磁珠分选纯化FAQ

磁珠分选与纯化回收用于片段筛选与建库。本专题涵盖回收率、片段范围与自动化适配。

雅礼官方解答(26 条)

本试剂盒可以回收的DNA片段大小范围是多少?
可稳定纯化回收100 bp ~ 20 kb区间的所有DNA片段,覆盖主流分子实验片段规格。
完成一次DNA纯化回收需要多长时间?
全程采用快速纯化流程,仅需15分钟即可完成结合、洗涤、洗脱全套操作,高效省时。
试剂盒是否兼容TAE和TBE两种凝胶缓冲体系?
完全兼容,适配所有常规浓度的TAE、TBE琼脂糖凝胶,无体系限制。
单根吸附柱的最大DNA吸附量是多少?
单吸附柱最高可吸附10 μg DNA,上样量充足,满足高浓度样本纯化需求。
纯化后的DNA可以直接用于测序实验吗?
可以,纯化后DNA纯度高、无杂质、完整性好,可直接用于测序、连接转化、体外转录等各类下游实验。
试剂盒的DNA最高回收率可以达到多少?
在标准实验条件下,DNA回收率最高可达80%,远高于普通纯化试剂盒,实验容错率更高。
该试剂盒的运输和保存条件是什么?
支持常温运输,无需冷链;日常可在10-30℃室温环境下密封保存,储存便捷。
除了凝胶回收,还能用于哪些样本纯化?
不仅可用于琼脂糖凝胶DNA回收,还可纯化PCR产物、酶切、连接、探针标记等各类酶反应体系的DNA粗品。
雅礼 MagSEL 磁珠试剂盒能筛选最小多少 bp 的 DNA?可以分选大片段 DNA 吗?
最低稳定回收100bp 以上 DNA,调整磁珠比例最高可筛选至 10kb 大片段基因组 DNA,兼顾小片段 NGS 文库与大片段 gDNA 纯化。
5ml 和 60ml 规格的 NGS DNA 分选磁珠怎么选型?
5ml(YNQ46001-01)适合课题组小试、少量 NGS 建库手工实验;60ml(YNQ46001-03)适配高通量实验室、自动化工作站批量样本分选。
这款 DNA 筛选磁珠可以替代 AMPure XP 进口磁珠吗?
可以,分选原理、操作比例、片段筛选区间与 AMPure XP 一致,纯化回收率对标进口产品,大幅降低 NGS 建库试剂采购成本。
试剂盒储存不小心冷冻结冰了,磁珠还能继续使用吗?
严禁冷冻,磁珠结冰会破坏表面修饰基团,丧失 DNA 吸附能力,冷冻后试剂盒直接报废,需 2~8℃冷藏保存。
纯化后 DNA 回收率偏低是什么原因?
常见 4 点:①磁珠使用前未室温平衡;②磁珠与样本混匀不充分;③磁珠添加比例错误;④磁珠干燥过度,按说明书优化操作即可提升回收率。
MagSEL 试剂盒能不能在自动化核酸工作站上机使用?
完全适配,试剂盒缓冲液配方针对自动化设备优化,主流品牌高通量工作站可直接上机,无需额外调试配方。
分选后产物还有小片段引物二聚体残留怎么处理?
适当降低磁珠添加比例,采用二轮分选法,可高效去除<100bp 引物、接头二聚体杂质,提升 NGS 文库纯度。
试剂盒需要自备哪些试剂?是否含酚氯仿?
仅需自备 80% 无水乙醇(现配现用),配方不含酚、氯仿等有机试剂,操作安全无毒。
除了 NGS 建库,磁珠还能用在什么实验?
可用于普通 PCR 产物纯化、酶切 DNA 回收、质粒纯化等分子生物学实验,是通用型 DNA 纯化磁珠试剂盒。
试剂盒室温可以存放多久?
仅可短暂室温(25℃)放置 1~3 天,长期存放必须 2~8℃冷藏,室温久放会加速磁珠沉降失效。
同批次磁珠分选片段大小出现偏差怎么解决?
校准移液枪保证加样精准,严格遵循说明书磁珠配比,充分涡旋混匀磁珠悬液后再分装配液。
磁珠可以重复回收、二次使用吗?
本试剂盒磁珠为一次性使用耗材,吸附 DNA 后无法脱附再生,不能重复利用,避免影响后续分选效果。
PCR产物纯化和凝胶DNA回收可以用同一个试剂盒完成吗?
可以。YALEPIC® MagEVO磁珠法PCR产物/琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒特别设计为一盒两用——既适用于从TAE/TBE琼脂糖凝胶中回收目的DNA片段(凝胶回收模式),也适用于直接从PCR反应体系、酶切体系、连接反应体系等溶液中纯化DNA(纯化模式)。两种模式下回收效率均可达到85%以上,大幅降低了实验室的试剂盒采购成本与库存压力。
磁珠法试剂盒和传统的离心柱法有什么区别?为什么推荐磁珠法?
核心区别在于固液分离方式和自动化兼容性:
  • 离心柱法:依赖高速离心将DNA结合于硅胶膜,需多次离心操作,手工操作耗时,且难以适配高通量自动化设备。

