核酸定量质检FAQ

YALEPIC® 1×dsDNA HS Assay Kit与传统的紫外分光光度法（如NanoDrop）相比有何优势？

 本试剂盒采用荧光染料法特异性结合dsDNA，相比紫外分光光度法具有三大优势：（1）高选择性——只检测dsDNA，不受RNA、游离核苷酸、蛋白质等杂质干扰；（2）高灵敏度——可检测低至100 pg/µl的dsDNA样本，优于紫外法的检测下限；（3）宽动态范围——在100 pg/µl~100 ng/µl范围内保持良好线性，无需多次稀释即可准确定量。

本试剂盒是否兼容所有型号的Qubit荧光仪？

 是的。本试剂盒可完美适配Qubit 1.0、Qubit 2.0、Qubit 3.0和Qubit 4.0等全系列Qubit荧光仪。同时也可兼容具备荧光检测模块的各品牌荧光酶标仪。使用Qubit时请选择检测程序中的“1×dsDNA High Sensitivity”模式进行仪器校正和样品测定。

试剂盒中的标准品如何正确使用？

 本试剂盒提供两种标准品：Standard S1（0 ng/µl）和Standard S2（10 ng/µl）。正确使用步骤：（1）使用前上下颠倒混匀后瞬时离心数秒，请勿涡旋振荡；（2）分别吸取190 µL工作液至Qubit专用管中；（3）各加入10 µL Standard S1和Standard S2至相应管中；（4）涡旋混匀2~3秒后瞬时离心，避光孵育2分钟后再进行仪器校正。每次使用Qubit荧光仪检测时，必须使用配套试剂的标准品重新标定。

本试剂盒对哪些常见污染物具有良好的耐受性？

 本试剂盒对以下常规污染物均具有良好的耐受性：（1）盐类——NaCl、KCl等；（2）蛋白质——BSA、酶类等；（3）RNA——细胞总RNA、rRNA等；（4）游离核苷酸——dNTPs、NTPs等；（5）去污剂——Triton X-100、Tween-20、SDS等；（6）有机溶剂——乙醇、DMSO等。这一特性使得用户可以直接对PCR扩增产物和未经纯化的DNA样本进行定量，无需额外纯化步骤。

试剂如何正确保存？拆封后是否需要特殊处理？

 完整试剂盒保存于2~8℃，避光。拆封后：（1）Working Solution（预混工作液）建议2~8℃避光保存，避免反复冻融；（2）Standard S1和Standard S2请2~8℃避光存放；（3）荧光染料均存在淬灭问题，所有组分使用前后均需注意避光操作，使用后立即盖紧管盖放回冰箱；（4）请务必在规定时间内完成样品检测，避免因荧光淬灭导致结果偏差。

待测样本的体积和用量有什么要求？

 本试剂盒每管反应体系的终体积为200 µL，其中工作液体积为180~199 µL，待测样本体积为1~20 µL。建议样本用量为1~10 µL，可根据样本预估浓度灵活调整。使用前请校准移液器，确保取样准确。检测完成后，请根据以下公式计算样本原始浓度：（仪器读数浓度）×（工作液体积+样本体积）/ 样本体积。

本试剂盒与Thermo Fisher的Qubit dsDNA HS Assay Kit性能对比如何？

 YALEPIC^® 1×dsDNA HS Assay Kit在核心性能指标上与Thermo Fisher Qubit dsDNA HS Kit具有高度可比性：在0.1~100 ng dsDNA范围内均保持良好的线性关系（R² > 0.99）；对RNA的选择性高，RNA干扰极小；对盐、蛋白质、去污剂等常见污染物的耐受性相当。本试剂盒提供500次检测规格，单次检测成本更具优势，是Qubit dsDNA HS Kit的高性价比替代方案。

荧光强度随时间变化吗？检测结果是否稳定？

 荧光染料存在天然的淬灭现象，荧光强度会随孵育时间延长而缓慢衰减。为获得稳定可靠的结果，建议：（1）标准品与待测样品加入后统一避光孵育2分钟，然后在30分钟内完成所有检测；（2）尽量避免样品和标准品之间温度差异过大；（3）检测过程中不要长时间暴露在强光下。严格按照上述条件操作，批间和批内的检测结果具有良好的稳定性和可重复性。

试剂盒可以检测哪些类型的dsDNA样本？

 本试剂盒适用于各类来源的双链DNA样本的定量检测，包括但不限于：（1）NGS文库——高通量测序的input DNA文库定量；（2）PCR/qPCR产物——扩增产物的dsDNA定量；（3）基因组DNA——提取自细胞、组织、血液等样本的gDNA；（4）质粒DNA——质粒提取产物及酶切产物；（5）cDNA——反转录获得的cDNA产物；（6）DNA标准品——各类型dsDNA标准品。试剂盒对样本的来源物种（人、动物、植物、微生物、病毒等）无选择性，均可适用。

