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PCR产物纯化+凝胶回收一盒搞定?YALEPIC® 硅基质膜法15分钟一次说清

发布时间:2026-07-27

YALEPIC® 快速PCR产物/琼脂糖凝胶DNA纯化回收试剂盒 是雅礼生物自主研发的一款一盒两用的DNA片段纯化回收试剂盒。采用高性能硅基质膜技术,可同时满足PCR产物纯化琼脂糖凝胶DNA回收双重需求。15分钟内完成结合-洗涤-洗脱全套流程,高效回收100bp~20kb范围内的DNA片段,有效去除引物、寡核苷酸、酶、矿物油、琼脂糖等杂质。每根吸附柱最高可吸附10μg DNA,回收率最高达80%。兼容所有常规浓度的TAE/TBE琼脂糖凝胶,纯化产物可直接用于一代/二代测序、连接转化、体外转录等下游分子实验。常温运输、10~30℃室温保存。—— YALEPIC®,雅礼生物,国家高新技术企业。

🔬 PCR产物纯化与凝胶回收——分子实验室的日常痛点

从跑胶到切胶,每一个环节都可能”丢DNA”

在分子生物学实验室里,PCR产物纯化和琼脂糖凝胶DNA回收是最频繁的两项操作——无论是基因克隆中的目的片段回收、测序前的PCR产物清洁,还是酶切验证后的片段分离,几乎每个分子实验项目都绕不开这一步。然而,看似简单的”纯化回收”,实际操作中却暗藏诸多痛点

第一,回收率不稳定是最大痛点。不少实验室仍在使用传统的冻融法或透析袋法回收凝胶中的DNA片段,这些方法操作繁琐、耗时长(通常需要1~2小时),且回收率往往仅有30%~50%。尤其对于小于200bp的小片段和大于10kb的大片段,回收效率更是大幅下降。辛辛苦苦跑完PCR、切完胶,最后只回收回一点点DNA——这是许多研究生都有过的”血泪”经历。

第二,杂质残留直接导致下游实验失败。PCR反应体系中残留的引物、dNTP、Taq酶、矿物油,以及琼脂糖凝胶中的多糖成分,如果不彻底去除,会严重抑制后续的连接酶、限制性内切酶活性,甚至导致转化效率骤降。某课题组统计发现,克隆实验失败案例中,约40%可追溯到DNA片段纯化不彻底——引物二聚体未去除干净,竞争性连接导致假阳性克隆。

第三,一盒多用需求未被满足。实验室常规操作中,PCR产物纯化和凝胶回收往往需要两套不同的试剂盒,不仅采购成本翻倍,更换试剂盒时操作流程和缓冲液体系不一致,容易产生操作失误。能否”一盒两用”、流程统一,是提升实验室效率的关键。2025年发表于《iCourse国家精品课程论坛》的一项系统教学评估指出:柱式硅基质膜法因兼具高回收率(80%~90%)快速(10~15分钟)无酚氯仿三大优势,已成为高校分子生物学实验教学和科研的标准方法。

📉

冻融法回收率仅30%~50%

辛辛苦苦切胶,DNA丢了一大半

⏱️

冻融法耗时1~2小时

反复冻融、离心、转移,效率极低

🧪

引物/酶残留抑制下游

40%克隆失败源于纯化不彻底

📦

PCR纯化+胶回收需要两盒

成本翻倍,流程不一致易出错

💡 YALEPIC® 硅基质膜法如何解决?

“一盒两用,15分钟搞定——采用高性能硅基质膜技术+独特溶胶缓冲体系
实现PCR产物纯化与凝胶DNA回收双重需求,
回收率最高80%,100bp~20kb广谱覆盖,全程无酚氯仿。”

技术原理:硅基质膜凭什么”又快又纯”?

硅基质膜法的核心在于硅胶膜在高盐低pH条件下对DNA的选择性吸附。当含有DNA的溶液通过吸附柱时,DNA片段被硅基质膜高效捕获,而引物、dNTP、酶蛋白、矿物油、琼脂糖等杂质则随流穿液排出。随后通过两次洗涤去除残留盐离子,最后用低盐高pH洗脱液将纯化DNA释放——整个过程仅需“结合-洗涤-洗脱”三步

1

溶胶/结合

YGP Buffer溶胶
DNA结合硅胶膜

2

洗涤去杂

PW Buffer洗去
引物/酶/盐/琼脂糖

3

洗脱DNA

YEB Buffer洗脱
获得高纯DNA片段

4

下游实验

测序/连接/转化
体外转录/PCR

与传统冻融法相比,硅基质膜法的优势贯穿全过程:结合更高效(硅胶膜对DNA的吸附容量达10μg/柱,远超冻融法的物理释放极限)、纯化更彻底(两步洗涤即可去除引物/酶/盐/琼脂糖全部杂质)、操作更简便(全程离心操作,无需反复冻融和透析转移,15分钟完成)。