  • 磁珠法(本产品):利用纳米磁珠在磁场下的快速响应实现固液分离,无需离心机,操作更简便,可轻松适配液体处理工作站、磁棒法自动提取系统及96通道自动化平台,特别适合处理通量高、样本量大的实验室场景。

本试剂盒对DNA片段大小有什么限制?回收效率如何?
本试剂盒可高效回收80 bp以上的DNA片段,针对不同片段大小的回收效率为:
DNA片段大小 预计回收效率
50–80 bp 约50–60%
80 bp–10 kb ≥85%
10–20 kb 约60–75%

建议在凝胶回收模式中,切胶时尽量快速操作以减少紫外光对DNA的损伤,避免长时间照射导致回收效率下降–。

该试剂盒是否支持自动化高通量操作?
支持。本产品特别设计用于与自动化工作站或磁棒法自动磁珠提取系统配套使用,兼容主流自动化提取平台(如KingFisher Flex、Tecan、Hamilton、YALEPIC等)。提供96T标准版及32T/48T/96T预装板版本,预装版组分已预分装至96孔深孔板,开箱即用,大幅减少手工准备时间。无论是克隆筛选中的批量胶回收、NGS文库构建中的PCR产物纯化,还是高通量筛选中的基因分型样本前处理,均可实现全自动高效运行。
该试剂盒在常温下保存和使用,稳定性如何?
稳定性非常可靠。本试剂盒支持常温运输和10~30℃室温保存,无需冷链。在满足室温、避光、密封条件下,有效期可达18个月。各缓冲液组分经过严格的常温稳定性验证,即使夏季运输7天内仍可保证性能稳定。常温存储的特性使其尤其适合基层实验室、野外采样基地、第三方检测机构等冷链条件有限的实验场景。
纯化后的DNA可以用于哪些下游实验?纯度能达到什么水平?
纯化后的DNA可直接用于多种下游分子生物学实验,包括Sanger测序、二代测序(NGS)文库构建、PCR/qPCR扩增、酶切反应(限制性内切酶/连接酶)、TA克隆/同源重组、DNA标记与探针制备、体外转录、微阵列分析等。

行业通用技术要点

以下内容为业界通用的技术原理与操作经验,用于补充理解,不构成对具体产品的指向。

磁珠法片段筛选的原理是什么?
在 PEG 与盐构成的结合环境中,长片段 DNA 因电荷更多、更易被磁珠吸附,短片段留在上清;通过磁珠与样本的体积比(如 0.6×–1.8×)控制回收的片段阈值,实现 NGS 文库大小筛选。
回收率低通常是什么原因?
磁珠结合比或 PEG/盐条件不当、洗涤过烈、洗脱不充分;建议按目标片段范围校准磁珠体积、充分洗涤并配合预热洗脱缓冲液提高回收。

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YALEPIC® 磁珠法DNA片段筛选试剂盒
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