YALEPIC®
Script X cDNA第一链合成试剂盒适用于哪些实验?
适用于RT-PCR、RT-qPCR基因表达分析、全长cDNA克隆、RNA-seq文库构建、杂交等多种下游应用。特别适合具有复杂二级结构的RNA模板及低丰度基因的逆转录。
得到的RNA还需要做DNase处理吗?
本试剂盒通过双柱分提设计,基因组DNA在过柱阶段即被DNA吸附柱捕获,RNA产物的基因组DNA残留低,常规RT-PCR、Real Time RT-PCR可直接使用。如下游实验对DNA残留极为敏感,建议按下游实验要求另行进行DNase处理或设置无逆转录酶对照(-RT对照)加以验证。
YALEPIC®
MagEVO 磁珠法唾液DNA提取试剂盒适用于哪些类型的样本?
本试剂盒适用于新鲜唾液样本、含保存液的唾液样本以及口腔拭子样本。样本收集过程无痛、无创,受试者仅需吐取适量唾液即可完成采样,既适用于医院检验科和第三方医学检验所的批量检测,也适用于科研院校的遗传学研究及法医鉴定机构的人员筛查。
本试剂盒最大支持多少体积的样本起始量?
标准适配1~5ml血浆、血清、羊水、尿液等无细胞体液,是大体积 cfDNA 提取专用试剂盒,满足大样本量富集需求。
试剂盒提取的 cfDNA 适合做 NGS 建库测序吗?
完全适配。产品针对短片段 cfDNA 定向优化,小片段占比高、无扩增偏好、核酸纯度高,无基因组 DNA 污染,可直接用于 NGS 文库构建、高通量测序及液体活检实验。
可以用于全自动核酸提取仪吗?有适配方案吗?
支持手动提取与全自动高通量工作站双模式;同时提供 A/B/C 三款预装型试剂,无需手动配置体系,直接适配主流自动化提取设备,批量处理更高效。
尿液、羊水样本可以用这款试剂盒提取 cfDNA 吗?
可以。试剂盒缓冲液体系兼容血浆、血清、羊水、尿液多种无细胞体液,能有效去除尿液杂质、羊水蛋白干扰,稳定纯化高质量游离 DNA。
试剂盒运输和保存需要冷藏冷冻吗?
无需冷链。支持常温运输,日常 10~30℃室温避光即可保存,无需冷藏冷冻,仓储和使用更便捷。
提取 cfDNA 产量偏低是什么原因?如何提升得率?
① 建议采用cfDNA 专用采血管,采血后 尽快分离血浆,避免白细胞裂解释放 gDNA 污染;② 可适当提升样本起始体积至 3-5ml;③ 严格按照说明书裂解、结合步骤操作,磁珠充分混匀孵育,可小幅提升洗脱体积增加回收量。
洗脱后的 cfDNA 可以长期保存吗?
洗脱后的 cfDNA 建议短期 4℃保存,长期需放置 – 20℃分装冻存,避免反复冻融,可最大程度维持核酸完整性。
预装型和普通款试剂盒有什么区别?
普通款为散装试剂,需自行配置体系;A/B/C 预装型为即用型预制试剂,孔板预分装,直接上机使用,节省实验准备时间,更适合高通量自动化实验。
提取过程会用到酚、氯仿等有毒试剂吗?
不会。试剂盒采用温和裂解磁珠纯化法,全程无酚、氯仿、β- 巯基乙醇等有毒有机溶剂,实验安全无污染。
本试剂盒适配哪些样本类型,样本起始用量范围是多少?
适配血浆、血清、羊水等无细胞体液;标准起始样本量为0.2~1mL,兼容 EDTA 常规采血管、Streck 等 cfDNA 专用稳定剂采血管采集的血液样本。
试剂盒能否用于全自动核酸提取仪,适配哪些通道机型?
完全支持自动化提取,兼容32 通道、96 通道主流核酸提取仪,同时配套优化预装型试剂(A 型 / B 型 / C 型),无需手动配液,直接上机使用。
提取的 cfDNA 适合做哪些下游实验,是否有抑制剂残留?
纯化产物无蛋白、盐离子等抑制剂残留,可直接用于qPCR 荧光定量、NGS 二代测序、文库构建、无创产前筛查、肿瘤液态活检、甲基化分析等实验。
为什么提取后 Nanodrop 检测浓度偏低,是提取失败吗?
不是提取失败。cfDNA 本身在血浆中天然含量极低,属于微量核酸;Nanodrop 紫外检测灵敏度不足,易出现数值偏低偏差,推荐使用 Qubit 高灵敏荧光定量仪检测浓度,结果更精准。
样本采集后如何保存,会影响 cfDNA 提取得率吗?
