其他样本DNA提取FAQ

雅礼官方解答(56 条)

使用本试剂盒从不同样本中能提取到多少DNA?产量的大致范围是多少?
DNA产量因样本类型和用量而异。通常,从200 μl健康人全血中可提取3-6 μg DNA;从25 mg动物组织(如肝脏)中可提取10-30 μg DNA;从5 × 10⁶ 个培养细胞(如HEK293)中可提取15-40 μg DNA。建议在实验前查阅文献了解目标样本的DNA含量水平。
除了说明书上推荐的样本类型,这个试剂盒还能用于其他样本吗?
本试剂盒是一款“通用型”产品,其优化的裂解缓冲液体系适用于多种生物样本,核心是裂解细胞和去除蛋白。除了组织、血液、细胞,也能有效处理细菌(如大肠杆菌)、真菌(如酵母)等。对于植物组织、FFPE(福尔马林固定石蜡包埋)样本等特殊情况,不建议尝试。
电泳检测时发现DNA条带拖尾或弥散,是降解了吗?如何避免?
DNA降解主要与样本本身和操作有关。首先,务必使用新鲜采集或妥善冻存的样本,避免反复冻融(这是核酸酶降解DNA的主要原因之一)。其次,裂解不充分也会影响DNA完整性,要确保组织块充分研磨,裂解液与样本混合均匀。提取完成后,建议将DNA产物分装保存于-20°C,避免反复冻融。
提取的DNA产量很低,甚至检测不到,可能的原因是什么?
产量低的原因通常有以下几种:
  • 样本本身:样本DNA含量少(如白细胞数量低、细菌培养时间过长导致DNA释放并被丢弃),或保存不当导致降解。
  • 裂解不充分:组织块过大、蛋白酶K失活或孵育时间不足。建议延长56℃孵育时间(难裂解样本可过夜),并检查蛋白酶K的活性。
  • 试剂问题:关键试剂如漂洗液中忘记添加指定量无水乙醇。这是新手最常犯的错误之一,请务必按瓶身标签操作。
  • 洗脱不理想:DNA在离心柱膜上洗脱不充分。建议将洗脱液预热至60-70℃,滴加在膜中央,室温孵育1-5分钟后再离心,或进行二次洗脱以提高回收率。
为什么提取的DNA在下游PCR或酶切实验中结果不好?
主要是纯化的DNA中存在抑制剂残留,如乙醇或盐离子。解决方法包括:洗涤后在最大转速下空管离心2-3分钟彻底干燥离心柱;确保试剂瓶身标注需添加乙醇的溶液已正确添加。此外,如果DNA不纯,可以通过增加洗涤次数或在PCR体系中加入终浓度0.1μg/μl的BSA来缓解抑制作用。
离心柱在操作中堵塞了,该怎么处理?
离心柱堵塞通常由样本裂解不充分或投入量过多导致。可尝试以下方法:适当延长样本裂解时间并增加颠倒混匀次数;减少样本起始投入量,并确保裂解后溶液清亮无粘稠不溶物;离心前检查裂解液是否完全澄清。
这款试剂盒的储存条件是什么?可以存放多久?
本试剂盒非常稳定,可在室温(15-25℃) 条件下储存和运输,有效期为18个月。蛋白酶K(如果包装形式为干粉或溶液)建议按说明书分装冻存,避免反复冻融。无需特殊低温保存,为实验室的日常使用提供了极大便利。
唾液样本采集时有哪些注意事项?
 采集唾液样本时,建议注意以下几点:
  1. 采集前30分钟内避免进食、饮水、吸烟或咀嚼口香糖,以免影响DNA质量;

  2. 采集前可用清水轻轻漱口,去除口腔中的食物残渣;

  3. 建议采集200~500 μL新鲜唾液作为起始样本量(可根据实验需求适当调整);

  4. 采集后如无法立即提取,可将唾液与唾液保存液按推荐比例混合(通常为1:1),室温保存可达数周至数月而不影响DNA质量;