为什么我的标准品出现了“标准品错误”或负值？如何解决？

 出现标准品错误或负荧光值通常有以下原因及解决方法：（1）标准品准备不充分——使用前未充分混匀，请上下颠倒后瞬时离心；（2）温度影响——检测对温度敏感，请确保标准品和样品在室温下平衡后再进行检测；（3）移液误差——请使用已校准的移液器操作；（4）气泡干扰——混匀后请瞬时离心去除气泡；（5）标准品变质——检查标准品是否在有效期内，是否有反复冻融或污染。如果问题持续，请检查标准品的原始荧光值（RFU），确认待测样品的荧光值落在标准品的荧光值之间。

100bp Plus DNA Marker与普通100bp DNA Marker有什么区别？

雅礼生物YALEPIC 100bp Plus DNA Marker的条带覆盖范围更广（100-2000bp共10条带），优于普通100bp Marker的100-1000bp覆盖范围。其中500bp条带设计为增强亮带（100ng/5μl），便于实验中的快速定位和半定量分析。此外，本产品已预混1×Loading Buffer，即开即用，操作更为便捷。

100bp DNA Marker电泳条带拖尾或模糊怎么办？

电泳条带出现拖尾或模糊，通常由以下原因引起，可按对应方案处理：

问题原因	解决方案
电泳缓冲液陈旧	更换新鲜1×TAE或TBE缓冲液
凝胶浓度不合适	100bp Marker建议使用1-1.5%琼脂糖凝胶
上样量过多	按照说明书取5μl上样即可
DNA样品降解	避免核酸酶污染，使用无核酸酶的耗材

电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低、pH值上升，会导致缓冲能力下降，从而出现条带模糊或不规则迁移现象，建议每次实验都使用新鲜缓冲液–。

YALEPIC 100bp Plus DNA Marker的条带亮度不均匀正常吗？

 正常。本产品特别设计了500bp增强亮带（100ng/5μl），该条带浓度是其他普通条带（约50-40ng/5μl）的2倍左右，因此电泳后500bp条带明显更亮。这一设计目的是为实验人员提供清晰的参考条带，便于快速定位和准确定量目的DNA片段。其余条带亮度略弱但清晰可辨，不影响使用。这是同类产品中广泛采用的设计方案。

100bp Plus DNA Marker可以在PAGE胶上使用吗？

 不建议。本产品专为琼脂糖凝胶电泳设计优化，不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。如需PAGE分析，建议选用适配的非变性PAGE专用DNA Marker。此外，本产品也不能用于变性胶中的RNA分析，因为双链DNA在变性条件下会解开为单链，无法准确指示RNA分子量。

如何正确保存DNA Marker以保证长期稳定使用？

雅礼生物YALEPIC 100bp Plus DNA Marker支持两种保存方式：2~8℃冷藏可保存2年，-20℃冷冻可保存3年。实际使用建议如下：

• 短期频繁使用（如每周使用）：置于2~8℃冷藏，取用方便，无需反复冻融
• 长期储备（如备用库存）：置于-20℃冷冻保存，可最大限度延长有效期
• 使用前务必充分溶解并混匀，避免浓度不均
• 避免反复冻融，分装保存可进一步保证稳定性

本产品是否兼容荧光染料（如GelRed、SYBR Green）？

兼容。雅礼生物YALEPIC 100bp Plus DNA Marker适用于常用的核酸荧光染料，包括GelRed、SYBR Green、GoldView等。电泳完成后可在凝胶成像系统中使用对应的激发光源进行观察。建议在加样前将DNA Marker与染料混合，或电泳后对凝胶进行染色，两种方式均可获得清晰的条带图像。

YALEPIC 100bp Plus DNA Marker使用哪种Loading Buffer？

 本产品为即用型，已预混1×Loading Buffer，用户无需额外添加。该Loading Buffer配方经过优化，在电泳过程中可保证DNA样品顺利沉入加样孔，同时在电泳过程中形成清晰的指示前沿，便于监控电泳进程。

使用100bp DNA Marker时，电泳条带分离效果不好是什么原因？

 条带分离效果不理想，常见原因及解决方法：

1. 琼脂糖浓度不合适：100~2000bp片段建议使用1%~1.5%琼脂糖凝胶，浓度过低会导致小片段分辨率不足，浓度过高则会拖慢电泳速度
2. 凝胶制备不均匀：制胶时确保琼脂糖完全溶解并充分混匀后再倒胶
3. 电泳电压过高：过高电压会导致凝胶发热，影响条带分辨率，建议电压控制在5-8V/cm
4. 上样量不当：严格按照5μl上样量使用，过多会导致条带拖尾