新鲜血浆建议分离后短期 4℃保存,长期需 – 20℃分装冻存,避免反复冻融;若无法及时处理血液样本,建议使用 cfDNA 专用稳定剂采血管,防止血细胞裂解释放基因组 DNA 污染。
试剂盒储运需要冷链吗,室温保存有效期多久?
无需冷链,支持常温运输;10~30℃室温密封避光保存,未开封状态下有效期稳定,避免放置阴冷潮湿或高于 35℃环境。
试剂盒提取是否会造成短片段 cfDNA 丢失,有无片段偏好?
本试剂盒针对短片段 cfDNA 定向优化,自研纳米磁珠可高效捕获小片段核酸,片段覆盖度均匀,无筛选偏好,最大程度保留样本原始核酸信息。
预装型和普通款试剂盒有什么区别,该如何选择?
普通款 YM26004 为标配试剂,可自行配置适配手动 / 仪器;YM26004-A/B/C 为预装型,提前分装适配仪器耗材,开盖即用,省去配液步骤,适合高通量批量实验,32T 选 A 型、48T 选 B 型、96T 选 C 型。
提取过程是否需要使用酚、氯仿等有毒试剂?
全程无需酚、氯仿、β- 巯基乙醇等有毒有机溶剂,依靠磁珠吸附 + 专属洗涤缓冲液纯化,操作安全,实验环境更友好。
洗脱后的 cfDNA 样品该如何保存,能存放多久?
洗脱后的 cfDNA 短期 4℃可保存 1~3 天,长期建议分装后 – 20℃或 – 80℃冻存,避免反复冻融,防止核酸降解影响下游实验结果。
干血斑DNA提取试剂盒与常规血液DNA提取试剂盒有什么不同?
干血斑DNA提取试剂盒专为滤纸或采血卡上的干燥血斑样本优化设计。常规血液DNA提取试剂盒通常需要新鲜或冷冻抗凝血样本(如EDTA抗凝血),而干血斑试剂盒能够有效处理样本中因干燥过程导致的DNA与蛋白质交联问题,释放被血细胞膜和血红蛋白包裹的DNA。雅礼生物YALEPIC®磁珠法血斑DNA提取试剂盒采用独特的裂解缓冲液体系和纳米磁珠技术,可从3~6片直径3mm的干血斑样本中高效提取高质量基因组DNA,特别适合法医物证、新生儿筛查和流行病学队列研究中滤纸干血斑样本的批量处理。
磁珠法血斑DNA提取试剂盒能配合自动化提取仪使用吗?
可以。雅礼生物YALEPIC®磁珠法血斑DNA提取试剂盒完美适配移液法和磁棒法两大类自动化核酸提取仪器。产品提供预装板规格(货号YM26008-A/B/C,分别对应32T/48T/96T),可直接上机使用。配合自动化仪器,单次可完成96样本的高通量提取,45~60分钟内即可获得PCR-ready的高质量DNA,大幅提升实验效率和样本处理通量,特别适用于大规模筛查和队列研究项目。
从干血斑中提取的DNA纯度和得率如何?
雅礼生物YALEPIC磁珠法血斑DNA提取试剂盒可提供高纯度高得率的DNA提取结果。DNA纯度A260/A280比值通常可达1.7-1.9,最大限度地去除了RNA、杂蛋白、脂质及PCR抑制物等杂质。DNA得率方面,从100μl干血斑样本(约3~6片直径3mm血斑)中可提取微克级基因组DNA,得率与样本原始血细胞数量相关。
提取的DNA可以用于哪些下游实验?
雅礼生物YALEPIC磁珠法血斑DNA提取试剂盒提取的基因组DNA纯度高、完整度好,兼容多种下游分子生物学实验,包括但不限于:常规PCR及多重PCR扩增、荧光定量PCR(qPCR/Real-time PCR)基因表达分析、STR分型与毛细管电泳分析、NGS高通量测序文库构建、基因克隆与载体构建、Southern印迹杂交、基因芯片杂交分析、SNP基因分型检测等。所得DNA可直接用于上述实验,无需额外纯化步骤。
试剂盒能处理陈旧或降解的血斑样本吗?
可以。雅礼生物YALEPIC磁珠法血斑DNA提取试剂盒针对法医场景中常见的陈旧血斑和部分降解样本进行了特别优化。试剂盒采用高效的裂解缓冲液体系,可有效裂解血细胞膜和核膜,释放DNA片段;同时配合高效的洗涤步骤,能够去除血红蛋白、腐殖酸及其他可能抑制PCR反应的杂质。即使是室温存放数周至数月的干血斑样本,试剂盒仍可获得足够质量和数量的DNA模板用于STR分型和法医鉴定分析。对于严重降解的样本,建议适当增加血斑用量(如6~8片血斑)以提高DNA得率。
提取过程中会出现DNA得率低的情况吗?如何解决?
