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雅礼生物FAQ中心汇集了用户在使用核酸提取、PCR纯化、磁珠法DNA/RNA提取等产品的常见问题。 您可以按产品类型浏览,或直接搜索关键词快速定位所需答案。
共 1147 条FAQ,分 58 页显示,当前第 50 页
产品FAQ
以下FAQ来源于各产品详情页,涵盖样本保存、核酸提取、PCR/qPCR、转染、血清、耗材等品类。点击产品名称可跳转至产品详情页。
YALEPIC® 血液RNA提取试剂盒(不含DNase I)
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血液RNA提取试剂盒一次能处理多少血液样本?
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本试剂盒单次推荐处理量为≤ 1.5 mL全血(更大血液量可咨询雅礼生物技术团队)。在此范围内可获得稳定的RNA得率与纯度。如需处理更大量样本,建议分装后分批提取,以确保裂解充分、RNA质量稳定。
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提取的血液RNA纯度如何?能否直接用于RT-qPCR?
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本试剂盒提取的血液总RNA经NanoDrop检测,A260/A280比值通常≥1.9,A260/A230比值≥1.5,纯度高,可有效去除血红素、肝素等PCR抑制因子。提取的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time RT-qPCR等实验,无需额外纯化步骤。
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血液RNA提取试剂盒是否含有DNase I?如何去除基因组DNA污染?
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本产品(货号YR23003)不含DNase I。若下游实验对基因组DNA残留敏感(如RT-qPCR定量分析),建议在RNA提取后使用雅礼生物提供的DNase I(单独订购)进行柱上或柱外DNase消化处理,以彻底去除基因组DNA污染。
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血液RNA提取过程中需要用到酚或氯仿吗?
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不需要。YALEPIC 血液RNA提取试剂盒采用柱式法纯化技术,全程无需酚、氯仿等有毒有机试剂抽提,操作安全环保,符合现代实验室绿色安全规范,尤其适合需要频繁操作的科研与检验人员。
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提取的血液RNA可以用于高通量测序(RNA-Seq)吗?
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可以。本试剂盒提取的血液总RNA完整性好(琼脂糖凝胶电泳可见清晰的28S/18S rRNA条带),纯度高,完全满足RNA-Seq高通量测序、基因芯片分析等对RNA质量要求较高的下游实验。
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试剂盒的保存条件是什么?需要冷藏吗?
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本试剂盒全组分可在10~30℃室温条件下保存,无需冷藏或冷冻。常温运输即可,无需干冰或冰袋,有效降低物流与仓储成本。建议密封避光保存,开封后请及时使用。
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全血样本采集后多久内需要提取RNA?
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为获得最佳RNA质量,建议在全血采集后尽快(2小时内)进行RNA提取。若不能及时处理,可将抗凝全血样本暂时保存于2~8℃(不超过24小时),或分离白细胞后于-80℃冻存。长期保存建议使用雅礼生物血液RNA样本保存管进行室温稳定化处理。
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血液RNA提取试剂盒与组织RNA提取试剂盒有什么区别?
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血液RNA提取试剂盒专门针对全血样本的特殊性进行了优化,裂解体系可充分裂解血细胞并有效去除血红素等血液特异性抑制因子。而组织RNA提取试剂盒则针对固体组织的机械匀浆与蛋白去除进行了专门设计。建议根据实际样本类型选择对应试剂盒,以获得最佳提取效果。
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雅礼生物的血液RNA提取试剂盒可以批量采购或OEM定制吗?
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可以。雅礼生物支持血液RNA提取试剂盒的批量采购与OEM/ODM定制服务,可根据客户需求提供不同规格包装、定制标签及技术支持。如有大批量采购或定制需求,请通过官网在线留言或拨打服务热线 0512-66256010 联系我们获取专属报价。
YALEPIC® 血液基因组DNA小量提取试剂盒(不含RNase A)
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全血DNA提取试剂盒一次可以处理多少血液样本?
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本试剂盒推荐每离心柱处理200 µL抗凝全血(EDTA、枸橼酸钠等),亦可用于血沉棕黄层或骨髓样本。若血液白细胞计数极低(如严重白细胞减少症患者),可适当增加上样量至300 µL,并通过重复结合步骤保证回收率。
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血液基因组DNA提取步骤需要多长时间?
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整个血液基因组DNA提取流程通常在30-40分钟内完成。具体步骤包括:样本裂解(10分钟)、结合(2分钟)、洗涤两次(各1分钟离心)、干燥膜(1分钟)和洗脱(1分钟)。若需最大化产率,可将洗脱液在60℃预温并孵育5分钟后再离心收集,这样整个流程约延长至45分钟,但得率可提升10%-15%。
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使用血液DNA提取试剂盒提纯的DNA能直接用于qPCR或测序吗?
