YALEPIC® 快速PCR产物/琼脂糖凝胶DNA纯化回收试剂盒 是雅礼生物自主研发的一款一盒两用的DNA片段纯化回收试剂盒。采用高性能硅基质膜技术,可同时满足PCR产物纯化与琼脂糖凝胶DNA回收双重需求。15分钟内完成结合-洗涤-洗脱全套流程,高效回收100bp~20kb范围内的DNA片段,有效去除引物、寡核苷酸、酶、矿物油、琼脂糖等杂质。每根吸附柱最高可吸附10μg DNA,回收率最高达80%。兼容所有常规浓度的TAE/TBE琼脂糖凝胶,纯化产物可直接用于一代/二代测序、连接转化、体外转录等下游分子实验。常温运输、10~30℃室温保存。—— YALEPIC®,雅礼生物,国家高新技术企业。
📑 本文导读
🔬 PCR产物纯化与凝胶回收——分子实验室的日常痛点
从跑胶到切胶,每一个环节都可能”丢DNA”
在分子生物学实验室里,PCR产物纯化和琼脂糖凝胶DNA回收是最频繁的两项操作——无论是基因克隆中的目的片段回收、测序前的PCR产物清洁,还是酶切验证后的片段分离,几乎每个分子实验项目都绕不开这一步。然而,看似简单的”纯化回收”,实际操作中却暗藏诸多痛点:
第一,回收率不稳定是最大痛点。不少实验室仍在使用传统的冻融法或透析袋法回收凝胶中的DNA片段,这些方法操作繁琐、耗时长(通常需要1~2小时),且回收率往往仅有30%~50%。尤其对于小于200bp的小片段和大于10kb的大片段,回收效率更是大幅下降。辛辛苦苦跑完PCR、切完胶,最后只回收回一点点DNA——这是许多研究生都有过的”血泪”经历。
第二,杂质残留直接导致下游实验失败。PCR反应体系中残留的引物、dNTP、Taq酶、矿物油,以及琼脂糖凝胶中的多糖成分,如果不彻底去除,会严重抑制后续的连接酶、限制性内切酶活性,甚至导致转化效率骤降。某课题组统计发现,克隆实验失败案例中,约40%可追溯到DNA片段纯化不彻底——引物二聚体未去除干净,竞争性连接导致假阳性克隆。
第三,一盒多用需求未被满足。实验室常规操作中,PCR产物纯化和凝胶回收往往需要两套不同的试剂盒,不仅采购成本翻倍,更换试剂盒时操作流程和缓冲液体系不一致,容易产生操作失误。能否”一盒两用”、流程统一,是提升实验室效率的关键。2025年发表于《iCourse国家精品课程论坛》的一项系统教学评估指出:柱式硅基质膜法因兼具高回收率(80%~90%)、快速(10~15分钟)、无酚氯仿三大优势,已成为高校分子生物学实验教学和科研的标准方法。
📉
冻融法回收率仅30%~50%
辛辛苦苦切胶,DNA丢了一大半
⏱️
冻融法耗时1~2小时
反复冻融、离心、转移,效率极低
🧪
引物/酶残留抑制下游
40%克隆失败源于纯化不彻底
📦
PCR纯化+胶回收需要两盒
成本翻倍,流程不一致易出错
💡 YALEPIC® 硅基质膜法如何解决?
“一盒两用,15分钟搞定——采用高性能硅基质膜技术+独特溶胶缓冲体系,
实现PCR产物纯化与凝胶DNA回收双重需求,
回收率最高80%,100bp~20kb广谱覆盖,全程无酚氯仿。”
技术原理:硅基质膜凭什么”又快又纯”?