DNA得率低可能由以下原因导致:
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样本问题:干血斑样本原始血量不足、血斑存放时间过长导致DNA严重降解。建议检查血斑样本质量,适当增加血斑用量(3~6片直径3mm血斑)。
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操作问题:磁珠使用前未充分混匀——磁珠静置易沉降,使用前须涡旋振荡至少30秒确保磁珠完全重悬。
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裂解不充分:蛋白酶K活性下降或裂解时间不足。建议检查蛋白酶K保存条件,确保裂解步骤充分进行。
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洗涤缓冲液配制不当:部分洗涤缓冲液首次使用前需按说明书添加无水乙醇。如遇到得率持续偏低,建议严格按照说明书操作步骤重新实验。
该试剂盒可以用于哪些场景的干血斑样本?
雅礼生物YALEPIC磁珠法血斑DNA提取试剂盒适用于多种应用场景下的干血斑样本:
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法医物证鉴定:犯罪现场血痕、性侵犯案件混合斑迹、灾难遇难者身份确认
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亲子鉴定和亲权确认:滤纸采血卡采集的家系血斑样本
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新生儿遗传代谢病筛查:新生儿足跟血干血斑样本的大规模筛查
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临床药物基因组学研究:药物代谢相关基因检测、治疗药物浓度监测
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流行病学队列研究:大规模人群队列的遗传学分析和生物样本库建设
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临床前毒代动力学研究:动物干血斑样本的药物代谢分析
样本类型兼容Whatman 903、S&S 903、FTA卡等多种常用采血滤纸和采血卡。
YALEPIC MagEVO磁珠法血液DNA提取试剂盒可以提取哪些类型的血液样本?
本试剂盒适用于多种血液样本类型,包括:新鲜采集的抗凝全血(EDTA抗凝、柠檬酸钠抗凝、肝素抗凝)、冷冻保存的抗凝血样本、血凝块以及白膜层(Buffy coat)样本。无论样本是新鲜采集还是长期冷冻保存,均可获得高质量的基因组DNA。建议从50μl~1ml的血液样本起始量进行提取,具体起始量可根据下游实验需求调整。
使用本试剂盒提取的血液DNA纯度和产量如何?能否用于NGS测序?
本试剂盒采用独特的纳米磁珠分离技术和优化的缓冲液体系,提取的基因组DNA纯度高,OD260/280比值在1.8-2.0之间,OD260/230比值>1.8,有效去除了血红蛋白、肝素等PCR抑制物。DNA片段完整性可达50kb,产量稳定可靠(从200μl全血中可提取5-15μg高质量基因组DNA)。提取产物完全满足二代测序(NGS)文库构建、荧光定量PCR(qPCR)、Southern印迹杂交等对DNA质量和纯度要求较高的下游实验需求。
本试剂盒是否适配市面上常见的自动化核酸提取仪?需要离心操作吗?
整个血液DNA提取实验需要多长时间?操作步骤复杂吗?
使用YALEPIC MagEVO磁珠法血液DNA提取试剂盒,手工操作部分非常简便(仅需加样和简单的磁力架分离步骤),全流程可在1小时内完成。如果配合自动化核酸提取仪使用,在96深孔板模式下,单次提取(包括裂解、结合、洗涤和洗脱)仅需35-45分钟,显著提升实验室工作效率。整个过程无需使用酚/氯仿等有毒有机溶剂,操作安全环保。
提取的DNA产物纯化后可以直接用于哪些下游实验?
本试剂盒提取的高质量基因组DNA可广泛应用于以下分子生物学实验:
- 荧光定量PCR(qPCR)和常规PCR:用于基因表达分析、病原检测、基因分型等
- 二代测序(NGS):文库构建、全基因组测序、靶向测序、宏基因组测序
- 基因克隆与载体构建:限制性酶切、连接转化
- Southern印迹杂交:基因拷贝数分析、转基因检测
- 芯片检测:基因芯片杂交、SNP分型
- 酶切分析:限制性片段长度多态性(RFLP)分析
提取产物无需进一步纯化,可直接作为模板投入上述实验。
试剂盒的保存条件和有效期是怎样的?是否需要冷链运输?
YALEPIC MagEVO磁珠法血液DNA提取试剂盒支持常温运输(10~30℃),无需冷链物流,可有效降低运输成本。产品到货后请于10~30℃室温条件下避光保存,请勿冷冻。在正确保存条件下,产品有效期为自生产之日起12个月。开封后请尽快使用,使用完毕后及时盖紧瓶盖,避免试剂受到污染或成分挥发。
试剂盒中的磁珠是否会对下游PCR或qPCR产生抑制?