  5. 避免唾液中混入过多气泡,气泡可能导致样本体积计量不准。

本试剂盒可提取的最小唾液样本量是多少?
本试剂盒优化的缓冲体系可处理200~500 μL唾液样本,推荐标准用量为400 μL。如需处理微量样本(如低于200 μL),建议使用唾液保存液或PBS补齐至标准体积后进行提取,或在说明书指导下按比例缩小各试剂的用量。对于极微量样本(如<50 μL),建议选择专门为微量样本设计的DNA提取试剂盒。如需进一步指导,请联系雅礼生物技术支持。
提取的DNA纯度和浓度是否满足二代测序要求?
可以满足。本试剂盒提取的唾液基因组DNA经严格的洗涤步骤充分去除了蛋白质、多糖、脂质及其他PCR抑制剂,A260/A280比值通常在1.7~2.0之间,A260/A230比值>1.8,DNA片段大小>15 kb,完全符合二代测序文库构建的质量要求(如Illumina、MGI等平台)。已有用户使用本产品提取的唾液gDNA成功完成了全外显子测序文库构建和上机测序。若需要用于NGS,建议在文库构建前进行DNA浓度精确定量(推荐Qubit荧光定量法)。
试剂盒是否可用于提取口腔拭子样本中的DNA?
本试剂盒专为唾液样本设计,但也适用于口腔拭子样本的DNA提取。对于拭子样本,建议将拭子头剪下放入离心管中,加入裂解液和蛋白酶K后充分振荡以释放细胞,后续操作与唾液样本完全一致。如需专门用于拭子样本的高通量提取,可参考雅礼生物其他核酸提取产品线。
试剂盒为什么不含RNase A?如果我想获取总RNA怎么办?
 本试剂盒默认不含RNase A,原因如下:
  1. 部分下游应用(如同时分析DNA和RNA、RNA干扰研究等)需要在提取过程中保留RNA组分;

  2. 不含RNase A的试剂盒可为用户提供更大的实验灵活性,用户可根据实际需求选择是否添加RNase A。

如需获取总RNA: 用户可在裂解步骤后向样本中加入适量RNase A溶液(试剂盒未提供,需自备或另购),37℃孵育15~20分钟后继续后续操作。如需在提取DNA的同时保留RNA用于后续检测,建议使用专门为DNA/RNA共提取设计的试剂盒。

唾液DNA提取试剂盒的常温保存稳定性如何?开封后可以保存多久?
本试剂盒在未开封情况下可在10℃~30℃室温条件下稳定保存12个月。开封后,各组分在正确储存条件下(裂解液、洗涤液、洗脱液室温保存;蛋白酶K建议-20℃保存)仍可使用至标示的有效期。建议每次使用后立即盖紧瓶盖,避免污染和试剂挥发。洗涤液2浓缩液开封后请立即加入指定体积的无水乙醇,标记加醇日期,加醇后室温保存,并在6个月内使用完毕。具体有效期以产品外包装标签为准。
提取的DNA中是否含有PCR抑制剂?如何判断?
 本试剂盒包含优化的洗涤体系,经过两步洗涤步骤可有效去除蛋白质、多糖及其他酶促反应抑制剂。提取的DNA可直接用于PCR、qPCR等酶促反应,无需额外纯化。如需验证是否存在PCR抑制剂,可采用以下方法:
  1. 内参扩增对照法: 将已知浓度的标准DNA模板与等量提取的DNA混合后进行PCR扩增,比较扩增效率;

  2. A260/A230比值法: A260/A230比值<1.8提示可能存在胍盐、多糖或其他抑制物残留;

  3. 浓度梯度稀释法: 将提取的DNA进行梯度稀释后进行PCR,观察扩增曲线是否呈线性关系。

唾液DNA提取试剂盒是否支持自动化提取或高通量操作?
本试剂盒基于离心柱法手动操作设计,适合中小通量样本处理(50T规格)。如您需要高通量自动化提取解决方案,雅礼生物可提供磁珠法唾液基因组DNA提取试剂盒产品 YALEPIC® 磁珠法唾液DNA提取试剂盒 CAT#YM26010,请访问雅礼生物官网或联系销售获取详细信息。
提取的DNA能否长期保存?保存条件是什么?
 提取纯化后的唾液基因组DNA可在以下几种条件下长期保存:
  • -20℃保存: 溶解于洗脱液或无核酸酶水中,可保存6~12个月,适合中短期存储;

  • -80℃保存: 可长期保存(数年以上),建议分装为小管以避免反复冻融导致的DNA降解;

