YALEPIC^® 无内毒素质粒DNA中量提取试剂盒（5-15ml）

YALEPIC^®无内毒素质粒 DNA 中量提取试剂盒（5~15ml）基于经典碱裂解法实现菌体细胞裂解，搭配进口新型硅基质吸附膜，可特异性结合质粒 DNA，高效分离去除基因组 DNA、RNA、杂蛋白等杂质，大幅提升质粒纯度。试剂体系内置专属蓝指示剂，可通过溶液颜色变化直观判断裂解、中和反应是否完全，实现提取操作可视化，从源头保障质粒提取成功率与品质。采用进口特制吸附膜 + 专业除内毒素溶液体系，制备质粒内毒素残留极低、质量稳定可控。提取产物可满足高要求细胞转染实验，同时兼容酶切鉴定、基因测序、PCR 扩增、体外转录等各类下游分子生物学实验，适配高校实验室、生物药企、科研院所常规及高精尖科研场景。

• 高产高纯度：质粒 DNA 提取产量可达 100μg，硅基质膜特异性吸附，有效去除各类杂质，纯度满足多场景实验需求。
• 超低内毒素残留：专业过滤去内毒素工艺，内毒素残留≤1EU/μg，适配敏感细胞转染等高端实验。
• 快速简便省时：简化实验步骤，全程仅需 25 分钟即可完成提取，无需复杂操作流程。
• 可视化易操作：配备蓝指示剂独立组分，通过颜色变化判断反应进程，新手也可轻松上手。
• 通用性强适配广：工艺成熟稳定，提取质粒可通用于转染、酶切、测序、PCR、体外转录等所有下游实验。

• 适配样本：5~15ml 大肠杆菌过夜培养菌液
• 应用场景：细胞转染、质粒酶切、基因测序、PCR 扩增、体外转录、载体构建等分子生物学实验

常温运输；10 ~ 30℃ 室温保存。

Q1：YALEPIC无内毒素质粒中量提取试剂盒适用于多少毫升的菌液？

A：本试剂盒标准适用于5~15ml过夜培养的大肠杆菌菌液。对于高拷贝质粒，5ml菌液即可满足100μg的产量需求；如为低拷贝质粒或质粒骨架较大（>10kb），建议取用10~15ml菌液以获得更理想的产量。

Q2：本试剂盒提取的质粒DNA内毒素残留量是多少？能否用于细胞转染？

A：本试剂盒提取的质粒DNA内毒素残留量≤1EU/μg，达到转染级质粒标准。该低内毒素水平完全满足HEK293、CHO、HeLa等多种常见细胞系的转染实验需求，可适配Lipofectamine 3000、PEI、YALEPIC LFDR系列等多种转染试剂，显著降低内毒素对转染效率和细胞活性的负面影响。

Q3：整个提取流程需要多长时间？

A：从菌液收集到获得纯化质粒DNA，整个操作流程约需25分钟。优化的操作步骤和高效的吸附膜体系大幅缩短了传统质粒提取的时间成本，同时可视化蓝指示剂帮助用户快速判断裂解和中和是否完成，进一步减少操作等待和反复验证时间。

Q4：蓝指示剂的作用是什么？是否需要单独准备？

A：蓝指示剂是本试剂盒的预混组分。其主要功能是通过颜色变化直观指示裂解和中和步骤是否完成——裂解充分时溶液呈蓝色，中和完全后蓝色褪去或变为无色/浅色。这一设计有效避免了因裂解不足或中和过度导致的质粒得率下降和纯度问题，特别适合新手用户或高通量操作场景。

Q5：提取的质粒DNA可以用于哪些下游实验？

A：本试剂盒提取的质粒DNA内毒素残留极低、盐分残留少，可完美兼容以下下游实验：

• 细胞转染（推荐，适用多种内毒素敏感细胞系）
• 限制性内切酶酶切
• PCR扩增及qPCR定量
• Sanger测序及二代测序文库构建
• 体外转录（如mRNA合成模板）
• 感受态细胞转化
• 连接与克隆

Q6：本试剂盒采用什么原理去除内毒素？

A：本试剂盒采用双效内毒素去除机制：首先通过菌体裂解后的过滤柱物理去除大分子内毒素复合物，再配合特制的除内毒素溶液体系进行化学清除。硅基质膜在特异性结合质粒DNA的同时，有效排除内毒素、蛋白和基因组DNA等杂质，最终获得高纯度无内毒素质粒DNA。

Q7：低拷贝质粒或大质粒（>10kb）能否使用本试剂盒提取？

A：可以，但建议适当增加菌液用量。对于低拷贝质粒（如pACYC、pSC101等骨架）或大于10kb的大质粒，推荐使用10~15ml过夜培养菌液。同时可适当延长裂解时间（约1-2分钟）以确保细胞完全裂解。洗脱时可使用预热至65℃的Elution Buffer，有助于提高大质粒的洗脱效率。

Q8：本试剂盒与同类型无内毒素质粒中提试剂盒相比有何优势？

A：相比进口品牌，YALEPIC试剂盒以同品质的性能提供更具性价比的价格方案。与国内品牌相比，本试剂盒在相同的5-15ml菌液处理量下提供同等产量（100μg）和内毒素标准（≤1EU/μg），同时蓝指示剂可视化设计是核心差异化亮点。本土化生产和快速物流响应也为国内用户带来更高的服务效率。

Q9：试剂盒的保存和运输条件是什么？有效期多久？

A：本试剂盒支持常温运输（10~30℃），到货后可直接室温保存，无需冷藏。所有组分请勿冷冻，冷冻可能导致试剂性能下降。产品有效期为12个月（具体以产品标签标注为准）。建议在有效期内使用，开封后按说明妥善保存。

Q10：如果提取的质粒DNA出现内毒素偏高或产量不足，可能是什么原因？如何解决？

A：常见原因及解决方案如下：

• 内毒素偏高：裂解后中和不充分，加入Buffer后未混匀至无局部阴影状态- 建议充分颠倒混匀，确保中和完全后再进行过滤
• 产量不足：菌液量不足或细菌生长状态不佳 → 建议使用新鲜过夜培养的菌液，OD600建议在2.0-4.0之间
• 纯度不佳：漂洗步骤不充分 → 按说明书漂洗2次，确保漂洗液完全流干后再洗脱
• 大质粒难洗脱：洗脱液预热至65℃后使用，可显著提高洗脱效率