本试剂盒在洗脱步骤中采用了优化的低盐洗脱缓冲液,能够最大限度地减少磁珠残留,确保洗脱的DNA产物中不含有抑制PCR反应的成分(如高盐、EDTA残留等)。同时,试剂盒的洗涤步骤经过专门优化,可有效去除血红蛋白、肝素、蛋白质等PCR抑制物。提取的DNA产物可直接用于PCR和qPCR反应,无需额外纯化步骤。如果您的下游实验对抑制剂高度敏感,建议适当稀释DNA模板后再进行扩增反应。
本试剂盒是否可以提取病毒DNA/RNA或cfDNA?如不能,贵公司是否有相关产品?
YALEPIC MagEVO系列专注于血液基因组DNA的提取,特别适合从全血样本中提取高分子量基因组DNA。如果您需要提取血液中的病毒DNA/RNA或游离DNA(cfDNA/cfRNA),雅礼生物提供专门的YALEPIC系列病毒DNA/RNA提取试剂盒和游离DNA提取试剂盒,分别针对低丰度病原核酸和微量cfDNA样本进行了优化,欢迎通过官方联系方式咨询选购。
首次购买本试剂盒,是否需要额外购买配套设备或耗材?
您可以根据实验规模选择合适的提取方式:
手工提取(低通量) :仅需配备磁力架(可单独购买或自备),无需其他特殊设备。建议配合使用无核酸酶的离心管和移液枪头。
自动化提取(高通量) :需配备磁珠法自动化核酸提取仪,并配套使用96孔深孔板和磁棒套等自动化耗材。
产品使用过程中遇到提取得率低或纯度不理想的情况,应该如何排查?
如遇提取得率低或纯度不理想的情况,建议按以下步骤排查:
- 样本问题:检查血液样本是否新鲜、是否正确使用了抗凝剂(推荐EDTA或柠檬酸钠),样本是否反复冻融
- 裂解步骤:确认裂解液是否充分混匀,裂解时间和温度是否符合说明书要求
- 磁珠分离:确认磁力架是否正常工作,磁珠是否被充分吸附和收集
- 洗涤步骤:确认洗涤缓冲液是否按要求配制和使用,洗涤次数是否充足
- 洗脱步骤:确认洗脱缓冲液是否预热(推荐65℃预热),洗脱时间是否足够(建议5-10分钟)
磁珠法提取血液RNA的原理是什么?
血液样本在裂解体系中释放总RNA后,具有独特分离作用的纳米磁珠在专属缓冲体系下特异吸附核酸形成磁珠-核酸复合物;再借助磁性分离装置实现固液分离,经洗涤去除蛋白与盐离子等杂质,最后洗脱获得高纯度血液总RNA。整个过程以磁力分离替代反复离心,操作更简洁、重复性更好。
适用哪些抗凝剂的血液?肝素抗凝血也能提吗?
适用于新鲜抗凝血,兼容柠檬酸盐、EDTA、肝素等常见抗凝剂处理的多种属血液样品。肝素抗凝血同样在适用范围内,具体操作请按随附说明书执行。
上样量多少合适?
请按随附说明书建议的上样体积操作。上样量过大会导致裂解不充分或磁珠过载、抑制物残留升高,过小则得率偏低;如需获得更高得率,可在说明书允许范围内调整,切勿自行超量。
血液样本需要做红细胞裂解等前处理吗?
本产品可从新鲜抗凝血中直接提取血液总RNA,具体是否需要红细胞裂解或其他前处理步骤,请以随附说明书为准。不同抗凝剂、不同物种样本的最佳处理方式可能存在差异,建议先按说明书推荐流程操作。
RNA中残留的基因组DNA怎么处理?
磁珠吸附与洗涤环节可有效去除蛋白等杂质,本产品gDNA残留低。如下游实验对DNA残留极为敏感,建议设置无逆转录酶对照(-RT对照)验证,或选用带gDNA去除功能的逆转录/qPCR试剂盒进一步消除干扰。
提取的RNA可用于哪些下游实验?
可用于RT-PCR、荧光定量PCR(qPCR)、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译、RNase保护分析、cDNA合成与分子克隆,以及基因表达芯片分析、二代测序建库等对RNA质量要求较高的实验。
磁珠法与柱式法血液RNA提取怎么选?
