雅礼生物FAQ常见问题解答

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雅礼生物FAQ中心汇集了用户在使用核酸提取、PCR纯化、磁珠法DNA/RNA提取等产品的常见问题。 您可以按产品类型浏览,或直接搜索关键词快速定位所需答案。

共 1127 条FAQ,分 57 页显示,当前第 21 页

产品FAQ

以下FAQ来源于各产品详情页,涵盖样本保存、核酸提取、PCR/qPCR、转染、血清、耗材等品类。点击产品名称可跳转至产品详情页。

YALEPIC® 唾液DNA提取试剂盒(不含RNase A)

提取的DNA能否长期保存?保存条件是什么?
 提取纯化后的唾液基因组DNA可在以下几种条件下长期保存:
  • -20℃保存: 溶解于洗脱液或无核酸酶水中,可保存6~12个月,适合中短期存储;

  • -80℃保存: 可长期保存(数年以上),建议分装为小管以避免反复冻融导致的DNA降解;

  • 4℃短期保存: 提取后3~5天内使用的DNA可暂存于4℃。

如何提高低丰度唾液样本的DNA得率?
 对于低丰度DNA的唾液样本(如老年人、干燥综合征患者、长期服药人群等),可尝试以下优化措施提高得率:
  1. 增加样本起始量: 在不超出离心柱载量(通常≤30 μg DNA)的前提下,适当增加唾液样本体积至600~800 μL;

  2. 优化裂解时间: 将裂解步骤延长至15~20分钟,必要时提高裂解温度至65℃;

  3. 减少洗脱体积: 采用50 μL(而非100 μL)洗脱液洗脱,提高DNA浓度;

  4. 两次洗脱合并: 用30~40 μL洗脱液洗脱两次,合并收集管中的DNA溶液;

  5. 洗脱液预热: 将洗脱液预热至65~70℃后再加入吸附柱,可提升洗脱效率;

  6. 延长洗脱孵育时间: 加入洗脱液后室温放置2~5分钟再离心,确保DNA充分溶解。

试剂盒是否适用于含保存液的唾液样本?
 适用。本试剂盒明确标注适用于“唾液/保存液混合液”样本的基因组DNA提取。商业化唾液保存液,通常包含稳定细胞膜、抑制核酸酶活性的成分,与试剂盒的裂解缓冲体系兼容。建议在使用前咨询保存液供应商确认其成分与本试剂盒的兼容性。对于未经测试的保存液品牌,建议先取少量样本进行预实验验证。

YALEPIC® 唾液DNA样本保存管

使用YALEPIC 唾液保存管采集样本前,有哪些注意事项?
 采样前30分钟内,请受试者避免进食、饮水、吸烟或嚼口香糖。可先用清水漱口,去除口腔杂物。等待2-3分钟后,放松脸颊,使口腔自然分泌唾液,轻轻吐入收集漏斗或直接吐至保存管中,直至唾液(不含气泡)量达到标示刻度线(约2-3ml)。旋紧管盖,上下颠倒混匀10-15次,使唾液与保存液充分接触。
采集后,唾液样本能在常温下存放多久?是否需要立即提取DNA?
本产品专为常温稳定保存而设计。采集并混匀后,样本在 4-37℃ 环境中可稳定保存 长达1年,无需立即提取。这使其非常适合于样本采集后需集中运输、批量处理的场景(如多中心临床试验、大型队列研究)。即使室温放置数月,仍可提取出高纯度、完整的高分子量DNA。
从该保存管中提取DNA时,有什么特殊步骤吗?
操作简便,无需特殊步骤。将管中混合液转移至离心管,离心弃上清后,即可使用任何商业化唾液/血液基因组DNA提取试剂盒(磁珠法或离心柱法)按照标准流程提取。保护剂不影响蛋白酶K活性,也无须额外洗涤。我们推荐使用雅礼生物的配套提取试剂盒以获得最佳效果。
提取出的DNA质量如何?能否满足高通量测序(NGS)要求?
 完全可以。从本保存管中提取的DNA总量通常在 10-50μg(取决于个体差异),A260/280比值在1.8-2.0,A260/230比值>1.8。片段大小以 ≥20kb 为主,完整性高。我们已验证其完全适用于 Illumina、MGI等平台的全基因组测序(WGS)、靶向捕获测序和全外显子组测序(WES),测序数据覆盖均一、GC偏差小。
与其他品牌(如Norgen)的唾液保存管相比,有何优势?
YALEPIC 唾液DNA保存管在保持同等DNA稳定性能(常温2年)的基础上,提供极具竞争力的性价比,适合大规模采购。同时,我们的保护剂配方兼容绝大多数商业化提取试剂盒,不限制后续流程,并且针对高温长途运输做过特殊优化,更适合中国及“一带一路”沿线国家等夏季高温区域的物流条件。此外,雅礼生物提供从采集、保存到提取的全流程技术支持。
该保存管是否适合长期冻存(如-80℃)?
可以。如果您需要将样本长期保存(超过1年),建议在常温保存稳定1年之后,或为长期建库需要,可将混合液转移至冻存管,于 -20℃或-80℃ 冻存。但我们提醒,常温保存已能满足绝大多数长期研究需求,反复冻融反而可能影响DNA完整性。
该产品是否经过相关验证?是否有配套的提取试剂盒?
本产品在多家第三方基因检测公司完成实际应用验证。雅礼生物提供配套的 YALEPIC® 磁珠法唾液基因组DNA提取试剂盒,可实现在自动化提取仪上的高通量操作,欢迎联系我们申请试用装。

