Q1:YALEPIC WGA 试剂盒适用的起始样本类型有哪些?
A:支持单个活细胞、胚胎活检 TE 细胞、微量外周血、10pg~ng 级微量基因组 DNA、少量 FFPE 解离单细胞,常规单个细胞可稳定扩增出 2~5μg 基因组 DNA。
Q2:试剂盒扩增全程需要多长时间?能不能缩短实验时长?
A:标准流程 3h 完成全部扩增;常规裂解 30min + 预扩增 + 正式扩增,不建议随意缩短反应时间,会降低基因组覆盖度。
Q3:裂解后的胚胎样本真的可以常温运输吗?最高耐受多少温度?
A:细胞裂解完毕后的样本≤37℃可常温短途运输,不破坏 DNA 完整性,是本试剂盒区别于市面常规 WGA 产品的核心优势,长途仍建议冷藏。
Q4:扩增产物可以直接做二代全基因组测序(WGS)吗?
A:产物纯度满足 NGS 建库需求,可直接用于全基因组测序、外显子捕获测序、CNV 拷贝数变异检测、SNP 分型等下游实验。
Q5:试剂盒所用 Phi29 酶和普通 WGA 试剂盒聚合酶有什么区别?
A:采用定向进化优化 Phi29 聚合酶,高保真性 + 强链置换活性,扩增偏差更低、全基因组覆盖度≥95%,优于普通野生型 Phi29 原料。
Q6:96 次规格(货号 DZ-SC2502-96)包含哪些试剂组分?
A:整套包含裂解液、预扩增缓冲液、Phi29 酶、扩增缓冲液等全套反应试剂,无需额外采购配套原料,直接上机使用。
Q7:试剂盒储存温度不达标会影响使用效果吗?
A:原液需 – 20℃避光保存,反复冻融、常温久放会造成酶活下降,出现扩增产量低、覆盖度下降等问题。
Q8:扩增后 DNA 产物怎么保存?保存周期多久?
A:扩增产物分装后 – 20℃保存,短期 1 个月、长期 – 80℃可保存 2 年,反复冻融≤3 次。
Q9:阴性对照出现扩增条带是什么原因?怎么解决?
A:多为耗材 / 操作台外源 DNA 污染,更换无菌无酶离心管、紫外消毒操作台、新开阴性对照缓冲液即可排除污染问题。
Q10:单个细胞扩增产物不足 2μg 是什么因素导致?
A:细胞裂解不充分、起始细胞降解、反应温度波动;优化裂解孵育时间,全程冰上加酶可提升产物产量。
Q11:试剂盒能否用于植物单细胞全基因组扩增?
A:优化缓冲液兼容动物 / 人源单细胞,植物细胞壁较厚需提前优化裂解方案,少量植物样本可预实验验证。
Q12:产品是否可用于临床 PGT 胚胎植入前基因筛查?
A:试剂性能经过PGT 样本验证,可用于囊胚活检单细胞扩增、胚胎染色体 CNV 筛查。
Q13:YALEPIC 单细胞全基因组扩增试剂盒和市面上其他单细胞WGA试剂盒相比有什么优势?
A:核心优势对比:
YALEPIC 单细胞全基因组扩增试剂盒是兼顾高覆盖度、高均一性、操作便捷性与运输灵活性的新一代单细胞WGA解决方案。