  • 4℃短期保存: 提取后3~5天内使用的DNA可暂存于4℃。

如何提高低丰度唾液样本的DNA得率?
 对于低丰度DNA的唾液样本(如老年人、干燥综合征患者、长期服药人群等),可尝试以下优化措施提高得率:
  1. 增加样本起始量: 在不超出离心柱载量(通常≤30 μg DNA)的前提下,适当增加唾液样本体积至600~800 μL;

  2. 优化裂解时间: 将裂解步骤延长至15~20分钟,必要时提高裂解温度至65℃;

  3. 减少洗脱体积: 采用50 μL(而非100 μL)洗脱液洗脱,提高DNA浓度;

  4. 两次洗脱合并: 用30~40 μL洗脱液洗脱两次,合并收集管中的DNA溶液;

  5. 洗脱液预热: 将洗脱液预热至65~70℃后再加入吸附柱,可提升洗脱效率;

  6. 延长洗脱孵育时间: 加入洗脱液后室温放置2~5分钟再离心,确保DNA充分溶解。

试剂盒是否适用于含保存液的唾液样本?
 适用。本试剂盒明确标注适用于“唾液/保存液混合液”样本的基因组DNA提取。商业化唾液保存液,通常包含稳定细胞膜、抑制核酸酶活性的成分,与试剂盒的裂解缓冲体系兼容。建议在使用前咨询保存液供应商确认其成分与本试剂盒的兼容性。对于未经测试的保存液品牌,建议先取少量样本进行预实验验证。
磁珠法唾液DNA提取试剂盒与传统柱式法相比有什么优势?
本试剂盒采用磁珠法纯化技术,与传统的硅胶膜柱式法相比具有三大显著优势:第一,无需离心——磁分离技术彻底规避了离心柱堵塞风险,尤其适合处理粘稠度较高的唾液样本;第二,自动化兼容性好——可无缝对接各类核酸提取仪,实现高通量无人值守自动化提取;第三,得率和纯度双优——磁珠的大比表面积确保DNA结合效率最大化,洗涤步骤充分去除抑制剂,保证产物质量。
提取的DNA可以用于哪些下游应用?
本试剂盒提取的高纯度基因组DNA可广泛应用于qPCR实时荧光定量PCR(用于基因表达分析和病原体检测)、二代测序NGS(用于全基因组测序、靶向测序和外显子组测序)、基因芯片(用于SNP分型和全基因组关联分析)、STR分型(用于法医个体识别和亲子鉴定)以及分子克隆(用于酶切连接等常规分子生物学操作)。
口腔拭子/咽拭子提取的DNA能直接用于PCR实验吗?
完全可以。YALEPIC拭子基因组DNA分离试剂盒专为PCR应用优化,去除抑制物效果显著。提取的DNA可直接作为模板用于常规PCR、qPCR及多重PCR。通常1-2支口腔拭子可获得足够进行100次PCR反应的基因组DNA。如果扩增Ct值偏高,建议检查拭子采样量是否充分,或在洗脱时适当减少洗脱体积以提高DNA浓度。
这个试剂盒是否适用于含有保存液的商业化拭子?
适用。本试剂盒兼容含异硫氰酸胍或非胍盐类病毒保存液、细胞保存液的各类拭子样本。处理含保存液的咽拭子或鼻拭子时,只需取200-400 µL保存液(离心取沉淀),按标准流程操作即可获得高纯度DNA。特别适合新冠、流感病毒检测中,阳性样本复查人基因组DNA的场景。
提取的DNA浓度低或者OD260/280比值不佳怎么办?
DNA得率低常见于拭子采集细胞量不足、消化时间过短或洗脱效率低。建议:① 口腔拭子采样时充分刮擦颊黏膜,确保细胞数;② 蛋白酶K 56℃消化延长至1小时;③ 洗脱前将Elution Buffer预热至60℃,并孵育膜3-5分钟。若OD260/280偏低(<1.7),可能为蛋白残留,可增加一步洗涤或重新纯化。
这个试剂盒能同时提取病毒DNA和人的基因组DNA吗?
可以。对于鼻咽拭子等可能同时存在病原体DNA(如EB病毒、腺病毒)和宿主细胞的样本,本试剂盒能无偏向地共提取总DNA。提取产物可直接用于病毒DNA定量和人类看家基因检测,满足“同管提取、多重检测”的需求,非常适合病原微生物联合筛查。