建议使用新鲜制备的凝胶，并定期更换电泳缓冲液，以获得最佳的条带分离效果

YALEPIC® 15K DNA Marker可以用于RNA电泳吗？

不建议用于RNA电泳的分子量判断。DNA Marker中的双链DNA在普通琼脂糖凝胶电泳中保持双链结构，而RNA的迁移率与相同分子量的DNA不同，直接使用会导致分子量估算不准确。若仅需粗略观察RNA条带分布，可临时使用，但不推荐用于精确定量。对于变性胶电泳，DNA双链会解开，绝对不推荐使用DNA Marker指示RNA大小。

为什么我的DNA Marker电泳条带模糊、弥散或拖尾？

条带模糊通常由以下原因导致：①电泳缓冲液陈旧：多次使用后离子强度降低、pH上升，缓冲能力下降，建议每次更换新鲜缓冲液；②核酸酶污染：使用时请使用灭菌枪头，用后及时拧紧管盖；③凝胶质量问题：建议使用高质量琼脂糖并确保凝胶凝固均匀；④电压过高：建议电泳电压4-10V/cm，电压过高会产生过多热量导致条带扩散。

YALEPIC® 15K DNA Marker应该如何上样？上样量是多少？

本产品为即用型产品，已含有1×Loading Buffer，无需额外添加或加热处理。常规电泳条件下：加样孔孔宽小于6mm时，每次取5µl直接上样即可；如加样孔较宽，可适当增加至8-10µl–。建议凝胶浓度为1%-2%琼脂糖凝胶，电压4-10V/cm，电泳时间25-60分钟–。

YALEPIC® 15K DNA Marker与其他品牌15kb DNA Marker相比有何优势？

①条带数量更多：11条带覆盖100bp~15kb，优于多数竞品的7-8条带，分辨率更高；②双重指示带设计：500bp亮带+1500bp次亮带，便于快速定位和浓度估算；③预混即用型：无需自行配制Loading Buffer，开盖即用；④浓度梯度设计：不同位置条带浓度差异化设置，便于半定量分析。

产品的保存条件和有效期是多久？是否需要分装？

2~8℃保存有效期为2年，-20℃保存有效期为3年。建议日常使用频率高时暂存于2~8℃，长期不用则-20℃保存。为避免反复冻融导致的条带降解，建议首次使用时分装成小规格单次使用量保存。

YALEPIC® 15K DNA Marker与YALEPIC®系列其他DNA Marker如何选择？

YALEPIC® 15K DNA Marker覆盖100bp~15kb，适合中大型DNA片段检测场景（如质粒酶切分析、大片段PCR产物鉴定）。如实验片段范围在100bp~2kb以内，建议选择YALEPIC^® 2K DNA Marker以获得更高的分辨率；若检测片段在15kb以上，推荐选择YALEPIC^® 10K或更高规格产品。请根据目的DNA片段大小选择最匹配的产品以获取最佳分辨率。

条带亮度不均匀或某些条带偏弱是什么原因？

本产品设计的500bp条带浓度为100ng/5µl（亮带），1500bp条带75ng/5µl（次亮带），其他条带40-50ng/5µl。这一差异化浓度设计用于方便快速定位和半定量估算。如出现预期之外的不均匀现象，请检查：上样量是否准确（推荐5µl）、凝胶浓度是否合适（推荐1%琼脂糖凝胶）、缓冲液是否新鲜。

能否与GelRed、SYBR Green等荧光染料兼容？

兼容。YALEPIC^® 15K DNA Marker可与GelRed、SYBR Green、Goldview等常见核酸荧光染料配合使用。但需注意：不同染料对DNA的染色效率不同，可能影响条带亮度表现，建议首次使用某类染料时进行预实验优化曝光参数。若为EB染色，建议使用终浓度0.5µg/ml的EB溶液染色15-20分钟后观察。

产品中是否有可见的沉淀物？如何处理？

正常产品应为澄清透明溶液。如发现沉淀，可能原因包括：①运输过程中温度波动导致SDS沉淀；②长期保存后出现微量沉淀。处理方法：室温放置片刻或37℃温和加热5-10分钟，上下轻柔颠倒混匀后即可正常使用。不建议剧烈震荡或沸水浴加热，以免DNA变性。

