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人血禽血通用·1小时免酚氯仿:YALEPIC 血液基因组DNA提取试剂盒

发布时间:2026-07-28

🩸 从人血到鸟血·1小时免酚氯仿:YALEPIC® 血液基因组DNA提取,基因组+线粒体+病毒DNA一步回收

雅礼生物 YALEPIC · 国家高新技术企业 · 硅胶膜离心柱法 · 货号 YC22004 · ¥300/50T

血液基因组DNA提取试剂盒是指利用硅胶膜离心柱纯化技术,从0.1~1ml新鲜或冷冻抗凝全血、血浆、血清等样本中快速分离高纯度基因组DNA(gDNA)、线粒体DNA(mtDNA)及病毒DNA的专用试剂组合。YALEPIC® YC22004 采用专用硅胶膜吸附技术,全程无苯酚/氯仿,1小时内完成提取(手动操作<20分钟),同时兼容禽类、鸟类、两栖类有核红细胞等特殊样本,是临床分子诊断、遗传筛查、法医DNA分型、兽医病原检测及基础科研的优选方案。

🔬 血样DNA提取的四大痛点

☠️

酚氯仿毒性大

传统酚氯仿抽提法需接触有毒有机溶剂,长期操作损伤呼吸道和神经系统,废液处理成本高,实验室安全隐患突出。

流程冗长耗时

传统方法裂解→酚抽→氯仿抽→异丙醇沉淀→乙醇洗涤,全程3~5小时,操作步骤多、转移次数多,DNA损耗大。

🩸

血红蛋白残留

血液中丰富的血红蛋白和血红素是强PCR抑制剂,去除不彻底会直接导致扩增失败、Ct值漂移或假阴性结果。

🐔

有核红细胞难提

禽类、鸟类、两栖类血液含成熟有核红细胞,常规人血试剂盒裂解不完全,DNA产率极低,需专用裂解体系适配。

⚙️ 硅胶膜离心柱法:四步完成提取

YALEPIC® 血液基因组DNA小量提取试剂盒基于硅胶膜可逆吸附原理:在高离液盐条件下,DNA选择性结合于硅胶膜表面,蛋白质、脂类、色素等杂质穿膜去除;经两次洗涤后,低盐洗脱液将纯净DNA从膜上释放。全程无需酚氯仿,操作仅四步:

1

裂解消化

血液样本+RCL Buffer+蛋白酶K,56℃孵育10分钟,彻底裂解细胞膜、消化蛋白质,释放基因组DNA。

2

结合吸附

加入YR Buffer(含离液盐),转移至Pure Columns YM硅胶膜柱,离心使DNA选择性吸附于膜上。

3

洗涤去杂

Wash Buffer GA和GB依次洗涤,去除血红蛋白、盐离子、脂质等PCR抑制物,空离心干燥膜1分钟。

4

洗脱收集

加YGE Buffer(50-200μl)于膜中央,室温孵育1-5分钟后离心,收集高纯度基因组DNA溶液。

💡 技术亮点:专用硅胶膜对核酸的吸附力远超普通滤膜,洗脱回收率>85%;裂解体系优化了离液盐浓度和pH,同时兼容人源无核红细胞和禽源有核红细胞,一盒通吃人血+禽血+两栖类血液

✅ 六大核心优势

⏱️

1小时全流程·手动<20分钟

裂解10min+结合2min+洗涤4min+洗脱5min,全程不足1小时,手动操作时间<20分钟,日处理量可达50+样本。

🚫

全程无苯酚/氯仿

摒弃传统有机溶剂抽提,无毒无害,废液可直接排入下水道,无需专用通风橱和危废处理,实验室安全等级大幅提升。

🐔

兼容有核红细胞

独创裂解体系可高效裂解禽类、鸟类、两栖类成熟有核红细胞,5~20μl禽血即可获得高质量DNA,填补市场空白。

🧬

三重DNA一步回收

同一流程同时富集基因组DNA、线粒体DNA和病毒DNA,一份血样即可满足遗传分析、线粒体病研究和病原检测多重需求。

📊

高纯度·高得率

OD260/280稳定在1.7~1.9,200μl人全血可提取3~6μg DNA,无血红蛋白残留,直接上PCR/qPCR/NGS无需额外纯化。

📦

室温保存·免冷链

10~30℃室温保存,常温运输,保质期内无需-20℃储存,实验室备货便捷,野外采样现场提取也成为可能。

🎯 应用场景全景:从临床诊断到禽类研究

血液是临床和科研中最易获取的体液样本之一,从中提取的基因组DNA广泛应用于以下六大方向。YALEPIC® YC22004 凭借广谱样本兼容性和高纯度产出,可在同一平台上覆盖多领域需求:

🏥

临床分子诊断

从EDTA抗凝全血提取DNA,用于SNP基因分型HLA配型药物代谢酶多态性检测(如CYP2C19、CYP2D6)、遗传病筛查(如地中海贫血、苯丙酮尿症基因检测)。高纯度DNA确保qPCR扩增效率稳定,Ct值重复性好。