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完全可以。提取的基因组DNA纯度OD260/280通常在1.7-1.9之间,无血红素和蛋白残留,且不含有机溶剂,可直接作为模板用于常规PCR、qPCR、多重PCR、二代测序文库构建、甲基化分析等下游应用。对于要求极高的数字PCR,建议洗脱后用适量TE缓冲液稀释后再行加样,以避免洗脱液中微量盐离子对微滴生成的影响。
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全血基因组DNA小提试剂盒提取的DNA浓度低怎么办?
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DNA得率低常见原因及对策:①血液白细胞数量少(如免疫缺陷患者样本),可增加采血量或在裂解前离心富集白细胞层;②冻存血未充分混匀,取出后应置冰上缓慢解冻并颠倒混匀;③蛋白酶K裂解不充分,确认裂解液未过期,裂解温度保持56℃并适当延长至20分钟;④洗脱液未击中膜中心,洗脱时需将缓冲液垂直滴于膜中央,并室温孵育2-5分钟后离心。若仍无改善,建议用荧光定量法检测微量DNA,排除单链DNA降解问题。
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该试剂盒能提取肝素抗凝血的基因组DNA吗?
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可以使用肝素抗凝全血,但肝素对PCR有潜在抑制作用。我们建议在裂解步骤将肝素血用PBS洗涤细胞1-2次,或适当增加洗涤步骤(加一次Buffer AW2洗涤)以去除残余肝素。提取后的DNA应进行OD260/230比值检测,确保比值>1.8。对于后续直接进行PCR扩增的实验,若仍出现扩增抑制,可将DNA用3M醋酸钠/乙醇沉淀重溶,或选用对肝素耐受性更好的聚合酶。
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血液DNA提取试剂盒与磁珠法试剂盒相比有什么优势?
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柱式法血液DNA提取试剂盒在成本、操作简便性和DNA纯度稳定性方面优势明显。与磁珠法相比,柱式法无需磁力架,只需普通台式离心机,单次处理样本量灵活,且洗脱体积小(可低至50 µL),获得的DNA浓度更高,更适用于样本量有限的实验。对于大部分科研和临床常规检测,柱式法已完全满足需求,只有全自动大批量提取时磁珠法才更有通量优势。
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提取的基因组DNA如何保存?反复冻融会影响质量吗?
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纯化后的基因组DNA建议分装后保存在-20℃,可稳定保存2年以上。如需长期保存,可置于-80℃。避免反复冻融,因多次冻融会造成大片段DNA机械剪切断裂,导致平均长度降低。每管DNA溶液冻融次数应控制在3次以内。
YALEPIC® 血液直扩PCR/qPCR裂解液
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什么是血液直扩PCR裂解液?和传统DNA提取有什么不同?
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血液直扩PCR裂解液是一种专门用于全血样本的化学裂解试剂,可在不进行DNA纯化的情况下直接裂解血细胞并释放基因组DNA,裂解产物即可作为PCR/qPCR扩增模板。与传统DNA提取方法(如硅胶膜离心柱法、酚-氯仿抽提法)相比,本产品无需有机溶剂、无需离心柱耗材、操作步骤从10余步减少至2–3步,整个样本处理时间从1–2小时缩短至5–15分钟,显著提升实验效率,同时降低样本交叉污染风险。
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YALEPIC®
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血液直扩裂解液可以用于哪些类型的血液样本?
本裂解液兼容广泛的血液样本类型,包括:新鲜采集的抗凝血(EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝均可)、4°C短期储存的血液、-20°C或-80°C长期冻存的血液,以及Whatman 903、FTA卡等商用血卡上的干血渍样本。不同类型的血液样本在裂解效果和下游扩增性能上均表现稳定。
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裂解后的样品是否需要进一步处理才能用于PCR/qPCR?
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不需要。本裂解液采用优化的配方设计,裂解产物可直接作为PCR/qPCR模板使用,无需额外的纯化步骤。但建议在裂解后短暂离心(如3,000–5,000 rpm离心2–3分钟),取上清用于扩增反应,以避免血细胞碎片对扩增体系的物理干扰。
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血液样本用量应该如何控制?
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推荐血液模板用量为PCR总反应体积的5%–10%。例如50 μL PCR反应体系中加入2.5–5 μL全血样本。对于某些难扩增靶标或低拷贝数模板,可在5%–20%范围内优化血液加入量,但建议不超过总反应体积的30%,过高的血液比例可能引入过多抑制剂影响扩增效率。冷冻血液样本应避免反复冻融,以免DNA片段化影响长片段扩增。