YALEPIC^® 超纯质粒DNA小量提取试剂盒（1-5ml）

YALEPIC^®超纯质粒 DNA 小量提取试剂盒（1-5ml）采用优化碱裂解法结合独特硅基质膜离心吸附柱技术，在高盐低 pH 环境下高效特异性结合质粒 DNA，精准分离并去除基因组 DNA、RNA、杂蛋白等干扰杂质。试剂盒内置蓝黄预混指示剂，可通过溶液颜色变化直观判断细胞裂解、中和反应是否完全，实现可视化操作，大幅降低实验失误率。提取质粒最高产量可达 45μg，纯度达标无杂质污染，可直接应用于酶切鉴定、基因测序、PCR 扩增、体外转录等高要求分子生物学实验。

• 超高产量：质粒 DNA 单份提取产量最高可达 45μg，满足高浓度质粒实验需求
• 超高纯度：杂质去除彻底，无基因组 DNA 与 RNA 残留，适配细胞转染等高精密实验
• 高效便捷：无需冷热交替处理，全程 20-30 分钟完成提取，简化实验流程
• 可视化操作：标配蓝黄指示剂预混试剂，颜色变化判定裂解中和效果，新手易上手
• 菌种通用：原生适配革兰氏阴性菌，破壁处理后可用于革兰氏阳性菌质粒提取
• 兼容性强：适配高拷贝、低拷贝多种质粒，无需更换试剂盒，通用性拉满

• 推荐菌液量：1～5 mL过夜培养菌液（LB培养基或等效培养基）；

• 低拷贝质粒优化：建议菌液量提升至≤10 mL，需按比例扩大PA、PB、PM2 Buffer试剂用量；

• 适用宿主菌类型：大肠杆菌DH5α、TOP10、JM109等革兰氏阴性菌，以及经破壁处理的革兰氏阳性菌；

• 应用场景：基因克隆筛选、质粒图谱验证、PCR模板制备、DNA测序文库构建、基因合成筛选、转染级质粒预提取等。

常温运输；10 ~ 30℃ 室温保存。

Q1：YALEPIC超纯质粒DNA小量提取试剂盒适用于哪些菌液量？低拷贝质粒如何处理？
A1：本试剂盒常规推荐使用1～5 mL过夜培养菌液。若为低拷贝质粒，可适当提升菌液量至≤10 mL，并严格按比例扩大PA、PB、PM2 Buffer试剂用量，保证裂解、中和、结合环节完全充分，提高产量。

Q2：质粒DNA产量低的主要原因有哪些？如何解决？
A：常见原因包括细菌老化、菌液生长过度、裂解不充分或吸附/洗脱时间不足。建议：重新挑选新鲜单菌落过夜培养（12～16小时最佳），严格控制裂解时间不超过5分钟，延长吸附或洗脱时间；使用前将Elution Buffer加热至60℃有助于提高洗脱率。低拷贝质粒建议适当增加菌液量并延长结合时间。

Q3：提取过程中颜色指示剂的作用是什么？裂解液或中和液颜色异常怎么办？
A3：本试剂盒预混蓝黄指示剂：裂解液正常呈蓝色，若变为黄绿色或黄色，通常提示缓冲体系pH异常或添加样本过量，应减少菌液量并确保各缓冲液新鲜无沉淀（如遇沉淀需37℃水浴溶解后使用）。中和后若混合液未完全变澄清，应检查中和是否充分或再次混匀后离心。

Q4：革兰氏阳性菌可否使用本试剂盒提取质粒？需要注意什么？
A5：可以。革兰氏阳性菌需进行破壁预处理（如溶菌酶处理），破壁后再按照本试剂盒的标准操作流程（碱裂解法+吸附柱纯化）进行提取。

Q5：提取大质粒（>10 kb）时需要注意哪些步骤？
A6：对于>10 kb的大质粒，建议使用5～10 mL菌液量，严格按比例增加PA/PB/PM2 Buffer用量，吸附和洗脱步骤可适当延长反应时间，使用60℃预热Elution Buffer，避免剧烈震荡以防大质粒断裂。–

Q6：试剂盒应如何保存？常温下稳定性如何？
A：本试剂盒常温运输（10～30℃）。室温保存。溶液PB使用前如出现沉淀，请于37℃水浴溶解并充分混匀。未开封试剂盒保质期为12个月。

Q7：提取产量最高能达到多少？能提取高拷贝/低拷贝质粒吗？
A：最高产量可达45μg质粒DNA（高拷贝质粒，5mL菌液）。高拷贝/低拷贝质粒均适用，低拷贝质粒可按增加菌液量并扩大试剂用量，以实现最佳提取效率。

Q8：提取过程中离心柱堵塞怎么办？
A：离心柱堵塞通常由裂解不充分或菌液量过大引起。建议：裂解时使用振荡器充分振荡混匀，避免菌块残留；严格按1-5mL推荐菌液量操作，避免过量；离心时确保离心力≥12000×g。

Q9：本试剂盒提取的质粒纯度和得率与同类品牌相比如何？
A：YALEPIC^®超纯质粒DNA小量提取试剂盒采用进口特制硅基质膜与优化的高兼容性碱裂解缓冲系统，产量高达45μg，纯度A260/A280达1.8～2.0，搭配蓝黄指示剂可视化操作，提取效率和纯度可满足分子克隆、测序、转染等下游应用，且性价比显著优于同类进口品牌及合资品牌质粒提取产品。

Q10：洗脱后的质粒DNA应如何保存？能保存多久？
A：洗脱的质粒DNA短期（1周内）可于-20℃保存；长期保存建议-80℃分装避免反复冻融。使用无菌无核酸酶的ddH₂O或Elution Buffer洗脱，可提高保存稳定性。

Q11：试剂盒是否包含RNase A？如何正确使用？
A：本试剂盒提供RNase A。使用前将RNase A全部加入Buffer PA中，混匀后分装保存于2～8℃。注意避免RNase污染，操作过程中使用无RNase耗材可进一步提高提取质量。