→ 适配:PCR / qPCR / 多重PCR / ARMS-PCR

🦠

病原核酸检测

血液中游离的病毒DNA(如HBV、EBV、CMV、B19)可被同步富集。提取后直接用于病毒载量定量耐药突变检测脓毒症病原体NGS检测。一步回收gDNA+病毒DNA,无需额外购买病毒DNA提取试剂盒。

→ 适配:qPCR / 数字PCR / 宏基因组NGS

🔬

肿瘤液体活检

从外周血中提取白细胞基因组DNA作为胚系对照,同时富集ctDNA进行体细胞突变分析。高纯度DNA保障靶向测序文库构建质量,低起始量样本(100μl)亦可获得有效DNA产出。

→ 适配:靶向面板测序 / 全外显子测序

⚖️

法医DNA分型

从血痕、血凝块、陈旧血样中提取DNA,用于STR分型亲子鉴定个体识别。试剂盒兼容EDTA/肝素/枸橼酸钠多种抗凝剂,冻存血样经缓慢解冻后仍可获得完整大片段DNA,满足法医STR扩增的片段完整性要求。

→ 适配:STR复合扩增 / 毛细管电泳

🐔

禽类/兽医研究

禽类、鸟类、爬行类、两栖类血液含成熟有核红细胞,常规人血试剂盒裂解不完全。YALEPIC® 专用裂解体系5~20μl禽血即可高效提取,适用于家禽品种鉴定禽病原检测(如禽流感)、保护遗传学研究

→ 适配:PCR / qPCR / 微卫星标记 / SSR

🧪

基础科研与建库

提取的基因组DNA可直接用于限制性酶切Southern印迹杂交基因文库构建甲基化分析(MS-PCR/Bisulfite测序)、线粒体DNA全测序等。DNA片段完整(>30kb),满足酶切和建库对大片段的需求。

→ 适配:酶切 / Southern blot / NGS建库 / 亚硫酸盐测序

📋 典型样本类型与推荐用量

样本类型 推荐用量 典型DNA产量 下游应用建议
人EDTA抗凝全血 200μl 3~6μg PCR/qPCR/SNP分型/HLA
人冷冻全血 200~300μl 2~5μg STR分型/遗传筛查
血浆/血清 200μl~1ml 0.1~2μg 病毒DNA检测/ctDNA
血沉棕黄层(白膜层) 200μl 5~10μg NGS建库/全外显子测序
禽类/鸟类抗凝全血 5~20μl 2~8μg 品种鉴定/禽病原检测/SSR
两栖类抗凝全血 5~20μl 1~5μg 保护遗传学/线粒体分析
1×10⁷白细胞 200μl悬液 5~10μg 甲基化分析/酶切/Southern

📦 产品规格与组分明细

序号 组分名称 YC22004 (50T) 说明
RCL Buffer 25 ml 红细胞裂解液,去除无核红细胞
YR Buffer 15 ml 结合液,含离液盐促进DNA膜吸附
YG Buffer 15 ml 裂解结合缓冲液(高离液盐体系)
Wash Buffer GA 13 ml 洗涤液A(去蛋白、去脂质)
Wash Buffer GB 16 ml 洗涤液B(去盐、去色素)
YGE Buffer 15 ml 低盐洗脱液(TE体系),pH稳定
Proteinase K 1.2 ml 蛋白酶K,56℃消化蛋白质
Pure Columns YM + 收集管 50 T 高吸附硅胶膜离心柱

💾 保存条件:10~30℃室温保存,常温运输。

⏳ 保质期:未开封室温保存1年以上,蛋白酶K长期储存建议分装置-20℃。

💰 目录价:¥300.00 / 50T,雅礼生物YALEPIC品牌,国家高新技术企业。

⚖️ 柱式法 vs 酚氯仿法 vs 磁珠法:血液DNA提取方案对比

对比维度 🧪 酚氯仿法 🩸 YALEPIC 柱式法 🧲 磁珠法
提取用时 3~5小时 1小时 30~60分钟
毒性 ☠️ 有毒(苯酚/氯仿) ✅ 无毒 ✅ 无毒
DNA纯度(OD260/280) 1.6~1.9(波动大) 1.7~1.9(稳定) 1.7~1.9(稳定)
DNA片段大小 50kb 30~50kb 20~50kb
有核RBC兼容 ⚠️ 需额外优化 ✅ 原生支持 ⚠️ 视品牌而定
设备需求 离心机+通风橱 普通离心机 磁力架/自动化
操作复杂度 🔴 高 🟢 低 🟢 低
单样本成本 ~¥2 ~¥6 ~¥10~20
高通量兼容 ❌ 不适合 ⚠️ 勉强 ✅ 自动化
洗脱体积 50~500μl 50~200μl 50~200μl
推荐使用场景 超大片段需求 临床/科研常规使用 高通量/自动化

❓ 常见问题 FAQ

Q1:血液基因组DNA提取需要多长时间?

