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雅礼生物FAQ中心汇集了用户在使用核酸提取、PCR纯化、磁珠法DNA/RNA提取等产品的常见问题。 您可以按产品类型浏览,或直接搜索关键词快速定位所需答案。

共 1132 条FAQ,分 57 页显示,当前第 50 页

产品FAQ

以下FAQ来源于各产品详情页,涵盖样本保存、核酸提取、PCR/qPCR、转染、血清、耗材等品类。点击产品名称可跳转至产品详情页。

YALEPIC® 血液基因组DNA小量提取试剂盒(不含RNase A)

全血基因组DNA小提试剂盒提取的DNA浓度低怎么办?
DNA得率低常见原因及对策:①血液白细胞数量少(如免疫缺陷患者样本),可增加采血量或在裂解前离心富集白细胞层;②冻存血未充分混匀,取出后应置冰上缓慢解冻并颠倒混匀;③蛋白酶K裂解不充分,确认裂解液未过期,裂解温度保持56℃并适当延长至20分钟;④洗脱液未击中膜中心,洗脱时需将缓冲液垂直滴于膜中央,并室温孵育2-5分钟后离心。若仍无改善,建议用荧光定量法检测微量DNA,排除单链DNA降解问题。
该试剂盒能提取肝素抗凝血的基因组DNA吗?
可以使用肝素抗凝全血,但肝素对PCR有潜在抑制作用。我们建议在裂解步骤将肝素血用PBS洗涤细胞1-2次,或适当增加洗涤步骤(加一次Buffer AW2洗涤)以去除残余肝素。提取后的DNA应进行OD260/230比值检测,确保比值>1.8。对于后续直接进行PCR扩增的实验,若仍出现扩增抑制,可将DNA用3M醋酸钠/乙醇沉淀重溶,或选用对肝素耐受性更好的聚合酶。
血液DNA提取试剂盒与磁珠法试剂盒相比有什么优势?
柱式法血液DNA提取试剂盒在成本、操作简便性和DNA纯度稳定性方面优势明显。与磁珠法相比,柱式法无需磁力架,只需普通台式离心机,单次处理样本量灵活,且洗脱体积小(可低至50 µL),获得的DNA浓度更高,更适用于样本量有限的实验。对于大部分科研和临床常规检测,柱式法已完全满足需求,只有全自动大批量提取时磁珠法才更有通量优势。
提取的基因组DNA如何保存?反复冻融会影响质量吗?
纯化后的基因组DNA建议分装后保存在-20℃,可稳定保存2年以上。如需长期保存,可置于-80℃。避免反复冻融,因多次冻融会造成大片段DNA机械剪切断裂,导致平均长度降低。每管DNA溶液冻融次数应控制在3次以内。

YALEPIC® 血液直扩PCR/qPCR裂解液

什么是血液直扩PCR裂解液?和传统DNA提取有什么不同?
血液直扩PCR裂解液是一种专门用于全血样本的化学裂解试剂,可在不进行DNA纯化的情况下直接裂解血细胞并释放基因组DNA,裂解产物即可作为PCR/qPCR扩增模板。与传统DNA提取方法(如硅胶膜离心柱法、酚-氯仿抽提法)相比,本产品无需有机溶剂、无需离心柱耗材、操作步骤从10余步减少至2–3步,整个样本处理时间从1–2小时缩短至5–15分钟,显著提升实验效率,同时降低样本交叉污染风险。
YALEPIC®
血液直扩裂解液可以用于哪些类型的血液样本?

本裂解液兼容广泛的血液样本类型,包括:新鲜采集的抗凝血(EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝均可)、4°C短期储存的血液、-20°C或-80°C长期冻存的血液,以及Whatman 903、FTA卡等商用血卡上的干血渍样本。不同类型的血液样本在裂解效果和下游扩增性能上均表现稳定。

裂解后的样品是否需要进一步处理才能用于PCR/qPCR?
不需要。本裂解液采用优化的配方设计,裂解产物可直接作为PCR/qPCR模板使用,无需额外的纯化步骤。但建议在裂解后短暂离心(如3,000–5,000 rpm离心2–3分钟),取上清用于扩增反应,以避免血细胞碎片对扩增体系的物理干扰。
血液样本用量应该如何控制?
推荐血液模板用量为PCR总反应体积的5%–10%。例如50 μL PCR反应体系中加入2.5–5 μL全血样本。对于某些难扩增靶标或低拷贝数模板,可在5%–20%范围内优化血液加入量,但建议不超过总反应体积的30%,过高的血液比例可能引入过多抑制剂影响扩增效率。冷冻血液样本应避免反复冻融,以免DNA片段化影响长片段扩增。
裂解液如何保存和运输?常温下能放多久?
本裂解液可在室温(15–25°C)条件下保存和运输,无需冷链支持。未开封产品有效期12个月。开封后建议避光保存于室温环境,取用后及时旋紧瓶盖,避免污染和水分挥发。如需长期储存,可置于4°C,但使用前需恢复至室温并充分混匀。
本裂解液可以用于qPCR实时荧光定量检测吗?
可以。YALEPIC®血液直扩裂解液经过专门优化,裂解产物可直接用作qPCR模板,兼容SYBR Green法和TaqMan探针法两种主流qPCR检测体系。在血液样本的基因表达定量、病原体载量检测、SNP基因分型等qPCR应用中均可稳定使用。但建议首次使用某一特定qPCR体系时进行预实验优化,以确定最佳裂解条件和模板加入量。
使用本产品进行血液直扩时,为什么有时候扩增不出来或Ct值偏高?
可能的原因包括:
  1. 血液抑制剂负荷过高:某些溶血严重或保存不当的血液样本中血红素等抑制剂含量较高,建议适当降低血液模板比例(如从10%降至5%);