磁珠法(本产品 YMR91007)天然适配自动化核酸提取仪与96孔高通量流程,适合批量样本、追求重复性与效率的场景;柱式法操作直观、设备要求低(常规台式离心机即可),适合手动处理中低通量样本。两类方法所得RNA均可用于常规下游实验,可按实验室通量与自动化条件选择。
如何保存和运输?需要注意什么?
常温运输。YALEPIC® Tryzol Reagent 需 2~8℃ 避光保存,其他组分 10~30℃ 室温保存。避免阳光直射与高温;首次使用前按说明书要求配制相应工作液。具体有效期请以产品包装与COA标注为准。
RNA质量怎么评估?
建议结合三点:① 分光光度计测浓度与 A260/A280 比值(RNA 参考值约 2.0);② 琼脂糖凝胶电泳观察 28S/18S 条带是否清晰完整;③ 需要更高要求时用 Agilent 等毛细管电泳评估 RIN 值。质量合格与否应以能否稳定通过下游 qPCR / 建库为准。
能否上自动化核酸提取仪?
本产品为磁珠法 96T 规格,磁珠法体系天然适配自动化核酸提取仪与高通量工作站。具体适配机型与程序参数请与雅礼生物技术支持确认,我们会协助提供上机方案与验证建议。
一份全血真的能同时提取DNA和RNA吗?两者怎么分开?
可以。本试剂盒采用双柱分提设计:裂解物先经YM2基因组DNA吸附柱,基因组DNA被捕获在DNA柱上;随后总RNA经RT柱选择性结合纯化。DNA与RNA分别在不同离心柱上洗涤、洗脱,分管收集、互不干扰,无需对同一样本二次取样。
与传统酚/氯仿法相比,柱式法血液共提取有什么优势?
①全程无需酚、氯仿等有毒有机试剂,操作安全;②无需乙醇沉淀,流程更快(约1小时);③硅胶膜特异性结合,血红蛋白、免疫球蛋白、肝素等杂质去除更彻底;④步骤标准化,多样本并行一致性强。
能用哪些抗凝剂的血液?肝素抗凝血也能提吗?
适用新鲜全血及经柠檬酸盐、EDTA、肝素等抗凝剂处理的多种属血液样品。肝素是强效酶抑制剂,是血液核酸提取的常见难点;本试剂盒专属缓冲体系可针对性去除肝素等抑制物,肝素抗凝血液亦可获得可扩增的高质量核酸。
血液样本提取有什么特殊难点?本产品如何应对?
血液难点在于血红素、肝素、免疫球蛋白等酶抑制剂与杂质蛋白含量高,且血液上样量往往较低。本试剂盒通过硅基质材料高效吸附核酸,并配合专属洗涤缓冲液有效去除上述抑制物与蛋白杂质,即使在低上样量下也能获得高纯度产物。
提取的DNA和RNA可用于哪些下游实验?
基因组DNA:酶切、PCR、Southern杂交、SNP分型、芯片分析、高通量测序、分子克隆等;总RNA:RT-PCR、Real Time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、Poly A筛选、体外翻译、cDNA合成、基因表达与miRNA分析等。
得到的RNA还需要做DNase处理吗?
本试剂盒通过双柱分提,基因组DNA在过柱阶段即被DNA吸附柱捕获,RNA产物的基因组DNA残留低,常规RT-PCR、Real Time RT-PCR可直接使用。如下游实验对DNA残留极敏感,建议设置无逆转录酶对照(-RT对照)加以验证,必要时再行DNase处理。
血液样本采集和保存要注意什么?
请使用合适的抗凝管(EDTA/柠檬酸盐/肝素)采集,避免溶血;采集后尽快进入裂解步骤,如需暂存建议-70℃冻存并避免反复冻融,以保护RNA完整性。本试剂盒裂解液可在裂解时迅速灭活RNase,越早裂解、RNA质量越好。
洗脱体积多少合适?
请按随附说明书建议体积洗脱。洗脱体积过小会显著降低核酸回收率,一般不建议低于说明书下限;如需获得高浓度核酸,可适当减少洗脱体积,但应保证充分浸润吸附膜并适当延长洗脱静置时间。
试剂盒如何保存和运输?
常温运输,10~30℃室温保存即可,无需冷链,避免阳光直射。具体保质期请以产品包装及COA标注为准。
柱式法YB25006与磁珠法血液共提取产品怎么选?
柱式法(YB25006)操作直观、设备要求低(常规台式离心机即可),适合手动处理中少量样本;磁珠法(如YALEPIC® MagEVO系列)易于自动化,适合大样本量与高通量工作站批量处理。两类产物的DNA与RNA均可直接用于常规下游实验,可按实验室通量与自动化条件选择。
血液RNA提取试剂盒能从哪些动物血液中提取RNA?
