YALEPIC^® 通用型高灵敏qPCR预混液UDG（染料法）

YALEPIC^® Universal SYBR Green qPCR MasterMix (UDG)是雅礼生物基于SYBR Green Ⅰ染料法开发的2×浓度通用型实时荧光定量PCR预混液。核心采用新型抗体修饰热启动DNA聚合酶，搭配专为低拷贝模板优化的缓冲液体系，可有效抑制非特异性扩增，显著提升qPCR扩增效率与检测灵敏度，尤其适用于高GC含量模板的定量扩增。

产品内置热敏性UDG酶与dUTP组成的防污染系统，可在反应前降解含dU的PCR扩增产物，从源头杜绝气溶胶交叉污染风险。预混液中含通用型ROX Reference Dye，兼容ABI、Bio-Rad、Roche、Eppendorf、Agilent等全品牌qPCR仪器，支持标准程序与快速程序两种定量模式。

使用时仅需加入模板DNA、上下游引物与ddH₂O，稀释至1×工作浓度即可上机反应，操作简便，重复性优异。

1. 抗体法热启动技术，特异性更优：采用新型抗体修饰热启动聚合酶，低温下完全封闭酶活，98%抑制非特异性扩增与引物二聚体形成，即便在多重反应或高GC含量体系中依然保持数据准确性。
2. 专利UDG/dUTP双重防污染系统：热敏UDG酶（Uracil-DNA Glycosylase）在室温反应设置阶段即开始清除含dU的PCR残留产物，PCR热循环中快速失活，不影响反应灵敏度和效率。显著降低气溶胶污染导致的假阳性风险。
3. 全能通用型ROX染料：预混通用ROX参比染料，解决各品牌qPCR仪ROX校正需求差异问题，用户无需单独购买或调整ROX浓度，降低操作复杂度。
4. 高灵敏度低拷贝检测：配合优化的低拷贝模板缓冲液，对<10个拷贝的痕量基因依然保持稳定可靠的Ct值，数据重现性好。
5. 快速程序兼容：兼容标准PCR与快速PCR程序，帮助研究者在30分钟内完成定量分析，大幅提升实验通量。

• 基因表达差异分析（相对/绝对定量）
• SNP分型与等位基因鉴定
• 药物靶点验证、生物标记物筛选
• 疾病相关基因突变检测与临床科研
• 高GC含量复杂模板的精准定量
• 高灵敏度低拷贝基因检测

-20℃ 避光保存，＜ 0℃ 运输。

Q1：什么是qPCR预混液中的UDG防污染技术？为何重要？

A：UDG（Uracil-DNA Glycosylase）防污染系统通过用dUTP替代传统dTTP掺入DNA中。PCR前，热敏UDG酶室温水解含尿嘧啶的污染DNA，使其不能被扩增，PCR热循环时UDG失活，不影响后续反应。这一技术有效避免实验室气溶胶污染导致的假阳性，尤其适合临床检测与高灵敏度基因定量研究。

Q2：抗体修饰热启动DNA聚合酶与化学修饰热启动酶相比有何优势？

A：抗体修饰热启动酶在室温下通过抗体物理封闭Taq酶活性基团；升温至热启动温度后（通常>95℃）抗原抗体复合物变性释放酶活。相比化学修饰，抗体法热启动激活速度更快、残余活性更低、非特异性扩增抑制效果更强，尤其适合低拷贝模板的高灵敏度检测。

Q3：高GC含量模板扩增困难时有何优化建议？

A：高GC模板易形成二级结构，本产品缓冲液已针对高GC体系优化。如扩增效果仍不理想，建议：1）优化退火温度（提高3-5℃）；2）添加终浓度5-10% DMSO或甜菜碱辅助解链；3）确保模板充分变性（95℃初始变性延长至5-10分钟）。

Q4：如何确定反应体系的最佳引物浓度？

A：建议每条引物终浓度从0.2μM起始测试，可在0.1-0.5μM范围内优化。如出现非特异性扩增或引物二聚体（熔解曲线杂峰），可尝试降低引物浓度至0.1-0.15μM；如扩增效率偏低，可在0.2-0.4μM梯度测试。

Q5：如何排除qPCR扩增曲线异常（S型不良、低ROX信号或无Ct值）？

A：检查以下几点：①模板浓度过高或过低（cDNA模板建议1-10ng/反应，基因组DNA 10-100ng/反应）；②引物设计避免3’端连续GC；③确认ROX参比染料类型匹配仪器（本产品通用型ROX适配所有机型）；④检查扩增体系是否完全混匀，SYBR GreenⅠ染料忌剧烈震荡产生气泡；⑤试剂解冻后沉淀完全溶解混匀。

Q6：试剂解冻后出现沉淀如何处理？

A：本产品在低温或冻存后可能出现白色沉淀，为SYBR GreenⅠ染料与缓冲液盐分的正常析出现象。室温避光放置3-5分钟，轻缓颠倒混匀（切勿涡旋剧烈震荡），直至沉淀完全溶解。不影响试剂性能。

Q7：哪些qPCR机型与本产品兼容？

A：本产品含预混通用型ROX参比染料，兼容所有主流qPCR仪：ABI（7500/7500 Fast/ViiA7/QuantStudio系列）、Bio-Rad（CFX96/CFX Connect等）、Roche LightCycler系列、Agilent Mx系列、耶拿等品牌。无需额外购买ROX，大大简化实验流程。

Q8：该试剂盒是否支持一步法RT-qPCR？

A：本产品为SYBR Green染料法qPCR预混液，不含逆转录酶组分。如需一步法qPCR，建议搭配雅礼生物逆转录试剂盒使用，或者选择雅礼生物一步法qPCR预混液系列产品。YALEPIC^® U+ One Step qRT-PCR Probe MasterMix  CAT#YPQ42003

Q9：如何选择雅礼生物的qPCR预混液体系（染料法vs探针法）？

A：如需基因表达差异分析、引物筛选等快速定量，推荐本款SYBR Green法（通用型高灵敏）；如需多重检测、绝对定量或临床级高特异性检测，推荐雅礼生物探针法qPCR预混液系列产品CAT#YQ32032。

Q10：该产品是否提供试用装？如何申请？

A：雅礼生物为新客户提供YALEPIC^® qPCR预混液全系列试用装申请。可通过官网客服400电话（0512-66256010）或邮件info@yalibiotech.com联系申请，提交研究方向及预计使用量即可获得免费样品。