YALEPIC® Taq ZG PCR MasterMix (Dye)是雅礼生物推出的即用型快速PCR预混液,采用特殊修饰的Taq DNA聚合酶与精心优化的缓冲体系(含dNTPs、KCl、MgCl₂),专为追求高效、稳定、高通量PCR扩增的实验场景设计。
使用本产品时,仅需在反应体系中加入引物和模板即可开始扩增,大幅简化传统PCR的移液步骤,减少加样误差,显著提高实验结果的重复性与检测通量。产品具有突出的模板兼容性,可高效扩增纯化DNA、细菌菌落/菌液、粗提物及cDNA等多种类型模板,拓宽了常规PCR的应用边界。
扩增产物的3′端带有“A”碱基,可直接用于T/A克隆,无缝衔接下游克隆实验。产品内含高稳定性电泳指示染料,PCR反应结束后无需额外添加上样缓冲液,可直接进行琼脂糖凝胶电泳检测,简化操作流程,尤其适合高通量筛选、基因鉴定和菌落PCR等需要快速电泳验证的实验场景。
1. 即用型预混液,简化加样流程
2×浓度即开即用,仅需添加引物和模板,大幅减少移液步骤和操作时间,降低交叉污染风险。
2. 模板兼容性强,一液多用
高效扩增纯化DNA、细菌菌落/菌液、粗提物及cDNA等多种模板,无需针对不同模板频繁更换试剂体系。
3. 抗体封闭Taq ,超高扩增效率
可扩增200bp-8K片段,200bp-1k片段扩增速度可达1s/k;中长片段扩增速度2-4s/k。
4. 自带电泳染料,扩增完毕直接上样
预混液中预置高稳定性电泳指示染料,PCR结束后无需添加Loading Buffer,反应液直接上样电泳,节省时间。
5. 扩增产物带A尾,T/A克隆无需额外处理
3′端自然附加“A”碱基,PCR产物纯化后可直接与T载体连接,缩短下游克隆实验周期。
-20℃ 避光保存,≤ 0℃ 运输。
Q1:YALEPIC Taq ZG PCR 预混液自带的染料会不会影响 PCR 扩增效率?
A:产品内置低浓度惰性电泳染料,经配方优化不干扰 Taq 酶活性、引物退火与 DNA 扩增,全程不抑制 PCR 反应,不影响条带清晰度。
Q2:这款含染料 PCR MasterMix 可以直接做菌落 PCR 吗?需要裂解菌体吗?
A:可直接用于菌落 PCR,修饰 Taq 酶耐受菌体杂质,挑取单菌落直接加入体系即可扩增,常规场景无需提前裂解细菌。
Q3:PCR 产物带 A 尾,用本产品做完扩增后能直接连 TA 载体吗?
A:可以,本预混液扩增产物天然 3’端 A 突出,扩增结束产物纯化后直接用于 T/A 克隆连接,无需末端加 A 酶处理。
Q4:试剂反复冻融几次会失效?分装后 4℃短期存放可行吗?
A:建议分装成单次用量,-20℃保存,常规≤20次冻融酶活无明显下降;不建议长期 4℃存放,短期(3 天内)临时存放可。
Q5:粗提 DNA 杂质多、含蛋白抑制剂,能用这款 Taq PCR 预混液扩增吗?
A:配方优化缓冲体系提升杂质耐受度,组织粗提、简易提取核酸均可稳定扩增,杂质过高可适当稀释模板浓度。
Q6:产品不同规格(1ml/5ml)预混液配方一致吗,可以混用吗?
A:全规格 YEM61001 系列配方完全相同,仅分装体积不同,同批次产品可任意混用配制反应体系。
Q7:常规 PCR 体系配比是多少,25μL 反应体系如何加样?
A:25μL 体系:MasterMix 12.5μL + 上下游引物各 0.2–0.5μL + 模板适量 + RNase-free 水补至 25μL。
Q8:扩增无目的条带,使用本款含染料 PCR mix 常见原因有哪些?
A:①引物降解或设计特异性差;②模板降解 / 浓度过低;③退火温度不匹配,建议设置温度梯度摸索条件;④试剂储存不当失活,更换新批次预混液复测。
Q9:染料颜色深浅不同是产品质量问题吗?
A:批次间染料轻微色差属于正常现象,不影响扩增与电泳结果,出厂均经过 COA 质检合格。
Q10:cDNA 模板扩增效率偏低,怎么优化实验条件?
A:适当提升模板添加量、微调退火温度,cDNA 纯度偏低可稀释模板减少逆转录残留抑制剂干扰。
Q11:产品运输冷链断了,常温放置半天还能不能继续使用?
A:短时间常温(<12h)一般不失效,分装后 – 20℃避光保存,可做小试 PCR 验证扩增效果后大批量使用。
Q12:可以用于快速 PCR 程序扩增短片段(<500bp)吗?
A:适配常规与快速 PCR 程序,短片段可缩短延伸时间,搭配快速温控程序提升实验速度。