⭐ 五大核心优势详解

📦 优势一:一盒两用,PCR纯化+凝胶回收

一盒试剂盒同时满足PCR产物纯化琼脂糖凝胶DNA回收两大需求。无需分别采购两套试剂盒,统一操作流程、统一缓冲液体系,减少试剂切换带来的操作失误。对于需要频繁切换两种实验的分子克隆项目,一盒两用可节省试剂采购成本约50%,同时大幅提升实验效率。

⚡ 优势二:15分钟快速完成,告别漫长等待

全程仅需15分钟即可完成”结合-洗涤-洗脱”全套操作。相比传统冻融法(1~2小时)和透析袋法(2~4小时),效率提升4~8倍。上午切完胶,下午就能拿到纯化产物开始连接转化——实验进度不再卡在回收环节。对于需要当天完成克隆构建和测序送样的高效实验室,这一速度优势尤为关键。

🎯 优势三:回收率最高80%,100bp~20kb广谱

可稳定回收100bp~20kb范围内的所有DNA片段,覆盖主流分子实验的片段规格。在标准实验条件下,回收率最高可达80%,远超冻融法的30%~50%。单根吸附柱最高可吸附10μg DNA,上样量充足,满足高浓度样本纯化需求。无论是小片段引物产物的清洁,还是大片段基因组酶切产物的回收,都能游刃有余。

🛡️ 优势四:无酚氯仿,操作安全环保

全程不使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂,所有缓冲液均为水性体系。不仅保障实验人员健康,更消除了有机试剂残留对下游酶反应的抑制——纯化产物中无蛋白/酚/氯仿污染,OD260/230比值稳定>2.0,可直接用于连接、转化、测序等对纯度要求高的下游实验。对于需要符合实验室安全规范的单位,无毒化操作是必备条件。

🌡️ 优势五:常温运输保存,无需冷链

全部组分支持常温运输,10~30℃室温保存即可,无需-20℃冷冻或4℃冷藏。保质期长达18个月。对于采购周期长、冷链物流不便的基层实验室和教学单位,这一特性可节省仓储与运输成本50%~80%。随时取用、即开即用,告别冻融循环对试剂活性的影响。

🎯 适用范围与下游实验

🧪

凝胶体系适配

兼容所有常规浓度的
TAE、TBE琼脂糖凝胶
无体系适配壁垒

🔬

样本类型适配

PCR扩增产物、酶切反应液
DNA连接反应液、探针标记反应液
各类DNA粗制品纯化提质

📏

片段规格适配

专属适配
100bp ~ 20kb DNA片段
满足基础与高端基因研究需求

🧬

下游实验适配

一代/二代测序、连接转化
基因探针标记、体外转录
载体构建、基因克隆

下游实验 对DNA纯度要求 YALEPIC适配性 说明
一代测序(Sanger) ✅ 直接可用 去除引物和dNTP,避免测序信号干扰
二代测序(NGS) 极高 ✅ 直接可用 建库前DNA片段纯化,去除接头/酶
连接转化(克隆) ✅ 直接可用 去除引物二聚体,避免假阳性克隆
体外转录 ✅ 直接可用 去除酶和盐离子,保证RNA聚合酶活性
基因探针标记 中高 ✅ 直接可用 纯化标记反应液,去除未标记核苷酸

📋 产品规格、组分与保存条件

产品货号 规格 目录价 / 促销价
YC48001-200 200T ¥500 ¥300

序号 产品组分 YC48001-200(200T)
YGP Buffer(溶胶结合缓冲液) 100 ml
YB Buffer(结合缓冲液) 120 ml
YS Buffer(溶胶缓冲液) 45 ml
PW Buffer(洗涤缓冲液) 50 ml
YEB Buffer(洗脱缓冲液) 15 ml
3 M 醋酸钠 6 ml
Pure Columns GP with Collection tubes 200 T

📦

常温运输

无需冷链,节省物流成本

🌡️

10~30℃室温保存

无需冰箱,随时取用

📅

保质期 18个月

批次稳定性好,长期可靠

⚖️ 硅基质膜法 vs 传统冻融法 vs 低熔点琼脂糖法全面对比

在凝胶DNA回收实验中,不同方法在回收率、纯度、操作便捷性方面差异显著。以下从10个维度对比三种主流方法:

对比维度 YALEPIC硅基质膜法 传统冻融法 低熔点琼脂糖法
操作时间 ✅ 15分钟 ❌ 1~2小时 ⚠️ 30~60分钟
回收率 ✅ 最高80% ❌ 30%~50% ⚠️ 50%~70%
片段范围 ✅ 100bp~20kb ⚠️ 大片段丢失严重 ❌ 小片段难回收
有毒试剂 ✅ 无酚氯仿 ⚠️ 通常需酚抽提 ❌ 需苯酚/氯仿
引物/酶去除 ✅ 彻底去除 ❌ 残留较多 ❌ 残留较多
产物纯度 ✅ OD260/230>2.0 ❌ 纯度不稳定 ❌ 纯度不稳定
操作复杂度 ✅ 简单离心操作 ❌ 反复冻融离心 ⚠️ 需控制温度
下游兼容性 ✅ 测序/连接/转录 ⚠️ 需二次纯化 ⚠️ 含琼脂糖残留
双功能(PCR+胶) ✅ 一盒两用 ❌ 仅凝胶回收 ❌ 仅凝胶回收
存储条件 ✅ 室温18个月 ❌ 需配制现用 ⚠️ 需冷藏保存

💬 常见问题快速解答(FAQ)

Q1:本试剂盒可以回收的DNA片段大小范围是多少?

A:可稳定纯化回收100bp~20kb区间的所有DNA片段,覆盖主流分子实验的全部片段规格。对于小于100bp的小片段(如引物二聚体)和大于20kb的大片段,回收效率会有所下降,建议针对特定需求选择专用试剂盒。

Q2:完成一次DNA纯化回收需要多长时间?

A:全程采用快速纯化流程,仅需15分钟即可完成结合-洗涤-洗脱全套操作。相比传统冻融法(1~2小时),效率提升4~8倍,是追求实验效率的实验室首选方案。

Q3:试剂盒是否兼容TAE和TBE两种凝胶缓冲体系?

A:完全兼容,适配所有常规浓度的TAE、TBE琼脂糖凝胶,无体系限制。无论实验室使用哪种电泳缓冲液,均可直接使用本试剂盒进行回收,无需额外调整步骤。

Q4:单根吸附柱的最大DNA吸附量是多少?

A:单吸附柱最高可吸附10μg DNA,上样量充足,满足绝大多数常规分子实验的DNA回收需求。对于起始DNA量极高的特殊样本,建议分多柱操作以避免超载。

Q5:纯化后的DNA可以直接用于测序实验吗?

A:可以。纯化后DNA纯度高、无引物/酶/盐离子残留、完整性好,可直接用于一代测序(Sanger)、二代测序(NGS文库构建)、连接转化、体外转录等各类下游分子生物学实验,无需二次纯化。本试剂盒已获多篇SCI论文引用验证(见文末参考文献)。

Q6:试剂盒的DNA回收率最高能达到多少?

A:在标准实验条件下,DNA回收率最高可达80%,远高于冻融法的30%~50%。为获得最佳回收率,建议:切胶时尽量减少紫外照射时间(避免DNA损伤),尽可能割除不含DNA的凝胶部分,并确保凝胶完全溶解后再上柱。

Q7:该试剂盒的运输和保存条件是什么?

A:支持常温运输,无需冷链物流。日常可在10~30℃室温环境下密封保存,保质期18个月。无需冰箱冷藏或冷冻,极大降低了仓储和物流成本,尤其适合采购周期较长或冷链不便的实验室。

Q8:除了凝胶回收,还能用于哪些样本的DNA纯化?

A:本试剂盒一盒两用,不仅可用于琼脂糖凝胶DNA回收,还可直接纯化PCR扩增产物、酶切反应液、DNA连接反应液、探针标记反应液及其他各类DNA粗制品。得益于一盒两用设计,实验室无需分别采购PCR纯化试剂盒和胶回收试剂盒,节省采购成本约50%。

🔬 让DNA纯化回收更简单、更高效

一盒两用 · 15分钟 · 回收率80% · 100bp~20kb广谱 · 无酚氯仿 · ¥300/200T

✍️ 作者:雅礼生物技术团队 | 国家高新技术企业

🏷️ 专业领域:核酸纯化、分子生物学试剂、DNA片段回收与纯化

🕐 更新时间:2026年7月

📖 参考文献:

  1. SOX4 Regulates Thermogenesis in Brown Adipose Tissue via Independent Complexes with EBF2 and PPARγ. Advanced Biology, 2025, e00224. (使用YALEPIC本产品)
  2. The Artemisia argyi oil reduces high-fat diet-induced obesity by enhancing thermogenesis in brown adipose tissue. npj Science of Food, 2025, 9:277. (使用YALEPIC本产品)
  3. Camel-Milk-Derived Extracellular Vesicles Mitigate High-Fat-Diet Induced Obesity. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2025, 73, 21404-21421. (使用YALEPIC本产品)
联系电话 0512-66256010
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