YALEPIC® 15K DNA Marker可以用在哪些具体实验场景中？

典型应用场景包括：①PCR产物的片段大小验证——电泳后与Marker比对确认扩增片段是否符合预期；②质粒DNA酶切鉴定——通过酶切片段大小确认重组质粒构建是否正确；③基因组DNA酶切图谱分析——Southern blot前的片段大小筛选；④DNA片段回收前的质量评估——确定目的条带位置便于切胶回收；⑤连接产物、酶切产物的片段大小鉴定与浓度半定量分析。

YALEPIC 1Kb DNA Marker适用于哪些类型的电泳？上样量是多少？

本产品专为琼脂糖凝胶电泳设计，不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。作为即用型产品，已预混1×Loading Buffer，每次电泳直接取5 μl上样即可。如遇加样孔较宽的情况，可适当增加上样量至10 μl以保证条带亮度。

YALEPIC 1Kb DNA Marker的条带组成和浓度分别是多少？

本Marker由8条双链DNA片段组成，分子量分别为1000 bp、2000 bp、3000 bp、4000 bp、5000 bp、6000 bp、8000 bp、10000 bp。各条带浓度设计为：4000 bp条带100 ng/5 μl（亮带指示），6000 bp条带40 ng/5 μl（略弱），其余6条条带均为50 ng/5 μl。该浓度配置便于同时进行片段大小定位和半定量分析。

我应该选择多少浓度的琼脂糖凝胶来跑1kb DNA Marker？

推荐使用1%琼脂糖凝胶进行电泳，可实现1000 bp至10000 bp范围内各条带的有效分离。如需在低分子量区域获得更高的分辨率，可将凝胶浓度上调至1.5%~2%。凝胶浓度过大会导致大片段条带的迁移受阻，浓度过低则会导致小片段条带分离不充分。

电泳后发现DNA Marker的条带出现弥散或模糊不清，可能是什么原因？

可能原因包括：①电泳缓冲液使用次数过多，离子强度下降导致缓冲能力减弱，建议每次电泳使用新鲜TAE或TBE缓冲液；②电泳电压过高（超过20 V/cm）导致条带扩散和弥散；③上样量不足或过量；④琼脂糖凝胶浓度与目的片段不匹配。请按照说明书推荐的5 μl上样量和1%凝胶浓度操作，并控制电泳电压在适宜范围内。

电泳时Marker的部分条带（特别是小片段条带）变弱或丢失，如何解决？

小片段条带变弱是电泳过程中的常见现象，主要原因是小片段DNA在电泳中迁移速度更快，当DNA条带迁移至凝胶前沿与核酸染料区域时，染料与DNA的结合可能发生解离，导致荧光信号减弱–。建议措施：①使用新鲜配制的电泳缓冲液并保持合适的离子强度；②适当缩短电泳时间或降低电压；③在凝胶中加入终浓度为0.5 μg/ml的EB或等效核酸染料；④选择分辨率更高的凝胶成像系统进行观察。

YALEPIC 1Kb DNA Marker可以在聚丙烯酰胺凝胶中使用吗？

不建议。本产品的条带分子量范围覆盖1000 bp至10000 bp，在琼脂糖凝胶中可获得理想的分离效果，但在非变性聚丙烯酰胺凝胶中，该分子量范围内的DNA片段迁移行为与琼脂糖凝胶存在显著差异，条带分离效果无法保证。如需在PAGE胶中使用DNA分子量标准，建议选择针对PAGE体系优化的专用Marker。

该Marker应该如何保存？有效期是多久？反复冻融会影响使用效果吗？

本产品在2~8℃条件下避光保存可稳定两年；在-20℃冷冻保存有效期可延长至三年。建议按日常用量进行小量分装后冷冻保存，避免整管反复冻融。反复冻融可能造成DNA链断裂或降解，进而影响条带清晰度和浓度准确性。日常使用的工作液可保存于2~8℃，建议在4周内用完。

YALEPIC 1Kb DNA Marker与其他品牌的1kb DNA Ladder相比有什么优势？

本产品以酶切质粒DNA工艺制备，相比传统的PCR产物混合型Marker，条带分子量定位更准确，背景更干净，无非特异性杂带干扰。产品已预混1×Loading Buffer，开盖即用，无需额外稀释或配制，节省实验时间。同时，4000 bp条带以100 ng/5 μl设计为超亮指示带，在电泳图像中辨识度极高，便于快速定位参照位置。在价格方面，雅礼生物以极具竞争力的市场定价，为科研用户提供高性价比的选择。

该Marker是否含有核酸酶？会不会降解我后续实验中的DNA样品？

YALEPIC 1Kb DNA Marker在制备过程中经过严格的核酸酶失活处理，不含残留核酸酶活性。该产品仅作为电泳时的分子量参照，不会对同批次上样的样品DNA造成降解。但为避免交叉污染，建议电泳时使用专用的加样枪头和上样缓冲液，并遵循标准的电泳操作规范。

