YALEPIC^® Script X cDNA 第一链合成试剂盒

• YALEPIC^® Script X 1st Strand cDNA Synthesis Kit是雅礼生物推出的高性价比cDNA第一链合成试剂盒，专为RNA逆转录实验设计。产品包含 YALEPIC®Script X Reverse Transcriptase（RNase H-型逆转录酶）、RNA酶抑制剂、dNTPs、Oligo(dT)20引物、随机六聚体引物及优化缓冲体系，所有组分独立包装，可根据实验需求灵活配比。
• 核心酶 YALEPIC^®Script X Reverse Transcriptase 基于 M-MLV（RNase H-）逆转录酶 深度改造，大幅提升了热稳定性与模板行进性，可在高温下有效打开RNA复杂二级结构，特别适合长片段及高GC含量模板的逆转录。该酶对常见逆转录抑制物（如肝素、EDTA、乙醇残留等）具有高耐受度，可合成高均一性全长cDNA，最长可达15kb。
• 产物广泛适用于：第二链cDNA合成（NGS文库构建）、Northern/Southern杂交、常规PCR及实时荧光定量PCR（qPCR） 等下游分子生物学实验。

• 宽泛的模板起始量且兼容性强：从1pg~5μg总RNA；
• 逆转录性能强：高温下能打开RNA复杂二级结构，得到cDNA长度可至15kb；
• 高杂质耐受度：在常见杂质存在条件下仍能保持高效的逆转录性能；
• 灵活选择引物：针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物。

本产品为通用型cDNA第一链合成试剂盒，广泛适用于：

• 动物RNA逆转录（人、小鼠、大鼠、斑马鱼等）
• 植物RNA逆转录（拟南芥、水稻、玉米等，耐受多糖/多酚干扰）
• 微生物RNA逆转录（细菌、酵母、病毒RNA等）

适用于后续 qPCR定量检测、RNA-seq文库构建、cDNA文库杂交、RT-PCR克隆 等多种应用场景。

-20℃ 保存，＜ 0℃ 运输。

Q1：YALEPIC^® Script X cDNA第一链合成试剂盒适用于哪些实验？

适用于RT-PCR、RT-qPCR基因表达分析、全长cDNA克隆、RNA-seq文库构建、杂交等多种下游应用。特别适合具有复杂二级结构的RNA模板及低丰度基因的逆转录。

Q2：该试剂盒的逆转录酶与普通M-MLV逆转录酶有何区别？

Script X Reverse Transcriptase是在M-MLV（RNase H-）基础上经分子改造的全新变体，大幅提高了热稳定性，可在较高反应温度下有效打开RNA复杂二级结构，增强模板亲和力和行进性，同时具有更高的杂质耐受度。全长cDNA合成能力可达15 kb，远优于传统M-MLV酶。

Q3：使用该试剂盒时RNA模板的起始量是多少？

宽泛的模板起始范围：1 pg ~ 5 μg总RNA。无论是微量样本还是常规RNA样本均可兼容，尤其适合低丰度基因的表达分析。

Q4：能否直接使用cDNA合成产物进行qPCR？

可以。第一链cDNA合成反应液无需纯化，可直接作为PCR或qPCR模板使用。建议合成反应液的加入量不超过PCR总反应体系的1/10，以保证最佳扩增效率。

Q5：RNA样本中含有杂质时是否可以使用该试剂盒？

可以。Script X Reverse Transcriptase对常见逆转录抑制物（如乙醇、胍盐、肝素等）具有较高的耐受度，即便RNA样本中含有少量杂质，仍能保持高效逆转录性能，可减少RNA纯化步骤，节约时间和成本。

Q6：如何选择逆转录引物？Oligo(dT)20和随机引物有何区别？

• Oligo(dT)20：特异性结合mRNA的poly(A)尾，适用于分析mRNA表达及全长cDNA合成
• 随机引物：随机结合RNA模板上的多个位点，适用于无poly(A)尾的RNA（如细菌RNA）或分析RNA所有区域

试剂盒中的Oligo(dT)20和随机引物独立提供，用户可根据实验需求灵活选择或混合使用。

Q7：该试剂盒的最大cDNA合成长度是多少？

通过优化的Script X Reverse Transcriptase，最高可合成长达15 kb的全长cDNA，适用于长链基因的克隆和全长转录本分析。

Q8：试剂盒应如何保存和运输？

• 保存：-20℃长期保存，建议分装保存，避免反复冻融
• 运输：<0℃冰袋或干冰运输

取用时请在冰上操作，防止酶活性下降。

Q9：该试剂盒与雅礼生物其他cDNA合成试剂盒有何区别？

YALEPIC^® Script X系列为高性价比通用型cDNA第一链合成试剂盒，侧重于宽范围RNA模板的兼容性和复杂二级结构RNA的高效逆转录。公司另有一步gDNA去除及第一链cDNA合成试剂盒，适用于需同步去除基因组DNA污染的实验需求。用户可根据下游应用需求选择合适产品。