YALEPIC® 血液RNA提取试剂盒适用于人、小鼠、大鼠、兔、猪、牛、羊等多种哺乳动物的新鲜全血样本。兼容EDTA、柠檬酸盐、肝素等常见抗凝剂处理的血液样品,覆盖临床检验、基础科研和畜牧兽医等多领域需求。
血液RNA提取试剂盒一次能处理多少血液样本?
本试剂盒单次推荐处理量为≤ 1.5 mL全血(更大血液量可咨询雅礼生物技术团队)。在此范围内可获得稳定的RNA得率与纯度。如需处理更大量样本,建议分装后分批提取,以确保裂解充分、RNA质量稳定。
提取的血液RNA纯度如何?能否直接用于RT-qPCR?
本试剂盒提取的血液总RNA经NanoDrop检测,A260/A280比值通常≥1.9,A260/A230比值≥1.5,纯度高,可有效去除血红素、肝素等PCR抑制因子。提取的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time RT-qPCR等实验,无需额外纯化步骤。
血液RNA提取试剂盒是否含有DNase I?如何去除基因组DNA污染?
本产品(货号YR23003)不含DNase I。若下游实验对基因组DNA残留敏感(如RT-qPCR定量分析),建议在RNA提取后使用雅礼生物提供的DNase I(单独订购)进行柱上或柱外DNase消化处理,以彻底去除基因组DNA污染。
血液RNA提取过程中需要用到酚或氯仿吗?
不需要。YALEPIC 血液RNA提取试剂盒采用柱式法纯化技术,全程无需酚、氯仿等有毒有机试剂抽提,操作安全环保,符合现代实验室绿色安全规范,尤其适合需要频繁操作的科研与检验人员。
提取的血液RNA可以用于高通量测序(RNA-Seq)吗?
可以。本试剂盒提取的血液总RNA完整性好(琼脂糖凝胶电泳可见清晰的28S/18S rRNA条带),纯度高,完全满足RNA-Seq高通量测序、基因芯片分析等对RNA质量要求较高的下游实验。
试剂盒的保存条件是什么?需要冷藏吗?
本试剂盒全组分可在10~30℃室温条件下保存,无需冷藏或冷冻。常温运输即可,无需干冰或冰袋,有效降低物流与仓储成本。建议密封避光保存,开封后请及时使用。
全血样本采集后多久内需要提取RNA?
为获得最佳RNA质量,建议在全血采集后尽快(2小时内)进行RNA提取。若不能及时处理,可将抗凝全血样本暂时保存于2~8℃(不超过24小时),或分离白细胞后于-80℃冻存。长期保存建议使用雅礼生物血液RNA样本保存管进行室温稳定化处理。
血液RNA提取试剂盒与组织RNA提取试剂盒有什么区别?
血液RNA提取试剂盒专门针对全血样本的特殊性进行了优化,裂解体系可充分裂解血细胞并有效去除血红素等血液特异性抑制因子。而组织RNA提取试剂盒则针对固体组织的机械匀浆与蛋白去除进行了专门设计。建议根据实际样本类型选择对应试剂盒,以获得最佳提取效果。
雅礼生物的血液RNA提取试剂盒可以批量采购或OEM定制吗?
可以。雅礼生物支持血液RNA提取试剂盒的批量采购与OEM/ODM定制服务,可根据客户需求提供不同规格包装、定制标签及技术支持。如有大批量采购或定制需求,请通过官网在线留言或拨打服务热线 0512-66256010 联系我们获取专属报价。
全血DNA提取试剂盒一次可以处理多少血液样本?
本试剂盒推荐每离心柱处理200 µL抗凝全血(EDTA、枸橼酸钠等),亦可用于血沉棕黄层或骨髓样本。若血液白细胞计数极低(如严重白细胞减少症患者),可适当增加上样量至300 µL,并通过重复结合步骤保证回收率。
血液基因组DNA提取步骤需要多长时间?
整个血液基因组DNA提取流程通常在30-40分钟内完成。具体步骤包括:样本裂解(10分钟)、结合(2分钟)、洗涤两次(各1分钟离心)、干燥膜(1分钟)和洗脱(1分钟)。若需最大化产率,可将洗脱液在60℃预温并孵育5分钟后再离心收集,这样整个流程约延长至45分钟,但得率可提升10%-15%。
使用血液DNA提取试剂盒提纯的DNA能直接用于qPCR或测序吗?
完全可以。提取的基因组DNA纯度OD260/280通常在1.7-1.9之间,无血红素和蛋白残留,且不含有机溶剂,可直接作为模板用于常规PCR、qPCR、多重PCR、二代测序文库构建、甲基化分析等下游应用。对于要求极高的数字PCR,建议洗脱后用适量TE缓冲液稀释后再行加样,以避免洗脱液中微量盐离子对微滴生成的影响。
全血基因组DNA小提试剂盒提取的DNA浓度低怎么办?