如果电泳后发现条带出现拖尾或微笑效应，该如何调整？

条带拖尾或微笑效应通常与以下因素有关：①凝胶配制不均匀或未完全凝固即上样；②电泳槽内缓冲液液面未完全淹没凝胶面；③电泳过程中电压不稳定或电流过大；④上样量过载。建议：确保凝胶完全凝固后再移除梳子；电泳缓冲液需完全覆盖凝胶表面1~2 mm；控制恒压电泳在80~120 V范围内；按说明书推荐的上样量（5 μl）上样，避免过载。

YALEPIC 2K DNA Marker适用于哪种凝胶电泳？能否用于聚丙烯酰胺凝胶电泳？

 本产品专为琼脂糖凝胶电泳设计，不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。在1%琼脂糖凝胶、电压6-8V/cm的条件下电泳20-40分钟，条带分离效果最佳。聚丙烯酰胺凝胶的分辨率虽高，但DNA Marker在其中的迁移特性与琼脂糖凝胶不同，可能导致片段大小判断不准确。

使用YALEPIC 2K DNA Marker时，上样量是多少？需要额外添加Loading Buffer吗？

 本产品为即用型，已预混1×Loading Buffer，每次电泳直接取5µl上样即可，无需额外配制或添加Loading Buffer-1。如果是小型凝胶或孔道较小，可根据实际情况适当调整至2-3µl。

为什么750bp条带比其他条带更亮？会影响我的定量判断吗？

 750bp条带是设计为加亮参照条带，其浓度为100ng/5µl，而其他条带浓度为50ng/5µl。这一设计便于在电泳结果中快速定位参照条带，同时可辅助目标DNA片段的半定量分析。如需准确定量，建议将目标条带亮度与750bp加亮条带进行对比参照。

YALEPIC  2K DNA Marker出现条带模糊或拖尾，可能是什么原因？如何解决？

条带模糊或拖尾通常与以下因素有关:

可能原因	解决方案
琼脂糖凝胶浓度不合适	建议使用1%琼脂糖凝胶，浓度过高或过低都会影响分辨率–
凝胶配制不均匀或气泡过多	重新制胶，确保琼脂糖完全溶解且无气泡
电泳电压过高	采用6-8V/cm的中等电压，避免产热过高导致条带弥散–
Marker反复冻融导致降解	分装保存，避免反复冻融
上样量过多	控制上样量为5µl，过多会导致条带扩散或相邻泳道交叉污染

YALEPIC® 2K DNA Marker 和 DL2000 DNA Marker 有什么区别？

 YALEPIC® 2K DNA Marker与DL2000 DNA Marker在条带组成上相同，均为100bp/250bp/500bp/750bp/1000bp/2000bp共6条带，产品规格和即用型设计也类似。主要区别在于：

• 工艺来源： YALEPIC® 2K DNA Marker采用酶切质粒DNA工艺，条带清晰度与批次稳定性高
• 品牌定位： 雅礼生物提供更具性价比的产品选择
• 从使用层面看：两者可直接替代使用，实验方案无需调整

YALEPIC 2K DNA Marker的有效期是多久？如何正确保存？

 本产品在2~8℃条件下可保存24个月，在-20℃条件下可保存36个月。建议收货后根据使用频率选择保存方式——如频繁使用，可存放于4℃；如长期未用，建议分装后于-20℃长期保存，避免反复冻融导致DNA降解。

YALEPIC 2K DNA Marker可以用于DNA定量吗？

 可以用于半定量分析。本产品中750bp加亮条带浓度为100ng/5µl，其余条带均为50ng/5µl。通过比对各泳道目标条带与Marker中对应大小条带的亮度，可对目标DNA浓度进行估算。如需精确定量，建议使用荧光定量法（如Qubit或qPCR）。

YALEPIC 2K DNA Marker出现条带亮度异常，可能是什么原因？

 条带亮度异常通常有以下几种情况：

• 所有条带亮度都很弱： 可能是电泳时间过长导致条带扩散，或EB/核酸染料染色不足
• 仅底部两条带亮、上方条带弱： 可能是Marker出现降解，建议更换新的Marker
• 条带亮度不均一： 750bp明显更亮属正常现象；但若其他条带也出现异常亮度差异，建议检查凝胶配制均匀性和电泳条件

