC® 2K DNA Marker以获得更高的分辨率;若检测片段在15kb以上,推荐选择YALEPIC® 10K或更高规格产品。请根据目的DNA片段大小选择最匹配的产品以获取最佳分辨率。
Q7:条带亮度不均匀或某些条带偏弱是什么原因?
A:本产品设计的500bp条带浓度为100ng/5µl(亮带),1500bp条带75ng/5µl(次亮带),其他条带40-50ng/5µl。这一差异化浓度设计用于方便快速定位和半定量估算。如出现预期之外的不均匀现象,请检查:上样量是否准确(推荐5µl)、凝胶浓度是否合适(推荐1%琼脂糖凝胶)、缓冲液是否新鲜。
Q8:能否与GelRed、SYBR Green等荧光染料兼容?
A:兼容。YALEPIC® 15K DNA Marker可与GelRed、SYBR Green、Goldview等常见核酸荧光染料配合使用。但需注意:不同染料对DNA的染色效率不同,可能影响条带亮度表现,建议首次使用某类染料时进行预实验优化曝光参数。若为EB染色,建议使用终浓度0.5µg/ml的EB溶液染色15-20分钟后观察。
Q9:产品中是否有可见的沉淀物?如何处理?
A:正常产品应为澄清透明溶液。如发现沉淀,可能原因包括:①运输过程中温度波动导致SDS沉淀;②长期保存后出现微量沉淀。处理方法:室温放置片刻或37℃温和加热5-10分钟,上下轻柔颠倒混匀后即可正常使用。不建议剧烈震荡或沸水浴加热,以免DNA变性。
Q10:YALEPIC® 15K DNA Marker可以用在哪些具体实验场景中?
A:典型应用场景包括:①PCR产物的片段大小验证——电泳后与Marker比对确认扩增片段是否符合预期;②质粒DNA酶切鉴定——通过酶切片段大小确认重组质粒构建是否正确;③基因组DNA酶切图谱分析——Southern blot前的片段大小筛选;④DNA片段回收前的质量评估——确定目的条带位置便于切胶回收;⑤连接产物、酶切产物的片段大小鉴定与浓度半定量分析。