DNA得率低常见原因及对策:①血液白细胞数量少(如免疫缺陷患者样本),可增加采血量或在裂解前离心富集白细胞层;②冻存血未充分混匀,取出后应置冰上缓慢解冻并颠倒混匀;③蛋白酶K裂解不充分,确认裂解液未过期,裂解温度保持56℃并适当延长至20分钟;④洗脱液未击中膜中心,洗脱时需将缓冲液垂直滴于膜中央,并室温孵育2-5分钟后离心。若仍无改善,建议用荧光定量法检测微量DNA,排除单链DNA降解问题。
该试剂盒能提取肝素抗凝血的基因组DNA吗?
可以使用肝素抗凝全血,但肝素对PCR有潜在抑制作用。我们建议在裂解步骤将肝素血用PBS洗涤细胞1-2次,或适当增加洗涤步骤(加一次Buffer AW2洗涤)以去除残余肝素。提取后的DNA应进行OD260/230比值检测,确保比值>1.8。对于后续直接进行PCR扩增的实验,若仍出现扩增抑制,可将DNA用3M醋酸钠/乙醇沉淀重溶,或选用对肝素耐受性更好的聚合酶。
血液DNA提取试剂盒与磁珠法试剂盒相比有什么优势?
柱式法血液DNA提取试剂盒在成本、操作简便性和DNA纯度稳定性方面优势明显。与磁珠法相比,柱式法无需磁力架,只需普通台式离心机,单次处理样本量灵活,且洗脱体积小(可低至50 µL),获得的DNA浓度更高,更适用于样本量有限的实验。对于大部分科研和临床常规检测,柱式法已完全满足需求,只有全自动大批量提取时磁珠法才更有通量优势。
提取的基因组DNA如何保存?反复冻融会影响质量吗?
纯化后的基因组DNA建议分装后保存在-20℃,可稳定保存2年以上。如需长期保存,可置于-80℃。避免反复冻融,因多次冻融会造成大片段DNA机械剪切断裂,导致平均长度降低。每管DNA溶液冻融次数应控制在3次以内。
什么是血液直扩PCR裂解液?和传统DNA提取有什么不同?
血液直扩PCR裂解液是一种专门用于全血样本的化学裂解试剂,可在不进行DNA纯化的情况下直接裂解血细胞并释放基因组DNA,裂解产物即可作为PCR/qPCR扩增模板。与传统DNA提取方法(如硅胶膜离心柱法、酚-氯仿抽提法)相比,本产品无需有机溶剂、无需离心柱耗材、操作步骤从10余步减少至2–3步,整个样本处理时间从1–2小时缩短至5–15分钟,显著提升实验效率,同时降低样本交叉污染风险。
YALEPIC®
血液直扩裂解液可以用于哪些类型的血液样本?
本裂解液兼容广泛的血液样本类型,包括:新鲜采集的抗凝血(EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝均可)、4°C短期储存的血液、-20°C或-80°C长期冻存的血液,以及Whatman 903、FTA卡等商用血卡上的干血渍样本。不同类型的血液样本在裂解效果和下游扩增性能上均表现稳定。
裂解后的样品是否需要进一步处理才能用于PCR/qPCR?
不需要。本裂解液采用优化的配方设计,裂解产物可直接作为PCR/qPCR模板使用,无需额外的纯化步骤。但建议在裂解后短暂离心(如3,000–5,000 rpm离心2–3分钟),取上清用于扩增反应,以避免血细胞碎片对扩增体系的物理干扰。
血液样本用量应该如何控制?
推荐血液模板用量为PCR总反应体积的5%–10%。例如50 μL PCR反应体系中加入2.5–5 μL全血样本。对于某些难扩增靶标或低拷贝数模板,可在5%–20%范围内优化血液加入量,但建议不超过总反应体积的30%,过高的血液比例可能引入过多抑制剂影响扩增效率。冷冻血液样本应避免反复冻融,以免DNA片段化影响长片段扩增。
裂解液如何保存和运输?常温下能放多久?
本裂解液可在室温(15–25°C)条件下保存和运输,无需冷链支持。未开封产品有效期12个月。开封后建议避光保存于室温环境,取用后及时旋紧瓶盖,避免污染和水分挥发。如需长期储存,可置于4°C,但使用前需恢复至室温并充分混匀。
本裂解液可以用于qPCR实时荧光定量检测吗?