硅基质膜法的核心在于硅胶膜在高盐低pH条件下对DNA的选择性吸附。当含有DNA的溶液通过吸附柱时,DNA片段被硅基质膜高效捕获,而引物、dNTP、酶蛋白、矿物油、琼脂糖等杂质则随流穿液排出。随后通过两次洗涤去除残留盐离子,最后用低盐高pH洗脱液将纯化DNA释放——整个过程仅需“结合-洗涤-洗脱”三步:
溶胶/结合
YGP Buffer溶胶
DNA结合硅胶膜
洗涤去杂
PW Buffer洗去
引物/酶/盐/琼脂糖
洗脱DNA
YEB Buffer洗脱
获得高纯DNA片段
下游实验
测序/连接/转化
体外转录/PCR
与传统冻融法相比,硅基质膜法的优势贯穿全过程:结合更高效(硅胶膜对DNA的吸附容量达10μg/柱,远超冻融法的物理释放极限)、纯化更彻底(两步洗涤即可去除引物/酶/盐/琼脂糖全部杂质)、操作更简便(全程离心操作,无需反复冻融和透析转移,15分钟完成)。
⭐ 五大核心优势详解
🎯 适用范围与下游实验
🧪
凝胶体系适配
兼容所有常规浓度的
TAE、TBE琼脂糖凝胶
无体系适配壁垒
🔬
样本类型适配
PCR扩增产物、酶切反应液
DNA连接反应液、探针标记反应液
各类DNA粗制品纯化提质
📏
片段规格适配
专属适配
100bp ~ 20kb DNA片段
满足基础与高端基因研究需求
🧬
下游实验适配
一代/二代测序、连接转化
基因探针标记、体外转录
载体构建、基因克隆
| 下游实验 | 对DNA纯度要求 | YALEPIC适配性 | 说明 |
|---|---|---|---|
| 一代测序(Sanger) | 高 | ✅ 直接可用 | 去除引物和dNTP,避免测序信号干扰 |
| 二代测序(NGS) | 极高 | ✅ 直接可用 | 建库前DNA片段纯化,去除接头/酶 |
| 连接转化(克隆) | 高 | ✅ 直接可用 | 去除引物二聚体,避免假阳性克隆 |
| 体外转录 | 高 | ✅ 直接可用 | 去除酶和盐离子,保证RNA聚合酶活性 |
| 基因探针标记 | 中高 | ✅ 直接可用 | 纯化标记反应液,去除未标记核苷酸 |
📋 产品规格、组分与保存条件
| 产品货号 | 规格 | 目录价 / 促销价 |
|---|---|---|
| YC48001-200 | 200T | ¥500 ¥300 |
| 序号 | 产品组分 | YC48001-200(200T) |
|---|---|---|
| ① | YGP Buffer(溶胶结合缓冲液) | 100 ml |
| ② | YB Buffer(结合缓冲液) | 120 ml |
| ③ | YS Buffer(溶胶缓冲液) | 45 ml |
| ④ | PW Buffer(洗涤缓冲液) | 50 ml |
| ⑤ | YEB Buffer(洗脱缓冲液) | 15 ml |
| ⑥ | 3 M 醋酸钠 | 6 ml |
| ⑦ | Pure Columns GP with Collection tubes | 200 T |
📦
常温运输
无需冷链,节省物流成本
🌡️
10~30℃室温保存
无需冰箱,随时取用
📅
保质期 18个月
批次稳定性好,长期可靠
⚖️ 硅基质膜法 vs 传统冻融法 vs 低熔点琼脂糖法全面对比
在凝胶DNA回收实验中,不同方法在回收率、纯度、操作便捷性方面差异显著。以下从10个维度对比三种主流方法:
| 对比维度 | YALEPIC硅基质膜法 | 传统冻融法 | 低熔点琼脂糖法 |
|---|---|---|---|
| 操作时间 | ✅ 15分钟 | ❌ 1~2小时 | ⚠️ 30~60分钟 |
| 回收率 | ✅ 最高80% | ❌ 30%~50% | ⚠️ 50%~70% |
| 片段范围 | ✅ 100bp~20kb | ⚠️ 大片段丢失严重 | ❌ 小片段难回收 |
| 有毒试剂 | ✅ 无酚氯仿 | ⚠️ 通常需酚抽提 | ❌ 需苯酚/氯仿 |
| 引物/酶去除 | ✅ 彻底去除 | ❌ 残留较多 | ❌ 残留较多 |
| 产物纯度 | ✅ OD260/230>2.0 | ❌ 纯度不稳定 | ❌ 纯度不稳定 |
| 操作复杂度 | ✅ 简单离心操作 | ❌ 反复冻融离心 | ⚠️ 需控制温度 |
| 下游兼容性 | ✅ 测序/连接/转录 | ⚠️ 需二次纯化 | ⚠️ 含琼脂糖残留 |
| 双功能(PCR+胶) | ✅ 一盒两用 | ❌ 仅凝胶回收 | ❌ 仅凝胶回收 |
| 存储条件 | ✅ 室温18个月 | ❌ 需配制现用 | ⚠️ 需冷藏保存 |
💬 常见问题快速解答(FAQ)
Q1:本试剂盒可以回收的DNA片段大小范围是多少?
