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YR23017 动物细胞/组织总RNA快速提取

YALEPIC® 动物细胞/组织总RNA快速提取试剂盒

7 分钟室温快速提取|双柱去 gDNA|无毒无酚氯仿|组织细胞通用

组织细胞通用型RNA提取试剂盒,室温7分钟完成,高纯度RNA即提即用

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YR23017 50T 800.00+

产品简介

  • YALEPIC®动物细胞/组织总RNA快速提取试剂盒(YALEPIC Animal Cell & Tissue Total RNA Fast Isolation Kit)基于异硫氰酸胍裂解 + 硅基质膜吸附纯化技术,专为从各类动物组织和培养细胞中快速、高效提取高纯度总RNA而设计。
  • 本产品采用创新性的双柱过滤体系:Fast gDNA Filter Columns可一步高效去除基因组DNA(gDNA)及蛋白等杂质,Pure Columns RT吸附柱能高亲和力结合RNA,确保提取产物OD260/280比值稳定在1.9~2.1,RNA完整性好,28S/18S条带清晰。
  • 整个提取过程仅需7分钟,全程室温操作无需使用苯酚、氯仿、β-巯基乙醇等有毒有害试剂,实验操作更安全、更环保,显著降低对实验人员的健康风险。
  • 提取的总RNA可直接用于RT-PCR、RT-qPCR(荧光定量PCR)、Northern Blot、Dot Blot、基因芯片分析、Poly(A)筛选、体外翻译、RNase保护实验及分子克隆等多种下游分子生物学实验。

产品优势

  • 极速高效:7 分钟室温完成动物细胞 / 组织总 RNA 提取,大幅缩短实验耗时
  • 强效去 gDNA:双柱过滤法,一步去除基因组 DNA 污染,提升 RNA 纯度
  • 广谱兼容:通用型适配各类动物细胞与组织样本,通用性强
  • 安全无毒:全程不使用酚、氯仿、β‑巯基乙醇,保护实验人员安全
  • 高成功率:纯化体系稳定,RNA 得率与纯度稳定,降低实验失败率

适用范围

样本类型推荐投入量适用样本举例
动物组织10 ~ 30 mg肝脏、脾脏、肾脏、脑组织、心肌、骨骼肌、脂肪组织、肺组织、肠组织等
培养细胞≤ 1 × 10⁷ 个贴壁细胞(HeLa、HEK293、A549等)、悬浮细胞(Jurkat、K562等)、原代培养细胞

操作流程

数据展示

产品组分

序号产品组分YR23017(50T)
YLC Buffer37 ml
Wash Buffer RA42 ml
Wash Buffer RB12 ml
RNase-free ddH2O11 ml
Proteinase K550 μl
Fast gDNA Filter Columns with Collection Tubes50 T
Pure Columns RT with Collection Tubes50 T
Nuclease-free Centrifuge Tubes(1.5 ml)赠50 T

保存及运输条件

常温运输;10 ~ 30℃ 室温保存。

FAQ

Q1:YALEPIC 动物细胞/组织总RNA快速提取试剂盒一盒可以做多少次提取?能同时处理动物组织和细胞吗?

A1:本品为标准50T规格(货号YR23017),即一瓶可完成50次RNA提取反应。该试剂盒为组织细胞通用型RNA提取试剂盒,可同时用于动物组织(如肝、脾、肾、脑等软组织,建议用量10-30mg)和培养细胞(贴壁/悬浮细胞均可,建议用量≤1×10⁷个)的总RNA提取,无需分别采购不同试剂盒,使用更加便捷。

Q2:该试剂盒可以提取哪些动物组织的RNA?对特殊组织(如脾脏、肾脏)有限制吗?

A2:本品适用于多种常见动物软组织的总RNA提取,包括肝脏、脾脏、肾脏、脑组织、心脏、骨骼肌、肺组织等。但需要注意:DNA含量特别丰富的组织(如肝、脾、肾)建议用量不超过10-20mg,以免影响提取效果和增加gDNA残留风险。

Q3:该RNA提取试剂盒整个提取过程需要多长时间?需要特殊设备或低温条件吗?

A3:整个RNA快速提取流程可在7分钟室温条件下完成——从样本裂解到RNA洗脱全程无需预冷离心机、无需冰上操作,所有离心步骤均在室温(15-30℃)下完成,使用常规台式离心机即可(转速≥12,000rpm)。这是该产品“7min室温提取”的核心优势,相较于传统TRIzol法(约1.5小时)和常规柱式法(约30分钟),大幅缩短了实验周期。

Q4:提取过程中是否需要用氯仿/苯酚?操作安全吗?

A4:完全不需要。本产品采用硅基质膜柱式纯化技术,全程无需使用氯仿、苯酚及β-巯基乙醇等有毒有害试剂。对于实验室安全管理和操作人员健康非常友好,尤其适合对有机试剂敏感或通风条件有限的实验环境。这一点也是本产品相比传统TRIzol/酚氯仿法RNA提取的核心差异化优势。

Q5:该试剂盒提取的RNA纯度高吗?能直接用于qPCR吗?

