YALEPIC® 质粒DNA提取试剂盒系列 是雅礼生物自主研发的全规格质粒提取产品线，覆盖1~5ml小提、5~15ml及30~50ml中提、100~300ml大提、100~500ml超大量提取四大规格梯度。产品线采用优化碱裂解法结合独特硅基质膜吸附技术，内置蓝黄/蓝色指示剂实现操作全程可视化，精准去除基因组DNA、RNA、杂蛋白及内毒素。其中无内毒素系列内毒素残留低至<0.1 EU/μg，可直接用于细胞转染、基因编辑（CRISPR-Cas9）、慢病毒包装及动物注射等高端实验；另有磁珠法质粒小提适配自动化高通量平台。全部组分支持常温运输、10~30℃室温保存，保质期12~18个月，是分子克隆、基因治疗载体构建、细胞转染及动物实验的理想选择。—— YALEPIC®，雅礼生物，国家高新技术企业。
📑 本文导读
🔬 质粒提取有哪些痛点？
从菌液到质粒——每一步都可能是”翻车现场”
质粒DNA提取是分子生物学实验中最基础的操作之一——基因克隆、蛋白表达、细胞转染、病毒包装，几乎每个实验都需要大量高纯度质粒。然而，看似成熟的”碱裂解法”在实际操作中困难重重，许多实验室人员都经历过以下场景：
第一，裂解不充分导致基因组DNA污染。碱裂解法依赖于精确的pH控制：NaOH+SDS裂解菌体后，必须用酸性缓冲液迅速中和，让质粒DNA快速复性而基因组DNA因分子量大无法复性而被沉淀。但操作者若裂解时间超过5分钟，质粒也会变性；若中和不均匀，基因组DNA会与质粒一起留在上清中，导致产物纯度下降。某基因治疗公司反馈：使用普通质粒提取试剂盒时，约20%~30%的批次存在基因组DNA污染，直接影响后续转染实验的成功率。
第二，内毒素残留是转染实验的”隐形杀手”。内毒素（脂多糖LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的成分，在质粒提取过程中极易残留。即使是微量内毒素，也会显著降低敏感细胞的转染效率，激活免疫细胞产生非特异性反应导致假阳性结果，甚至引发细胞凋亡。在动物实验中，内毒素更会引起发热、内毒素性休克等严重不良反应。2023年发表于《Nature Biotechnology》的一项研究指出：内毒素残留每降低一个数量级，HEK293细胞转染效率可提升15%~30%（Chen et al., 2023）。因此，用于细胞转染和动物实验的质粒必须使用无内毒素试剂盒提取。
第三，规格不匹配导致资源浪费或产量不足。分子克隆筛选只需1~5ml菌液的小提试剂盒即可满足需求，但基因治疗载体构建和动物实验往往需要100~500ml菌液的大提或超大量提取。如果用小提试剂盒分多次提取，不仅批间一致性差，还可能因吸附柱饱和导致产量远低于预期。反之，用大提试剂盒处理小量样本则会造成试剂浪费。选对规格，是质粒提取实验成功的第一步。
🧫
基因组DNA污染
20%~30%批次存在gDNA残留，影响转染成功率
☠️
内毒素残留致命
降低转染效率，激活免疫反应，动物实验发热休克
📦
规格不匹配
小提做大量=批间差大，大提做小量=试剂浪费
🎨
操作不可视
无法判断裂解中和是否完全，新手靠”手感”操作
💡 YALEPIC® 质粒提取技术原理
“碱裂解 + 硅膜吸附 + 蓝色指示剂”——
三重技术融合，让质粒提取又快又准又安全，
全程可视化，新手也能一次成功。
碱裂解法凭什么仍是”黄金标准”？
质粒提取的核心原理是利用pH变化选择性分离质粒DNA与基因组DNA。碱裂解法自1979年由Birnboim和Doly发明以来，至今仍是实验室最常用的质粒提取方法。其关键在于三个步骤的精确控制：
菌体重悬
PA Buffer重悬菌体
含RNase A去RNA
碱裂解
PB Buffer(蓝色)裂解
溶液变蓝=裂解完全
中和沉淀
ER/PM2 Buffer中和
蓝色消失=中和完全
硅膜结合
YS Buffer条件下
质粒DNA结合硅膜
洗脱回收
YEB Buffer洗脱
获得高纯质粒DNA
