YALEPIC^® 无内毒素质粒DNA超大量提取试剂盒（100-500ml）

YALEPIC^®无内毒素质粒DNA超大量提取试剂盒(100-500ml) 采用独特的碱裂解-中和离心柱纯化体系，结合深度内毒素去除工艺，可在短时间内获得显著低于常规大量提取产品的内毒素残留（<1EU/μg ），满足严苛的细胞转染、原代细胞导入、基因治疗载体构建及临床前体内研究等高要求下游应用。本试剂盒优化了裂解结合缓冲液，可高效处理高拷贝或低拷贝质粒，最终获得的质粒DNA不仅纯度高、A260/A280比率在1.8-2.0之间，且极低基因组DNA与RNA污染，确保在脂质体转染、电穿孔及AAV/LV病毒包装中实现高转染效率与高细胞活性，是分子生物学与生物医药研发中质粒大提的稳定可靠选择。

• 超低内毒素，转染无忧：内毒素含量严格控制在<1 EU/μg，避免细胞毒性干扰，提升转染实验可靠性与重复性。

• 高产量高纯度：从100-500ml标准LB菌液中，高产获得纯度稳定的质粒DNA，A260/A280稳定在1.8-2.0，无RNA与gDNA残留。

• 兼容多类型质粒：高效回收高拷贝、低拷贝质粒等多种载体无内毒素大量制备。

• 快速简便的操作流程：超大容量过滤柱，优化的Buffer体系与纯化步骤，裂解、中和、结合、洗涤、洗脱一体化，全程约45-60分钟。

• 稳定的批次一致性：严格原料控制与生产工艺，确保每一批次内毒素清除效率、结合载量和产量高度一致，适合长周期项目与多中心研究。

• 兼容下游应用：所得质粒可直接用于常规转染、电转、AAV/LV病毒包装、基因疫苗制备及体内动物实验研究。

适用于 100~500ml 过夜培养大肠杆菌菌液，科研实验室大规模质粒 DNA 提取；产出质粒可用于细胞转染、酶切实验、基因测序、PCR 扩增、体外转录等分子生物学下游实验。

常温运输；10 ~ 30℃ 常温保存。

Q1：无内毒素质粒大提试剂盒和普通大提试剂盒有何区别？为什么细胞转染必须去内毒素？
A：普通大提试剂盒仅保证质粒纯度和去除蛋白、RNA，但残留的细菌内毒素（脂多糖）在转染时会引起细胞应激、炎症反应甚至凋亡，显著降低转染效率和细胞活性。雅礼生物YALEPIC^®无内毒素质粒大量提取试剂盒专为去内毒素设计，最终质粒内毒素含量<1EU/μg DNA，可确保敏感哺乳动物细胞、原代细胞的转染成功率，并适用于AAV包装、基因治疗等高标准下游。

Q2：该试剂盒处理100-500ml菌液，能收获多少质粒DNA？
A：产量取决于质粒拷贝数、菌株、培养基及培养条件。在标准高拷贝质粒、LB培养基条件下，处理100ml菌液通常可收获0.5-1mg高纯度无内毒素质粒DNA，500ml制备量成比例扩增。低拷贝及大型载体产量相应降低，但柱结合载量高达2.5mg，充分保证稳定回收。建议优化培养与质粒提取前确认OD值。

Q3：Pro Maxi无内毒素质粒提取试剂的A260/A280比值正常范围是多少？
A：优化后提取的质粒DNA A260/A280典型比值在1.8-2.0之间。低于1.8可能残余蛋白质或酚类污染，高于2.0则可能存在RNA污染。本试剂盒经过严格去蛋白、去RNA优化，洗脱产物核酸纯度可稳定达到理想范围，适合直接转染、酶切及测序等应用。

Q4：这款无内毒素质粒大提试剂盒可以用于低拷贝质粒提取吗？
A：可以。该试剂盒针对低拷贝质粒优化了裂解缓冲体系与结合条件，推荐增加菌液体积至300-500ml，并在洗脱前延长吸附时间或进行二次上柱，能够获得满足转染需求的无内毒素质粒DNA。配套技术指南提供详细操作建议。

Q5：提取结束后，质粒DNA如何保存？内毒素水平会升高吗？
A：建议将洗脱的质粒DNA使用试剂盒提供的洗脱液溶解，分装后于-20℃或-80℃避光保存。可在1年内保持高度稳定，内毒素含量不会随保存时间增加。避免反复冻融，长期保存建议使用低吸附EP管，并监测完整度与浓度。

Q6：试剂盒里的溶液在低温运输下出现沉淀怎么办？
A：Buffer类溶液可能因低温盐析出现沉淀或结晶，属于正常现象。使用前将溶液置于37℃水浴或烘箱中温和加热，间歇摇动直至完全溶解澄清，混匀后冷却至室温即可使用。沉淀溶解后完全不影响去内毒素效果与质粒提取性能。

Q7：雅礼生物这款无内毒素质粒Pro Maxi试剂盒与进口品牌相比，性能和稳定性如何？
A：YALEPIC^®无内毒素质粒DNA Pro Maxi大量提取试剂盒在关键指标——内毒素残留控制、产量、纯度以及转染效率上与进口主流品牌高度一致，且批次间一致性经过严格验证。已帮助众多国内生物医药企业及高校实验室替代进口方案，在细胞转染、病毒包装与体内研究中均表现优异，且兼具现货优势和性价比，是国产高品质无内毒素质粒提取的可靠选择。