法医或微量接触性拭子样本能用这个试剂盒吗?
可以。本试剂盒对痕量DNA有良好回收能力,适用于法医生物检材、指纹擦拭拭子、脱落细胞提取。对于极低拷贝数的样本,推荐使用20-30 µL洗脱体积,并配合载体RNA(Carrier RNA)使用,可显著提高微量DNA回收效率,产物满足STR分型需要。
一次提取需要多长时间?是否必须低温离心?
单次提取流程约25-30分钟(不含消化时间),全程可在室温下完成,无需低温离心。标准操作包括:蛋白酶K消化(可预热加速)、结合、两次洗涤和洗脱。所有步骤均为室温,离心最大转速仅需~13,000 rpm,常规台式离心机即可胜任,非常适合现场快速检测车或基层实验室使用。
这款磁珠法口腔拭子 DNA 提取试剂盒能提取多大片段的 DNA?
试剂盒提取的基因组 DNA 完整度高,最大片段可达 15kb,片段完整性好,可满足 NGS 测序、基因克隆等对 DNA 片段要求高的实验。
磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒是否支持自动化工作站高通量提取?
支持,可完美适配移液法、磁棒法两类自动化仪器,搭配 32T/48T/96T 预装规格,适合大批量样本高通量自动化提取作业。
提取实验是否需要使用苯酚、氯仿等有毒试剂?
无需添加苯酚、氯仿等有害有机溶剂,依托专用磁珠与缓冲液体系即可完成纯化,实验安全无污染,操作流程简易。
磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒有哪些规格型号,适合什么使用场景?
共有 4 款规格:常规 96T、预装 A 型 32T、预装 B 型 48T、预装 C 型 96T;32T 适合小批量样本,48T 适配中小型实验室,96T 常规款与预装款适配高通量实验及自动化工作站。
除了口腔拭子,还能提取哪些样本的 DNA?
除常规干燥 / 保护液型口腔拭子外,还适用于咽拭子、口腔漱口水等口腔类样本,适用样本类型广泛。
提取后的 DNA 可用于哪些下游分子实验?
纯化得到的高纯度 DNA 可直接用于定量 PCR、实时荧光 PCR、基因克隆、NGS 高通量测序、印迹杂交等各类分子生物学实验。
完成一次 DNA 提取实验大概需要多长时间?
操作流程简化,无需复杂预处理,1 小时内即可完成从样本处理到 DNA 洗脱的全部实验步骤,省时高效。
试剂盒提取的 DNA 纯度和重复性怎么样?
采用特制纳米磁珠与缓冲液配方,提取效率稳定,批次间重复性强,DNA 纯度达标、无杂质污染,实验数据可靠。
这款采血卡 DNA 提取试剂盒适配哪些样本类型?
本试剂盒专为干血斑、采血卡血片、血液印迹样本设计,仅用于此类样本的基因组 DNA 提取,适配常规科研实验室血液样本前处理需求。
试剂盒不含 RNase A 会影响 DNA 提取效果吗?
不会影响核心 DNA 提取纯度与完整度。试剂盒自带优化缓冲体系,可自主高效去除样本中大部分 RNA 杂质;若需完全降解微量 RNA,可自行搭配通用 RNase A 使用,适配不同实验精度需求。
提取全程需要使用苯酚、氯仿等有毒试剂吗?
不需要。采用改良硅胶膜离心吸附原理,全程规避苯酚、氯仿等有毒有机溶剂,也无需乙醇沉淀步骤,操作安全、实验流程更简洁。
完成一次 DNA 提取大概需要多长时间?
标准化实验流程40min即可从干血斑 / 血片样本中完成基因组 DNA 裂解、结合、洗涤、洗脱全套操作,高效节省实验周期。
提取后的 DNA 可用于哪些下游实验?
提取的高纯度基因组 DNA 可广泛用于限制性酶切、普通 PCR 扩增、Real-Time PCR 实时荧光定量、Southern 印迹杂交、基因文库构建等分子生物学实验。