YALEPIC® 试剂盒在经典碱裂解法基础上做了三大关键优化：第一，在裂解液（PB Buffer）和中和液中预混蓝黄/蓝色指示剂——裂解时溶液由浑浊变蓝色表示裂解完全，中和时蓝色消失表示中和到位，新手也能直观判断每一步操作是否成功；第二，采用进口特制硅基质膜，在高盐低pH环境下高效特异性结合质粒DNA，载量高达单柱45μg（小提）至3mg（大提）； 第三，无内毒素系列配有专用内毒素去除Buffer，在柱上去除内毒素，残留低至<0.1 EU/μg，达到转染级标准。
⭐ 六大核心优势详解
📋 全规格产品选型指南（11款产品一览）
YALEPIC® 质粒提取系列按菌液量分为小提（1~5ml）、中提（5~50ml）、大提（100~300ml）、超大量（100~500ml）四个规格梯度；按纯度等级分为超纯（常规分子生物学）和无内毒素（转染级）两大类；另有磁珠法小提适配自动化平台：
| 产品名称 | 货号 | 菌液量 | 内毒素 |
|---|---|---|---|
| ⭐ 超纯质粒小提（1-5ml） | YC47002-200 | 1~5ml | — |
| 无内毒素质粒小提（1-5ml） | YC47004 | 1~5ml | <1 EU/μg |
| 超纯质粒中提（1-15ml） | YC47006 | 1~15ml | — |
| ⭐ 无内毒素质粒中提（5-15ml） | YC47007 | 5~15ml | <1 EU/μg |
| 无内毒素质粒中提（30-50ml） | YC47008 | 30~50ml | <1 EU/μg |
| 超纯质粒大提（100-300ml） | YC47010-10 | 100~300ml | — |
| ⭐ 无内毒素质粒大提（100-300ml） | YC47013-10 | 100~300ml | <1 EU/μg（45min） |
| ⭐ 无内毒素质粒大提PLUS（100-300ml） | YC47015-10 | 100~300ml | <0.1 EU/μg |
| 🧲 磁珠法质粒小提 | YM49003 | 1~5ml | — |
| ⭐ 无内毒素质粒超大量（100-500ml） | YC47017-10 | 100~500ml | <1 EU/μg |
| ⭐ 无内毒素质粒超大量PLUS（100-500ml） | YC47018-10 | 100~500ml | <0.1 EU/μg |
⭐ 热销推荐。价格为参考目录价，批量询价请联系官网。PLUS版采用新型内毒素去除液YEB，残留更低。
🧪
分子克隆 / 测序 / PCR
超纯质粒小提（YC47002）
1~5ml，¥450/200T，性价比最高
🔬
细胞转染 / CRISPR
无内毒素大提（YC47013）
100~300ml，¥650/10T，转染级
💉
动物实验 / 基因治疗
无内毒素大提PLUS（YC47015）
<0.1 EU/μg，超低内毒素
🤖
高通量自动化
磁珠法质粒小提（YM49003）
适配自动化工作站96孔板
🤔 超纯 vs 无内毒素：什么时候必须选无内毒素？
这是实验室最常见的问题。超纯试剂盒已去除蛋白、RNA、基因组DNA等杂质，但不去除内毒素；无内毒素试剂盒在超纯基础上额外去除内毒素，残留<1 EU/μg（普通版）或<0.1 EU/μg（PLUS版）。
| 对比维度 | 超纯系列 | 无内毒素系列 |
|---|---|---|
| 内毒素残留 | 未专门去除 | <1（普通）/ <0.1 EU/μg（PLUS） |
| 适用下游实验 | 酶切、PCR、测序、转化 | 上述全部 + 细胞转染、动物实验 |
| 细胞转染 | ❌ 不推荐 | ✅ 推荐 |
| 动物体内注射 | ❌ 禁止 | ✅ 必须（建议PLUS版） |
| 价格 | 较低 | 略高（多内毒素去除步骤） |
| 选择建议 | 日常分子克隆、质粒鉴定 | 细胞转染、基因治疗、动物实验 |
💡 一句话总结：如果只做酶切、PCR、测序等体外分子生物学实验，选超纯系列；若涉及细胞转染、CRISPR编辑、病毒包装、动物注射等体内实验，必须选无内毒素系列（动物实验建议PLUS版，内毒素<0.1 EU/μg）。
⚖️ 硅膜柱式法 vs 磁珠法 vs 传统酚氯仿法
| 对比维度 | YALEPIC® 柱式法 | YALEPIC® 磁珠法 | 传统酚氯仿法 |
|---|---|---|---|
| 原理 | 碱裂解+硅膜吸附 | 碱裂解+磁珠结合 | 酚氯仿萃取+乙醇沉淀 |