可以。YALEPIC®血液直扩裂解液经过专门优化,裂解产物可直接用作qPCR模板,兼容SYBR Green法和TaqMan探针法两种主流qPCR检测体系。在血液样本的基因表达定量、病原体载量检测、SNP基因分型等qPCR应用中均可稳定使用。但建议首次使用某一特定qPCR体系时进行预实验优化,以确定最佳裂解条件和模板加入量。
使用本产品进行血液直扩时,为什么有时候扩增不出来或Ct值偏高?
可能的原因包括:
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血液抑制剂负荷过高:某些溶血严重或保存不当的血液样本中血红素等抑制剂含量较高,建议适当降低血液模板比例(如从10%降至5%);
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裂解不充分:血液样本量过大或裂解时间不足,建议按说明书推荐比例加入裂解液并确保充分孵育;
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引物设计问题:直扩体系中引物设计需考虑裂解产物中可能存在的残留抑制剂,建议使用经过直扩体系验证的引物;
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靶标拷贝数过低:低丰度靶标可尝试增加模板投入量或优化扩增循环参数。
建议逐一排查上述因素,必要时可联系雅礼生物技术支持获取个性化优化方案。
本裂解液与YALEPIC®
血液直扩PCR试剂盒有什么区别?可以搭配使用吗?
本裂解液(YALEPIC® Blood Direct PCR/qPCR Lysis Buffer)仅提供血液样本裂解功能,裂解后需配合常规PCR Mix或qPCR Mix完成扩增。而YALEPIC®血液直扩PCR试剂盒(Blood Direct PCR Kit)为一体化解决方案。用户可根据实验需求灵活选择:若已拥有成熟的扩增体系,可单独购买裂解液;若希望获得最优的直扩效果,建议购买全套试剂盒。
本产品是否兼容自动化高通量处理?
是。本裂解液支持96孔板等自动化移液工作站的高通量操作,裂解步骤可在多孔板中并行处理,配合自动化PCR/qPCR系统可实现从样本裂解到结果检测的全流程自动化,特别适用于基因检测中心、疾控中心等需要日处理成百上千份样本的高通量场景。
YALEPIC®
血液直扩裂解液是否通过相关质量认证?是否可以用于临床诊断?
本产品严格按照医疗器械生产管理体系生产,每一批次均经过严格的质检放行。但根据中国医疗器械监管法规,本产品仅供科研使用,不可直接用于临床诊断。如需临床诊断用途,客户需自行完成相关注册和验证工作。雅礼生物可根据客户需求提供OEM定制和临床报证技术支持。
这款采血卡 DNA 提取试剂盒适配哪些样本类型?
本试剂盒专为干血斑、采血卡血片、血液印迹样本设计,仅用于此类样本的基因组 DNA 提取,适配常规科研实验室血液样本前处理需求。
试剂盒不含 RNase A 会影响 DNA 提取效果吗?
不会影响核心 DNA 提取纯度与完整度。试剂盒自带优化缓冲体系,可自主高效去除样本中大部分 RNA 杂质;若需完全降解微量 RNA,可自行搭配通用 RNase A 使用,适配不同实验精度需求。
提取全程需要使用苯酚、氯仿等有毒试剂吗?
不需要。采用改良硅胶膜离心吸附原理,全程规避苯酚、氯仿等有毒有机溶剂,也无需乙醇沉淀步骤,操作安全、实验流程更简洁。
完成一次 DNA 提取大概需要多长时间?
标准化实验流程40min即可从干血斑 / 血片样本中完成基因组 DNA 裂解、结合、洗涤、洗脱全套操作,高效节省实验周期。
提取后的 DNA 可用于哪些下游实验?
提取的高纯度基因组 DNA 可广泛用于限制性酶切、普通 PCR 扩增、Real-Time PCR 实时荧光定量、Southern 印迹杂交、基因文库构建等分子生物学实验。
试剂盒运输和保存有什么特殊要求?
支持常温运输,无冷链运输限制;日常存放只需置于10~30℃室温干燥避光环境即可,储存条件宽松,易存放。
提取的 DNA 会存在蛋白、脂类残留抑制实验吗?
不会。试剂盒独特缓冲体系可最大限度去除杂蛋白、脂类及各类 PCR 抑制性杂质,DNA 纯度达标,无明显实验抑制现象,重复性好。
提取的DNA可以用于哪些下游实验?
提取的基因组DNA可直接用于以下下游分子生物学实验:
- 普通PCR扩增检测
- Real-Time PCR(荧光定量PCR)
- 基因文库构建(NGS建库)
- Southern Blot杂交分析
- 分子标记分析(SSR、SNP、RAPD等)
- DNA条形码鉴定(植物源性成分鉴别)
- 淀粉掺假检测与真伪鉴定