  2. 裂解不充分:血液样本量过大或裂解时间不足,建议按说明书推荐比例加入裂解液并确保充分孵育;

  3. 引物设计问题:直扩体系中引物设计需考虑裂解产物中可能存在的残留抑制剂,建议使用经过直扩体系验证的引物;

  4. 靶标拷贝数过低:低丰度靶标可尝试增加模板投入量或优化扩增循环参数。

建议逐一排查上述因素,必要时可联系雅礼生物技术支持获取个性化优化方案。

本裂解液与YALEPIC®
血液直扩PCR试剂盒有什么区别?可以搭配使用吗?

本裂解液(YALEPIC® Blood Direct PCR/qPCR Lysis Buffer)仅提供血液样本裂解功能,裂解后需配合常规PCR Mix或qPCR Mix完成扩增。而YALEPIC®血液直扩PCR试剂盒(Blood Direct PCR Kit)为一体化解决方案。用户可根据实验需求灵活选择:若已拥有成熟的扩增体系,可单独购买裂解液;若希望获得最优的直扩效果,建议购买全套试剂盒。

本产品是否兼容自动化高通量处理?
是。本裂解液支持96孔板等自动化移液工作站的高通量操作,裂解步骤可在多孔板中并行处理,配合自动化PCR/qPCR系统可实现从样本裂解到结果检测的全流程自动化,特别适用于基因检测中心、疾控中心等需要日处理成百上千份样本的高通量场景。
YALEPIC®
血液直扩裂解液是否通过相关质量认证?是否可以用于临床诊断?

本产品严格按照医疗器械生产管理体系生产,每一批次均经过严格的质检放行。但根据中国医疗器械监管法规,本产品仅供科研使用,不可直接用于临床诊断。如需临床诊断用途,客户需自行完成相关注册和验证工作。雅礼生物可根据客户需求提供OEM定制和临床报证技术支持。

YALEPIC® 血液直扩PCR试剂盒

YALEPIC®血液直扩PCR试剂盒是否需要预先提取血液基因组DNA?
不需要。该试剂盒专为“样本直扩”设计,只需将少量全血或抗凝血直接加入反应体系中即可进行PCR扩增,完全省去了繁琐的核酸提取步骤,特别适合高通量筛选与快速检测场景。
该试剂盒对不同抗凝剂的血液样本兼容性如何?
YALEPIC Blood Direct PCR Kit 对EDTA-K2/K3、肝素钠/锂、柠檬酸钠等常见抗凝剂均有良好兼容性。但需注意,不同抗凝剂的最佳样本添加量可能略有差异,建议首次使用时参考说明书进行梯度测试以确定最佳条件。
使用血液直扩试剂时,如何避免PCR抑制导致的扩增失败?
本产品已内置高效抑制剂中和成分。若仍遇扩增不佳,建议:① 确保血液样本未严重溶血或脂血;② 适当减少血液加样量或增加预变性时间;③ 确认引物Tm值与退火温度匹配。雅礼生物技术支持团队可提供个性化优化方案。
这款试剂盒可以用于荧光定量PCR(qPCR)吗?
若您用于实时荧光定量检测,请选择YALEPIC® 血液直扩PCR/qPCR裂解液 CAT#YEM41030并搭配荧光染料或探针体系,以获得最佳Ct值与扩增曲线。
血液样本反复冻融后是否影响直扩效果?
轻度冻融(≤3次)通常不影响扩增性能。但长期保存的血液样本可能出现细胞裂解过度释放抑制物,建议分装保存于-80℃。对于陈旧或降解严重的血液样本,可适当增加模板量或使用雅礼生物专用增强型缓冲液辅助扩增。

YALEPIC® 超纯质粒DNA中量提取试剂盒(1-15ml)

这款质粒中量提取试剂盒适配多少体积菌液?
专为 1~15ml 过夜培养的大肠杆菌菌液设计,常规实验用量均可兼容,无需额外调整试剂比例。
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