A:可稳定纯化回收100bp~20kb区间的所有DNA片段,覆盖主流分子实验的全部片段规格。对于小于100bp的小片段(如引物二聚体)和大于20kb的大片段,回收效率会有所下降,建议针对特定需求选择专用试剂盒。
Q2:完成一次DNA纯化回收需要多长时间?
A:全程采用快速纯化流程,仅需15分钟即可完成结合-洗涤-洗脱全套操作。相比传统冻融法(1~2小时),效率提升4~8倍,是追求实验效率的实验室首选方案。
Q3:试剂盒是否兼容TAE和TBE两种凝胶缓冲体系?
A:完全兼容,适配所有常规浓度的TAE、TBE琼脂糖凝胶,无体系限制。无论实验室使用哪种电泳缓冲液,均可直接使用本试剂盒进行回收,无需额外调整步骤。
Q4:单根吸附柱的最大DNA吸附量是多少?
A:单吸附柱最高可吸附10μg DNA,上样量充足,满足绝大多数常规分子实验的DNA回收需求。对于起始DNA量极高的特殊样本,建议分多柱操作以避免超载。
Q5:纯化后的DNA可以直接用于测序实验吗?
A:可以。纯化后DNA纯度高、无引物/酶/盐离子残留、完整性好,可直接用于一代测序(Sanger)、二代测序(NGS文库构建)、连接转化、体外转录等各类下游分子生物学实验,无需二次纯化。本试剂盒已获多篇SCI论文引用验证(见文末参考文献)。
Q6:试剂盒的DNA回收率最高能达到多少?
A:在标准实验条件下,DNA回收率最高可达80%,远高于冻融法的30%~50%。为获得最佳回收率,建议:切胶时尽量减少紫外照射时间(避免DNA损伤),尽可能割除不含DNA的凝胶部分,并确保凝胶完全溶解后再上柱。
Q7:该试剂盒的运输和保存条件是什么?
A:支持常温运输,无需冷链物流。日常可在10~30℃室温环境下密封保存,保质期18个月。无需冰箱冷藏或冷冻,极大降低了仓储和物流成本,尤其适合采购周期较长或冷链不便的实验室。
Q8:除了凝胶回收,还能用于哪些样本的DNA纯化?
A:本试剂盒一盒两用,不仅可用于琼脂糖凝胶DNA回收,还可直接纯化PCR扩增产物、酶切反应液、DNA连接反应液、探针标记反应液及其他各类DNA粗制品。得益于一盒两用设计,实验室无需分别采购PCR纯化试剂盒和胶回收试剂盒,节省采购成本约50%。
✍️ 作者:雅礼生物技术团队 | 国家高新技术企业
🏷️ 专业领域:核酸纯化、分子生物学试剂、DNA片段回收与纯化
🕐 更新时间:2026年7月
📖 参考文献:
- SOX4 Regulates Thermogenesis in Brown Adipose Tissue via Independent Complexes with EBF2 and PPARγ. Advanced Biology, 2025, e00224. (使用YALEPIC本产品)
- The Artemisia argyi oil reduces high-fat diet-induced obesity by enhancing thermogenesis in brown adipose tissue. npj Science of Food, 2025, 9:277. (使用YALEPIC本产品)
- Camel-Milk-Derived Extracellular Vesicles Mitigate High-Fat-Diet Induced Obesity. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2025, 73, 21404-21421. (使用YALEPIC本产品)