YALEPIC® 多糖多酚植物基因组DNA提取试剂盒(含RNase A)

为什么多糖多酚植物样本的DNA提取比普通植物困难?
多糖多酚植物样本的DNA提取困难主要体现在两点:第一,多糖会与DNA共沉淀,形成难以溶解的胶状杂质,使DNA溶液呈现粘稠状,影响核酸释放和后续操作;第二,多酚类物质在细胞破碎后容易被氧化为醌类,与核酸共价结合,导致提取的DNA溶液呈褐色,同时抑制PCR酶的活性,影响下游扩增反应。本试剂盒采用独特的沉淀溶液和硅基质膜技术,可有效沉淀去除蛋白质、多糖以及酚类等杂质,提取的基因组DNA纯度高、质量稳定。
该试剂盒适用于哪些多糖多酚植物样本?
本试剂盒适用于多种富含多糖多酚的植物组织,典型样本包括:棉花、松类、银杏;香蕉和葡萄的果肉;小麦和花生的种子;菇类真菌;以及蔷薇科等高多糖多酚含量的植物(如苹果、梨、桃等)。此外,也适用于常规植物样本的DNA提取,适用范围极广。
提取的DNA产量低,可能是什么原因?
产量低可能由以下几种情况导致:
  1. 样本质量不佳:实验材料不新鲜或反复冻融,导致DNA降解。建议尽量使用新鲜材料,低温保存材料避免反复冻融。
  2. 裂解不充分:植物研磨不彻底,或细胞未充分裂解。液氮研磨应充分至细粉状,加入裂解液后需充分涡旋混匀,可适当延长裂解时间。
  3. 样本用量不当:样本量过少(DNA总量不足)或过量(裂解不完全)。建议按照说明书推荐用量:新鲜植物样本≤100 mg,干燥植物样本≤20 mg。
  4. 洗脱步骤问题:洗脱液未预热或洗脱体积过小。可将YGE Buffer预热至65℃再行洗脱,或增加洗脱次数。
DNA出现降解(跑胶弥散或条带模糊)怎么办?
DNA降解通常由以下原因引起:
  1. 材料反复冻融:样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
  2. 操作过于剧烈:液氮研磨或组织匀浆后,后续操作应尽量轻柔,避免剧烈吹打或振荡。DNA洗脱液也应避免反复冻融。
  3. RNase污染:提取过程中RNase A的用量和处理时间需规范,避免外源RNase污染。建议DNA和RNA电泳槽分开使用。
离心柱出现堵塞,无法顺利过柱,怎么解决?
离心柱堵塞最常见的原因是样品研磨裂解不充分或裂解物中含有大量粘稠的多糖物质。解决方案如下:
  1. 检查裂解液是否清亮,去除溶液中过于粘稠的不溶物后再过柱。
  2. 适当减少初始样本用量。对于多糖含量特别高的样本,建议按照说明书推荐范围的下限取样。
  3. 确保YPC Buffer和Wash Buffer GB在首次使用前已按要求加入无水乙醇。
  4. 所有离心操作均在室温下进行,离心温度过低可能导致杂质沉淀不完全。
洗脱下来的DNA溶液带有颜色(褐色或黄色),是什么原因?
DNA溶液带有颜色通常是因为样本用量太高或植物组织中的多酚类物质未被充分去除。多酚氧化后会形成褐色醌类化合物,与核酸共价结合。解决方案:减少初始样本量,按照说明书推荐用量取样;裂解后可适当增加漂洗次数。
提取的DNA A260/A280比值偏低,说明什么?如何改善?
A260/A280比值偏低(小于1.8)通常表示蛋白质或多酚类物质残留。改善方法:
  1. 确保裂解后充分离心,将上清移至新管时避免吸入沉淀。
  2. 严格按照说明书操作,确保Wash Buffer GB已加入无水乙醇,且漂洗步骤彻底。
  3. 漂洗后应空管离心1-2分钟,确保乙醇完全挥发后再进行洗脱。
提取的DNA A260/A230比值偏低,说明什么?如何改善?
A260/A230比值偏低(小于2.0)通常表示多糖或盐类残留。多糖污染的DNA溶液常呈现粘稠状,难以溶解和移取,同时会抑制PCR、反转录和连接反应-。改善方法:
  1. 确保YPC Buffer已按要求加入无水乙醇,按1.5倍样本体积加入,充分混匀后静置适当时间。
  2. 漂洗步骤不可省略,Wash Buffer GB应充分洗涤离心柱。
  3. 对于多糖含量极高的样本(如某些水果果肉),可适当减少初始样本用量。
该试剂盒是否需要使用苯酚/氯仿等有毒有机试剂?
完全不需要。本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,全程无需使用苯酚/氯仿等有机试剂,30 min内即可完成植物样本基因组DNA提取,操作安全便捷。相比传统的CTAB法,本试剂盒无需接触氯仿等有毒化学品,同时也避免了传统乙醇或异丙醇沉淀纯化DNA时多糖共沉淀的问题。
该试剂盒提取的DNA可以用于哪些下游实验?
本试剂盒纯化得到的DNA可直接用于多种下游实验,包括但不限于PCR扩增、Real-Time PCR、限制性内切酶酶切、文库构建、Southern Blot、分子标记(如SSR、AFLP、RAPD等)及高通量测序(NGS)。提取的DNA纯度高、完整度好,已成功去除PCR和其他酶促反应的抑制剂,无需额外纯化即可直接使用。
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