YALEPIC 8K DNA Marker 是即用型的吗？需要额外加 Loading Buffer 吗？

是的，本品为即用型产品，已预混 1× Loading Buffer。使用时无需额外配制，直接取 5 µl 上样即可进行琼脂糖凝胶电泳，十分方便快捷。

8K DNA Marker 的条带组成和浓度是怎样的？

本品由 10 条双链 DNA 片段组成：100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、5000 bp、8000 bp。其中 750 bp 条带浓度为 100 ng / 5 µl，显示为亮带；1500 bp 条带浓度为 40 ng / 5 µl；其余条带浓度均为 50 ng / 5 µl。

8K DNA Marker 适用于哪些电泳类型？

本产品适用于琼脂糖凝胶电泳，不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。如需对双链 DNA 在聚丙烯酰胺凝胶中进行高分辨率分析，建议选择专用的 PAGE DNA Marker。

如何保存 8K DNA Marker？能保存多久？

本品在 2~8℃ 条件下可保存两年，在 -20℃ 条件下可保存三年。建议避免反复冻融，请勿加热使用。运输过程中采用冰袋运输。

电泳时出现条带模糊或不清晰，可能是什么原因？应如何解决？

常见原因及解决方案包括：① 电泳缓冲液陈旧：离子浓度降低、pH 值上升会导致条带模糊，建议及时更换新鲜缓冲液；② 琼脂糖凝胶制备不当：确保琼脂糖完全溶解，胶体充分冷却凝结（30~60 分钟）；③ 上样量不合适：可尝试用水稀释 2-3 倍后再上样 8-10 µl。

8K DNA Marker 是否兼容 GelRed、SYBR Green 等荧光染料？

是的，本品兼容 GelRed、SYBR Green、EB 等常见 DNA 荧光染料，可在常规琼脂糖凝胶电泳染色体系中使用。

DNA Marker 条带出现降解或拖尾现象，如何预防？

条带降解或拖尾通常由核酸酶污染引起。建议使用无核酸酶的移液枪头和离心管分装保存，避免反复冻融，操作过程中注意防止污染。

YALEPIC 8K DNA Marker 与其他品牌同规格 Marker 相比有何优势？

本品采用酶切质粒 DNA 工艺制备，相比 PCR 产物混合型 Marker，分子量准确性更高、条带更清晰锐利、背景干净，批次间稳定性优异。同时产品为即用型预混 Loading Buffer 设计，节省实验准备时间。

8K DNA Marker 能否用于 RNA 电泳的分子量参照？

不建议。DNA Marker 为双链 DNA 分子，用于 RNA 变性胶电泳时双链结构会解开，指示大小不准确。如需 RNA 分子量参照，建议使用专用的 RNA Marker。但若仅作普通琼脂糖凝胶电泳粗略参考，也可大致使用。

该产品可以用于哪些应用场景？

本品适用于 PCR 产物鉴定、酶切片段大小分析、基因组 DNA 片段估算、质粒 DNA 鉴定等常见分子生物学实验。覆盖 100-8000 bp 的宽分子量范围，可满足常规实验中的大部分 DNA 片段分析需求。

YALEPIC® dsDNA HS Assay Kit与传统的紫外分光光度法（A260）相比有什么优势？

YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit采用荧光染料结合法，具有以下核心优势：①高灵敏度——检测下限可达100 pg/µl，远低于紫外法的检测限（约2-5 ng/µl）；②高特异性——只结合双链DNA，不受RNA、游离核苷酸、蛋白质等的干扰，在RNA污染严重或DNA降解严重的样本中定量更准确；③耐受污染物——可耐受盐类、去污剂、蛋白质等多种常规污染物，适用于复杂样本的直接定量。

该试剂盒可以用于NGS文库的定量吗？是否可以替代Qubit？

是的。YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit专为高灵敏度dsDNA定量设计，与Qubit dsDNA HS Assay Kit原理相同、性能相当，完全兼容Qubit荧光仪（包括Qubit 3.0、Qubit 4.0、Qubit Flex），可有效替代进口品牌用于NGS文库构建过程中的文库定量。同时兼容荧光酶标仪，适用于高通量样品检测场景。本产品已应用于国内多家NGS检测机构的日常生产中。

试剂盒能检测的最低DNA浓度是多少？可以检测多少体积的样品？

该试剂盒对dsDNA样品的最低检测浓度为100 pg/µl。实际可检测的最低DNA总量取决于加入样品的体积：标准操作中推荐加入1-20 µl样品至200 µl检测体系中，因此理论上最低可检测约0.1 ng的dsDNA总量。如果样品浓度低于检测下限，建议通过真空浓缩或乙醇沉淀等方法对样品进行浓缩后再行检测。