A5:可以。本试剂盒采用双柱过滤系统——Fast gDNA Filter Columns有效去除基因组DNA,搭配优化后的洗涤缓冲液去除蛋白和盐离子残留。提取的总RNA纯度A260/A280比值通常在1.9-2.1之间,可直接用于RT-PCR、荧光定量PCR(qPCR)、Northern Blot等对纯度要求较高的下游实验。如需完全消除DNA残留(尤其涉及低丰度基因表达分析时),可进一步使用RNase-free DNase I进行柱上或洗脱后消化处理。

Q6:该试剂盒可以去除基因组DNA(gDNA)污染吗?如果gDNA残留怎么办?

A6:可以。本试剂盒内置Fast gDNA Filter Columns,可在RNA提取过程中一步式高效去除基因组DNA,无需额外步骤。对于DNA含量特别丰富的样本(如肝、脾、肾组织),建议将起始用量控制在10-20mg以内。若下游实验(如qPCR)对DNA污染高度敏感,可在RNA洗脱后使用RNase-free DNase I进行进一步消化处理。说明书中有详细的操作指导。

Q7:该试剂盒如何保存?运输需要冷链吗?

A7:本试剂盒所有组分可在10-30℃室温条件下干燥保存,无需冷藏或冷冻,运输时同样采用常温运输即可,无需冷链支持。这为实验室库存管理带来了极大便利,也降低了运输和储存成本。开封后仍可在室温条件下保存至试剂盒效期结束(详见瓶身标签),但应注意避免反复开盖引入污染。

Q8:试剂盒开封后多久有效?可以反复开盖使用吗?

A8:试剂盒各组分的稳定性设计覆盖整个效期(通常为12-24个月,具体以瓶身标签为准)。建议每次使用后将瓶盖及时拧紧,存放于干净干燥的室温环境中。裂解液及洗涤缓冲液应避免长时间暴露于空气,以防溶剂挥发或引入RNase污染。不建议反复冻融试剂组分(所有组分均室温保存,无需冻融)。

Q9:如果遇到柱子堵塞或离心困难,可能是什么原因?如何解决?

A9:柱子堵塞通常由以下原因造成:(1)样本投入量过多——请参考推荐的样本用量范围(组织10-30mg,细胞≤1×10⁷个);(2)样本研磨/裂解不充分——建议尽可能研磨充分,必要时可加大裂解液体积并延长裂解时间。取上清过柱时切勿吸取沉淀物。(完整的问题排查表详见页面“疑难解答”部分。)

Q10:提取的RNA产量低怎么办?

A10:RNA产量偏低可能由以下因素引起:样本用量过少(可适当增加,但组织勿超30mg、细胞勿超1×10⁷个);样本保存不当导致RNA降解(建议使用新鲜样本或液氮速冻后-85~-65℃保存的样本,避免反复冻融);研磨/匀浆不充分(可加大裂解液体积及裂解时间);洗脱不充分(可将RNase-free ddH₂O加至膜中央,减少洗脱体积,56℃预热洗脱液或室温延长放置时间,亦可进行二次洗脱提高产量)。

Q11:该试剂盒提取的RNA可以用于哪些下游实验?

A11:提取的总RNA纯度高、完整性好,可广泛应用于多种分子生物学下游实验,包括但不限于:逆转录PCR(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(qPCR/Real-Time RT-PCR)、基因芯片分析、Northern Blot、Dot Blot、Poly(A)RNA筛选、体外翻译、RNase保护分析及分子克隆等。提取产物可直接用于后续实验或于-85~-65℃条件下长期保存备用。

一、Pure Columns 堵塞

原因 1:样本投入量过多

解决方案:减少样本起始投入量。

原因 2:样本研磨不充分

解决方案:尽可能研磨充分,必要时可加大裂解液的体积及延长离心时间,取上清时,切勿吸取沉淀。

二、RNA 降解

原因 1:样本保存不当

解决方案:采用新鲜样本或经过液氮速冻后保存于 -85 ~ -65℃ 的样本。冻存样本应尽量避免反复冻融。

原因 2:设备及环境污染

解决方案:电泳前将电泳槽用 3% 双氧水浸泡 20 min,然后用 RNase-free ddH₂O 进行冲洗及电泳缓冲液的配制,确保 RNase-free 的提取环境。确保提取过程中使用的枪头和离心管均为 RNase-free。

三、RNA 产量低

原因 1:样本量过少

解决方案:适当增加投入量,组织请勿超过 30 mg,细胞请勿超过 1 × 10⁷ 个。

原因 2:样本保存不当

解决方案:RNA 降解,采用新鲜或 -85 ~ -65℃ 未冻融的样本。

原因 3:研磨或匀浆不充分

解决方案:加大裂解液体积及裂解时间。

原因 4:洗脱不当

解决方案:RNase-free ddH₂O 加至膜中央,适当减少洗脱体积,可 56℃ 预热、延长室温放置时间或者进行二次洗脱。

四、抑制下游或纯度低

原因 1:盐离子残留

解决方案:Wash Buffer RB 洗脱两次,加液时沿吸附柱管壁四周加入,盖盖后颠倒混匀 2 ~ 3 次,完全冲洗沾附于管壁上的盐离子。

原因 2:乙醇残留

解决方案:延长步骤 8 晾干放置时间,至乙醇完全挥发。

五、gDNA 污染

原因 1:样本量过高

解决方案:不同样本 DNA/RNA 含量相差大,请勿超过 30 mg 组织和 1 × 10⁷ 细胞;肝、脾和肾 DNA 含量丰富,请勿超过 10 ~ 20 mg。若需进一步去除 gDNA 残留,可用 DNase I 进行消化。

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