| 耗时 | 20~50min | ~30min | 2~3h |
| 纯度 (OD260/280) | ✅ 1.8~2.0 | ✅ 1.8~2.0 | ⚠️ 1.6~1.9 |
| 有毒试剂 | ✅ 无 | ✅ 无 | ❌ 苯酚/氯仿 |
| 可视化指示剂 | ✅ 蓝黄/蓝色 | ❌ 无 | ❌ 无 |
| 自动化适配 | ⚠️ 需离心 | ✅ 完美适配 | ❌ 无法自动化 |
| 内毒素去除 | ✅ 可柱上去除 | ⚠️ 需额外步骤 | ❌ 无法去除 |
| 通量 | 低~中 | 中~高（96孔板） | 低 |
| 单次成本 | 低（¥2.25/次起） | 中 | 最低（试剂自配） |
| 批间一致性 | ✅ 高 | ✅ 高 | ❌ 低（CV 15%~25%） |
❓ 常见问题快速解答（FAQ）
Q1：小提、中提、大提怎么选？菌液量多少合适？
按下游实验需求选择：日常克隆/PCR/测序选小提（1~5ml），产量最高45μg足够；中量制备选中提（5~50ml）；细胞转染/病毒包装选大提（100~300ml），产量2~3mg；基因治疗动物实验选超大量（100~500ml）。低拷贝质粒建议适当增加菌液量。
Q2：什么时候必须用无内毒素试剂盒？
涉及细胞转染（HEK293/CHO/HeLa等）、CRISPR基因编辑、慢病毒/AAV包装、动物体内注射等体内实验时，必须使用无内毒素质粒。内毒素会降低转染效率、激活免疫反应、引发细胞凋亡和动物发热休克。仅做酶切/PCR/测序等体外实验可用超纯系列。
Q3：普通无内毒素版和PLUS版有什么区别？
普通无内毒素版内毒素残留<1 EU/μg，满足大多数细胞转染需求；PLUS版采用新型内毒素去除液YEB，残留低至<0.1 EU/μg，适合对内毒素极度敏感的细胞系（如原代细胞、干细胞）和动物体内注射实验。
Q4：蓝黄指示剂怎么看？颜色异常怎么办？
小提试剂盒：裂解时溶液变蓝=裂解完全；中和后蓝色消失变黄=中和到位。大提试剂盒：裂解时变蓝，中和后蓝色消失。若裂解液不变蓝，可能菌液过量或缓冲液pH异常，建议减少菌液量并确保缓冲液无沉淀（如有沉淀37℃水浴溶解）。
Q5：质粒产量低怎么办？
常见原因：①细菌培养时间过长（>16h）导致质粒丢失——建议12~16h收集；②菌液OD600过低——确保OD600达2.0~4.0；③低拷贝质粒——增加菌液量并按比例扩大试剂用量；④裂解不充分——确保裂解时间≥3min但≤5min，充分混匀无菌块；⑤洗脱温度低——使用60℃预热Elution Buffer可提高得率。
Q6：可以提取大质粒（>10kb）或BAC/PAC吗？
<20kb的质粒提取效果最佳。对于>10kb的大质粒，建议增加菌液量（5~10ml），延长吸附和洗脱时间，使用60℃预热洗脱液，避免剧烈震荡防止断裂。对于BAC/PAC（>20kb），硅胶膜吸附效率下降且可能造成剪切损伤，建议选用专用大质粒提取试剂盒。
Q7：转染后细胞死亡率高，是质粒纯度问题吗？
可能原因：①内毒素残留超标（最常见）——请使用无内毒素试剂盒；②质粒中残留乙醇——确保最后一次洗涤后空甩5min去除乙醇；③OD260/280偏离1.8~2.0——重新提取；④转染试剂本身毒性。建议先检测内毒素水平和OD比值。
Q8：试剂盒常温保存有效期多久？RNase A怎么处理？
全部组分10~30℃常温保存，未开封保质期12~18个月。RNase A需加入Buffer PA中混匀，加入后2~8℃保存，6个月内用完。若室温常超30℃，建议RNase A单独4℃保存。Buffer PB如有沉淀，37℃水浴溶解后使用，不影响效果。
🧬 选对质粒提取试剂盒，实验事半功倍
YALEPIC® 11款质粒提取产品全规格覆盖，从1ml小提到500ml超大量，从超纯到无内毒素转染级
蓝黄指示剂可视化操作，常温储运，性价比远超进口品牌
热销产品：超纯小提 YC47002-200｜ 无内毒素大提 YC47013-10｜ 磁珠法小提 YM49003
作者：雅礼生物技术团队 | 专业领域：分子生物学试剂研发 | 更新时间：2026年7月
制造商：雅礼（江苏）生物科技有限公司 | 资质：国家高新技术企业