试剂盒能否耐受去污剂、盐类等污染物？哪些污染物可能对检测产生干扰？

YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit具有良好的污染物耐受性：可耐受高达100 mM NaCl、100 µg/ml BSA、0.1% Triton X-100、5% DMSO及10 µM游离核苷酸。然而，高浓度的去污剂（如超过0.5%的SDS）或有机溶剂可能轻微抑制荧光信号。如需处理高污染物样本，建议将样品稀释至污染物耐受浓度以内再进行定量，或先使用DNA纯化柱进行纯化。

该试剂盒的标准曲线如何建立？是否必须每次实验都做标准曲线？

试剂盒提供两个预稀释的dsDNA标准品（Standard #1和Standard #2），在Qubit荧光仪上可通过内置程序自动建立两点标准曲线。建议每次实验都重新建立标准曲线，因为荧光信号可能因工作液的配制精度、环境温度等因素产生波动。使用酶标仪时，需自行配制梯度稀释的标准品并拟合标准曲线（四参数或线性回归方程）。

出现“标准品错误”或荧光值异常偏低该如何排查？

建议按以下步骤排查：①确认工作液是否正确配制，荧光检测试剂用量是否准确；②检查标准品的原始荧光值（RFU），确认样品荧光值是否落在标准品的荧光值区间内；③该检测对温度敏感，高温环境下荧光信号可能下降，确保样品和标准品在室温平衡后再检测；④避免使用已多次反复冻融的工作液；⑤确认所用仪器型号的检测参数设置无误。

该试剂盒能否用于ssDNA或RNA的定量？对其他核酸的特异性如何？

该试剂盒对双链DNA具有高度选择性，荧光染料特异性结合dsDNA。在RNA存在条件下的交叉反应信号小于1%，在ssDNA存在条件下的交叉反应信号小于2%。因此，本产品专用于dsDNA的精确定量，不适用于ssDNA或RNA的定量。如需进行总核酸定量或RNA定量，建议选用雅礼生物其他对应品类的检测试剂盒。

试剂盒的有效期是多久？如何正确储存？

试剂盒在2-8℃避光保存条件下有效期为12个月（自生产日期起算）。其中YALEPIC^® dsDNA HS Reagent组分对光照敏感，务必避光保存。严禁将试剂盒或任何组分冷冻保存。工作液在稀释后建议在4小时内使用完毕，如需短期储存（不超过1周），可2-8℃避光保存，但荧光信号可能存在衰减。

该试剂盒可以用于FFPE样本提取的DNA定量吗？

可以。FFPE样本提取的DNA通常存在不同程度的降解，且常含有PCR抑制剂残留。YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit对降解DNA片段仍具有良好的荧光响应，并能耐受FFPE样本中可能残留的抑制剂（如二甲苯、乙醇等）。对于高度降解的FFPE-DNA，建议将标准品稀释至与样品相近的片段大小范围，以获得更准确的定量结果。

该试剂盒适用于哪些荧光检测仪器？请列出具体型号。

YALEPIC^® dsDNA HS Assay Kit兼容以下荧光检测仪器：①Qubit系列荧光仪：Qubit 3.0、Qubit 4.0、Qubit Flex、Qubit 2.0；②荧光酶标仪：BioTek Synergy系列、Molecular Devices SpectraMax系列、Tecan Infinite系列、BMG CLARIOstar系列及其他配备荧光检测模块（激发波长约480-500 nm，发射波长约520-540 nm）的酶标仪。使用前请确认仪器荧光通道设置是否匹配。

YALEPIC® Gel Redness与传统EB染料相比，在安全性上有哪些具体区别？

传统EB（溴化乙锭）具有强诱变性，属于高度致癌危险品，实验操作需佩戴全套防护并在特定区域处理废液。YALEPIC^® Gel Redness采用独特的油性大分子技术，分子量约1400，无法穿透活细胞细胞膜。艾姆斯氏试验（Ames Test）已证实，该染料在凝胶染色浓度下完全无诱变性，生物安全性远高于EB，废液处理成本更低，对实验人员和环境更加友好。

换了这款无毒染料后，实验室现有的紫外凝胶成像仪还能用吗？

可以，完全无需更换设备。YALEPIC^® Gel Redness的光谱特性与传统EB染料完全相同，均在约300nm紫外光波长下激发，发射波长为600nm左右。您现有的凝胶成像仪、紫外透射仪及滤光片均无需任何调整，实现从EB到安全染料的“零成本”平稳过渡。

该产品对凝胶电泳中DNA片段的迁移有没有影响？染色背景高吗？

几乎没有影响。该染料在凝胶中与核酸结合后，不会显著增加核酸的分子量负担，对各种大小片段的电泳迁移干扰极小，可确保电泳条带位置准确。同时因其与游离核酸的非特异性结合极低，背景噪音控制出色，配合优良的灵敏度，可轻松获得高对比度、低背景的清晰凝胶成像结。