采血卡DNA提取试剂盒运输和保存有什么特殊要求?
支持常温运输,无冷链运输限制;日常存放只需置于10~30℃室温干燥避光环境即可,储存条件宽松,易存放。
提取的 DNA 会存在蛋白、脂类残留抑制实验吗?
不会。试剂盒独特缓冲体系可最大限度去除杂蛋白、脂类及各类 PCR 抑制性杂质,DNA 纯度达标,无明显实验抑制现象,重复性好。
这款 DNA 提取试剂盒能提取哪些样本?
可通用提取全血、干血片、口腔拭子、唾液、动植物新鲜组织等多种生物样本,无需额外调整试剂配方,通用性极强。
磁珠法多样本DNA提取试剂盒是否适配全自动核酸提取仪?
支持兼容各类常规磁力架、全自动核酸提取仪及高通量核酸提取工作站,标准款与预装 A 型 / B 型 / C 型均可适配自动化提取流程。
提取的 DNA 完整度能达到多少,适合 NGS 测序吗?
提取基因组 DNA 完整度最高可达 150kb,片段完整性好、无明显降解,纯度达标,完全适配 NGS 二代测序、基因克隆等高端分子实验。
磁珠法多样本DNA提取试剂盒储运需要冷藏低温保存吗?
无需冷链,支持常温运输,日常 10~30℃室温密封保存即可,储运便捷,不影响试剂活性与提取效果。
提取后的 DNA 可以直接用于荧光定量 PCR 实验吗?
可以,试剂盒纯化的 DNA 无蛋白、盐分、酚类杂质污染,纯度与浓度稳定,可直接用于 qPCR、普通 PCR 等定量及定性实验。
提取 DNA 产量低、纯度不达标是什么原因?
大概率为样本裂解不充分、洗涤步骤残留乙醇或磁珠混匀不彻底;建议严格按照说明书流程操作,延长裂解时间、充分去除残留乙醇,可显著提升 DNA 产量与纯度。
磁珠法多样本DNA提取试剂盒批次间提取效果稳定性怎么样?
采用标准化生产工艺与纳米磁珠配方,批次间差异极小,实验重复性强,适合长期科研项目及批量检测实验使用。
这款 DNA 提取试剂盒能处理哪些样本类型?
本试剂盒为通用型配方,可兼容植物组织、动物组织、人 / 动物全血、口腔粘膜拭子等多种样本,适配绝大多数常规分子生物学实验样本提取需求。
提取 DNA 全程需要多长时间,操作复杂吗?
采用专利裂解液配方,全程仅需 5 分钟即可完成 DNA 提取,无需离心柱、无需蛋白酶 K 消化、无需复杂试剂配比,操作步骤极简,新手也可轻松操作。
提取后的 DNA 可以直接用于 PCR、qPCR 实验吗?
可以。提取的 DNA 可直接用于 PCR、qPCR等下游实验。
通用型DNA超快速提取试剂盒运输和保存有什么特殊要求吗?
运输支持常温发货,无需冷链;日常存放只需置于2~8℃冰箱冷藏即可,避光保存稳定性更佳,不影响提取效率与 DNA 质量。
不同规格 5ml/20ml/100ml 有什么区别,怎么选择?
配方成分完全一致,仅容量不同。5ml 适合科研试用、小批量预实验;20ml 适合实验室常规日常实验;100ml 适合检测机构、高校科研中心大批量样本提取。
试剂盒是否可以用于多糖多酚类植物样本 DNA 提取?
通用型基础款可满足常规植物样本提取;高多糖、高多酚特殊植物样本,可咨询客服适配专用改良方案,保障提取效果。
通用型DNA超快速提取试剂盒有效期多久,开启后如何保存?
规范 2~8℃冷藏保存,未开封有效期 24 个月;开启后密封避光冷藏,建议 6 个月内使用完毕,性能不受影响。
MagEVO 磁珠法唾液DNA提取试剂盒适用于哪些类型的样本?

本试剂盒适用于新鲜唾液样本、含保存液的唾液样本以及口腔拭子样本。样本收集过程无痛、无创,受试者仅需吐取适量唾液即可完成采样,既适用于医院检验科和第三方医学检验所的批量检测,也适用于科研院校的遗传学研究及法医鉴定机构的人员筛查。

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