整个流程通常在30~40分钟内完成。具体步骤:样本裂解10分钟、结合2分钟、两次洗涤各1分钟、干燥膜1分钟、洗脱1分钟。若洗脱前将缓冲液60℃预温并孵育5分钟,得率可提升10%~15%,全程约45分钟。

Q2:提取的DNA能直接用于qPCR或测序吗?

完全可以。提取的基因组DNA纯度OD260/280通常在1.7~1.9之间,无血红素和蛋白残留,不含有机溶剂,可直接用于常规PCR、qPCR、多重PCR、NGS文库构建、甲基化分析等。对数字PCR建议洗脱后用TE缓冲液稀释后再加样,避免微量盐离子影响微滴生成。

Q3:DNA得率低怎么办?

常见原因及对策:①白细胞数量少(免疫缺陷样本),可增加采血量或离心富集白细胞层;②冻存血未充分混匀,取出后置冰上缓慢解冻并颠倒混匀;③蛋白酶K裂解不充分,确认试剂未过期、56℃孵育延长至20分钟;④洗脱液未垂直滴于膜中央,室温孵育2~5分钟后再离心。若仍无改善,建议荧光定量法(如Qubit)检测以排除单链DNA降解。

Q4:能用肝素抗凝全血提取吗?

可以使用肝素抗凝全血,但肝素对PCR有潜在抑制作用。建议裂解前用PBS洗涤细胞1~2次,或增加一次Wash Buffer洗涤以去除残余肝素。提取后应检测OD260/230比值确保>1.8。若仍出现扩增抑制,可将DNA用3M醋酸钠/乙醇沉淀重溶,或选用肝素耐受性更强的聚合酶。

Q5:柱式法和磁珠法血液DNA提取试剂盒怎么选?

柱式法无需磁力架,只需普通台式离心机,单次处理样本量灵活,洗脱体积小(可低至50μl),DNA浓度更高,更适合样本量有限的实验。柱式法成本仅为磁珠法的1/3~1/2。大部分科研和临床常规检测柱式法已完全满足需求,只有全自动大批量(>96样本/天)提取时磁珠法才有通量优势。

Q6:提取的DNA如何保存?反复冻融有影响吗?

纯化后基因组DNA建议分装后-20℃保存,可稳定保存2年以上;长期保存可置于-80℃。避免反复冻融——每次冻融会造成大片段DNA机械剪切断裂,导致平均长度降低。每管DNA溶液冻融次数应控制在3次以内。

Q7:能同时提取病毒DNA吗?和专门的病毒DNA试剂盒有什么区别?

YC22004的裂解体系可同时裂解白细胞、红细胞(有核/无核)以及血液中游离的病毒颗粒,因此一份血样可同时回收基因组DNA+线粒体DNA+病毒DNA。与专门的病毒DNA提取试剂盒相比,柱式法的洗涤步骤同样高效去除血红素等PCR抑制剂,提取的病毒DNA可直接用于qPCR检测。区别在于病毒DNA的丰度更低,若要专门做病毒载量检测且样本量<50μl时,建议使用专用病毒试剂盒。

Q8:禽类血液用量为什么只有5~20μl?与人血200μl差距这么大?

禽类、鸟类和两栖类血液含有成熟有核红细胞,每个红细胞中有一个细胞核,DNA含量远高于人血(无核红细胞)。5~20μl禽血所含的白细胞+有核红细胞DNA总量已接近甚至超过200μl人血,因此只需微量血样即可获得充足DNA,这是有核红细胞样本的天然优势。

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货号 YC22004 · 50T · ¥300.00 · 室温保存 · 现货供应 · 全国冷链/常温配送

📚 参考文献与延伸阅读

  1. Boom R, Sol CJ, Salimans MM, et al. Rapid and simple method for purification of nucleic acids. Journal of Clinical Microbiology, 1990, 28(3): 495–503.
  2. QIAGEN. QIAamp DNA Blood Mini Kit Handbook. 2023. 硅胶膜离心柱法从血液中提取基因组DNA的标准参考方案。
  3. Miller SA, Dykes DD, Polesky HF. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acids Research, 1988, 16(3): 1215.
  4. Butler JM. Forensic DNA Typing: Biology, Technology, and Genetics of STR Markers. 2nd ed. Elsevier Academic Press, 2005. 血液DNA在法医STR分型中的应用。
  5. Ghatak S, Muthukumaran RB, Nachimuthu SK. A simple method of genomic DNA extraction from human samples for PCR-RFLP analysis. Journal of Biomolecular Techniques, 2013, 24(4): 224–231. 血液DNA提取方法学比较。
  6. Mulero JJ, Chang CW, Lagacé RE, et al. Development and validation of the AmpFlSTR MiniFiler PCR Amplification Kit. Journal of Forensic Sciences, 2008, 53(4): 838–852. 血液/血痕样本在法医STR扩增中的应用验证。


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