胶染法和泡染法怎么选？YALEPIC® Gel Redness支持哪种？

两种方法均支持。若追求便捷与高效，推荐胶染法，即在制备凝胶时直接加入染料（无需等待凝胶降温），一步到位–。若需要对已电泳完成的凝胶进行定量分析或进行后续胶回收实验，泡染法（电泳后将凝胶浸没于稀释染料中染色）可能更为合适，避免染料对核酸回收效率的影响。请根据具体实验需求和流程选择最适方法。

该产品适用于RNA染色吗？灵敏度如何？

适用。YALEPIC^® Gel Redness 对双链DNA（dsDNA）、单链DNA（ssDNA）以及RNA均具有良好的染色效果。其灵敏度高，适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳中各种浓度RNA样本的检测。

YALEPIC® Gel Redness的货号和规格有哪些？如何订购？

该产品提供多种规格满足不同实验需求，当前页面展示规格如下：

货号	规格	目录价
YDG19019	500µl	450.00元
YDG19019-05	5×1ml	3800.00元

如需订购或咨询，欢迎拨打咨询热线 0512-66256010，或发送邮件至 info@yalibiotech.com，雅礼生物销售团队将为您提供专业的产品选型建议与技术支持。

染料稀释后的 1× 工作液能长期存放吗？

稀释后工作液建议现配现用，避光短期 3 天内用完，不建议长期储存，原液密封保质期稳定。

染色后条带拖尾、弥散是什么原因？

①染料浓度过高，降低添加量；②核酸上样超载，减少上样量；③缓冲液过期，更换新鲜 TAE/TBE 电泳缓冲液；拖尾优先改用泡染法改善效果。

YALEPIC® RNA HS Assay Kit的检测灵敏度能达到多少？适合检测哪些低浓度RNA样本？

本试剂盒最低检测限可达1 pg/μL，线性范围覆盖1 pg/μL～100 ng/μL，跨越5个数量级。非常适合血浆cfRNA、血清游离RNA、尿液RNA、外泌体RNA、病毒RNA（如新冠、HBV等低载量样本）等超低浓度RNA样本的精准定量检测。

这个RNA高灵敏检测试剂盒和普通的Qubit/NanoDrop有什么区别？为什么NGS实验室要用它？

Qubit和NanoDrop适用于中高浓度RNA样本（通常>1 ng/μL），而液体活检cfRNA、外泌体RNA等样本浓度往往低于1 ng/μL，普通方法无法准确检测。YALEPIC^® RNA HS采用专利荧光定量技术，专为pg级超低浓度RNA设计，是NGS建库前确保RNA投入量精准的关键质控工具，能有效避免因RNA定量误差导致的测序数据偏差。

YALEPIC® RNA HS Assay Kit需要什么仪器？操作复杂吗？

本试剂盒兼容Qubit^®系列荧光计及其他适配荧光检测平台的仪器

1000rxns的规格能用多久？单次检测成本是多少？

1000rxns规格适合中大型NGS实验室日常使用。按每样本1次检测计算，1000rxns可检测1000个样本，目录价2925元，单次检测成本仅约2.9元，批量采购可享更优惠价格，性价比极高。

这个试剂盒可以用于病毒RNA载量检测吗？比如新冠或HBV？

完全可以。本试剂盒的超高灵敏度（1 pg/μL）使其非常适合病毒RNA载量的精确定量，包括新冠病毒（SARS-CoV-2）、流感病毒、HBV、HCV、HIV等。相比传统RT-qPCR定量方法，本试剂盒可先对提取后的病毒RNA进行精准浓度测定，再指导后续qPCR体系的RNA投入量，显著提升病毒载量检测的准确性与重复性。

试剂盒的保存条件是什么？运输有什么要求？

请于 -20°C避光保存，避免反复冻融，开封后建议6个月内用完。运输推荐 -20°C干冰运输；若常温运输，请使用冰袋保温并在72小时内送达。具体请参照随货COA报告。

雅礼生物YALEPIC® RNA HS Assay Kit和其他品牌的RNA定量试剂盒相比有什么优势？

核心优势有三点：①灵敏度更高——最低1 pg/μL，行业领先；②线性范围更宽——5个数量级，一管覆盖痕量到高浓度；③性价比更优——1000rxns大包装，单次成本低至2.9元。此外，雅礼生物提供完整的技术支持与定制化服务，是国产高通量测序质控试剂的优质之选。

如何批量采购YALEPIC® RNA HS Assay Kit？有没有技术支持？

批量采购请直接拨打 0512-66256010 联系雅礼生物销售团队。雅礼生物提供专业的售前技术咨询与售后应用支持，可根据您的实验需求提供定制化方案。